高效液相色谱法测定种子三达丸中芍药苷的含量

　　2.7  精密度试验

    精密吸取同一对照品溶液10 μL,重复进样5次,测定芍药苷的吸收峰面积,RSD＝1.44%,表明精密度良好。

　　2.8  稳定性试验
   
　　取同一批号样品(批号20060118)的供试品溶液,分别于0、2、4、6、8、10 h进行测定,记录峰面积,芍药苷峰面积的RSD＝0.84%。表明供试品溶液在10 h内基本稳定。

　　2.9  重复性试验

    取同一批号样品(批号20060118)剪碎,精密称取6份,每份3 g,按“2.2”项下方法制备供试液,依上述色谱条件测定,计算,芍药苷的平均含量为0.845 mg/g,RSD＝1.67%。表明该方法重复性良好。

　　2.10  加样回收率试验
   
　　精密称取已知含量的样品(批号20060118)6份,分别精密加入芍药苷对照品溶液(1.27 mg/mL)1 mL,再精密加入稀乙醇24 mL,按供试品溶液制备方法制备,依法测定。6次平均回收率为98.2%,RSD＝1.72%。结果见表1。表1  回收率试验结果(略) 

　　2.11  样品测定
   
　　取10批样品,按上述确定的方法和色谱条件进行测定,结果见表2。表2  芍药苷含量测定结果(略)
 
　　3  讨论

    流动相的选择参考文献[3-4],曾分别选以下流动相：①乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86),②乙腈-0.1%磷酸溶液(15∶85),③甲醇-0.1%磷酸溶液(30∶70),④甲醇-水(30∶70),⑤甲醇-水(28∶72)。结果表明,在流动相④条件下芍药苷峰与其它色谱峰达到较好分离,且峰形对称、尖锐。为保证色谱条件的可重复性,故选择流动相④作为流动相。

    供试品提取溶剂曾采用稀乙醇、甲醇、70%甲醇进行提取,结果表明,稀乙醇对芍药苷提取效率较高,故选择稀乙醇作为提取溶剂。提取后采用离心,取上清液,通过中性氧化铝柱,取续滤液的方法,避免了有机溶剂萃取的影响,具有简便、快速、无毒等特点。

    试验表明,本含量测定方法简便可靠,易于操作,重现性好,可作为本品质量控制的有效方法。

【参考文献】
  [1] 中华人民共和国卫生部药政局.中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂(第三册)[S].1993.121.

　　[2] 王朝虹,闵知大.芍药化学成分及药理研究[J].时珍国医国药,1999, 10(7)：544.

　　[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.68,634－636.

　　[4] 吴 毅,张文惠,王永刚.HPLC法测定安坤颗粒中芍药苷含量[J].江西中医学院学报,2002,14(1)：42.