广西不同产地华南忍冬中绿原酸含量测定

　　2.4  线性关系考察

    精密吸取上述绿原酸对照品溶液1 mL,置2 mL容量瓶中,加70%乙醇稀释至刻度,摇匀,得浓度为0.15 mg/mL对照品溶液。按此方法分别制得浓度为0.075、0.037 5、0.018 7 mg/mL的对照品溶液,按上述色谱条件分别进样测定。以峰面积积分值为纵坐标,绿原酸的浓度(mg/mL)为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程为：Y＝71 290.516 9X－159.978 53,r＝0.999 8,结果表明在0.187 0～3.00 mg范围内线性关系良好。

　　2.5  精密度试验

    精密量取上述同一供试品溶液10 μL,重复进样6次,按上述色谱条件测定,绿原酸峰面积积分值的RSD＝0.50%。

　　2.6  重复性试验

    分别取同一批样品各6份,按“2.2”项下方法制备并进行测定,结果绿原酸的平均含量为3.30%,RSD＝1.05%。

　　2.7  稳定性试验

    取同一供试品溶液,按上述色谱条件,分别在0、2、4、8、16、24 h不同的时间点进行检测,考察样品溶液的稳定性。结果表明,绿原酸的RSD＝1.06%,说明供试品溶液在24 h内稳定。

　　2.8  加样回收率试验
   
　　取已知含量的样品0.05 g,精密称定,分别精密加入绿原酸对照品溶液(1.096 mg/mL)1 mL,按照“2.2”项下方法制备,依次测定,计算回收率。结果见表1。表1  加样回收率测定结果（略）
 
　　2.9  样品测定
   
　　取10批广西不同产地的样品,按上述测定方法进行测定,以外标峰面积法计算样品的含量。结果见图1、表2。表2  广西不同产地华南忍冬样品中绿原酸含量测定结果（略）

　　3  讨论
   
　　2005年版《中华人民共和国药典》中,山银花的含量测定使用乙腈-0.4%磷酸溶液(8∶92)作为流动相；而在试验过程中,反复使用此条件都不能使样品有很好的分离结果,后采用甲醇-乙腈-0.05%磷酸溶液三相作为流动相,采用梯度洗脱的方法,使样品中绿原酸峰以及其它峰得到很好的分离。广西华南忍冬的产地主要分布在广西的上思县、横县、邕宁县等地,多为野生零散分布,但其主要有效成分绿原酸含量均已达到《中华人民共和国药典》要求,如能按照GAP规范种植、集中管理,药材质量可能会得到更大的提升。由于不同的生长条件,广西不同产地的山银花——华南忍冬主要有效成分绿原酸含量存在一定的差异。研究发现,上思县百包平纳队的华南忍冬绿原酸含量较其它产地高,可能与其特定的生长环境有关。因此,种植药用华南忍冬药材时对生境、土壤及水肥等种种因素进行优化尤为重要。

【参考文献】
  　　[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.21－22.