高效液相色谱法测定种子三达丸中芍药苷的含量

                   作者：张国民,杨工昶,齐赤虹,王海迪  

【摘要】  目的 建立高效液相色谱法测定种子三达丸中芍药苷含量的方法。方法 色谱柱采用Kromasil-C18(5 μm, 4.6 mm×250 mm)；流动相为甲醇-水(30∶70)；检测波长为230 nm；流速为1.0 mL/min。结果 芍药苷在0.11～2.14 μg范围内呈良好的线性关系(r＝0.999 9,n＝5),平均回收率为98.2%(RSD＝1.72%,n＝6)。结论 本方法简便、可靠、准确,可用于该制剂的质量控制。

【关键词】  种子三达丸；芍药苷；高效液相色谱法；含量测定

       Determination of Peoniflorin in Zhongzi Sanda Pill by HPLC  ZHANG Guo-min, YANG Gong-chang, QI Chi-hong, et al 1.Kaifeng Institute for Drug Control, Kaifeng 475002, China；2.Henan Medical and Pharmaceutical School, Kaifeng 475001, China    Abstract：Objective To establish a HPLC method for determination of Peoniflorin in Zhongzi Sanda Pill. Method Kromasil-C18 column (5 μm, 4.6 mm×250 mm) was used. Mobile phase was methanol-water (30∶70). The detective wavelength was at 230 nm. The flow rate was 1.0 mL/min. Results There was a good linear relationship between the injection amount 0.11～2.14 μg and a good peak form for Peoniflorin in Zhongzi Sanda Pill. The average recovery rate was 98.2% (RSD＝1.72%, n＝6). Conclusion This method is convenient, effective and accurate for the quality control of Peoniflorin in Zhongzi Sanda Pill.

    Key words：Zhongzi Sanda Pill；Peoniflorin；HPLC；content determination

    种子三达丸由益母草、丹参、白芍等23味药组成,具有调经止痛的功效,用于月经不调、行经腹痛、头晕目眩、赤白带下、四肢浮肿等症的治疗。种子三达丸是原部颁标准《中药成方制剂》[1]第三册收载的品种,方中白芍是君药之一,其主要成分为芍药苷,具有镇静、解痉、抗炎、抗凝血、抗血栓等多方面的作用[2]。原质量标准中无含量测定项,为了有效控制药品质量,确保该制剂的疗效,本试验选用芍药苷作为质量控制的定量指标,采用HPLC法对其进行测定含量,方法简便、准确。

　　1  仪器与试药

    Agilent1100型高效液相色谱仪(VWD检测器)；CX250超声波清洗器(北京)；AE-200电子天平(瑞士)。

    芍药苷对照品(批号110736-200423,中国药品生物制品检定所提供)；样品和阴性对照品均由北海凯运药业有限公司提供。乙腈、甲醇为色谱纯,水为自制超纯水,其余试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  对照品溶液的制备

    精密称取芍药苷对照品适量,加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液,即得。

　　2.2  供试品溶液的制备

    将本品剪碎,取约3 g,精密称定。精密加入稀乙醇25 mL,密塞,称定重量,加热回流30 min,放冷,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀,离心,取上清液,通过中性氧化铝柱(200～300目,约10 g,内径1 cm),取续滤液,即得。

　　2.3  阴性对照液的制备

    取不含白芍的处方同法制备的阴性样品,按“2.2”项下方法制备成阴性对照液。

　　2.4  色谱条件及系统适用性试验

    色谱柱：Kromasil-C18(5 μm,4.6 mm×250 mm)；流动相：甲醇-水(30∶70)；检测波长：230 nm；流速：1.0 mL/min；柱温为室温,理论塔板数按芍药苷峰计应不低于2 000。

　　2.5  线性关系的考察

    精密称取芍药苷对照品2.68 mg,置25 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。分别精密吸取1、5、10、15、20 μL,注入液相色谱仪,记录峰面积。以芍药苷的进样量(μg)为横坐标、峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线,计算,得回归方程：Y＝1 372.8X＋0.244 5(r＝0.999 9,n＝5)。结果表明,芍药苷在0.11～2.14 μg范围内呈良好的线性关系。

　　2.6  方法可行性考察

    精密吸取对照品溶液、阴性对照液与供试品溶液各10 μL,分别注入液相色谱仪,测定,结果见图1。阴性样品溶液对测定无干扰,芍药苷与其他组分分离良好,方法可行。