两种方法提取甘草酸效率之比较
根据极差(2)分析如下:因为2 064.4/E×L>1 164.1/E×L>639.1/E×L>451.5/E×L,所以,加水量>粉碎时间>煮沸时间>提取次数。根据各试验因子平均数可看出,最佳条件应选取A3B3C1D2,即:每次加水量为2 000 mL,共提取2次,每次煮沸5 min,粉碎时间以20 s最佳。
2组结果一致,为了提取效率更高一些,选择提取次数4次。
3.2 氨水法正交试验结果
(见表4)表4 氨水法直观分析表(略)
根据极差(1)分析如下:因为15.81>6.98>4.85>3.57,所以,溶剂量>振荡时间>氨水浓度>提取次数。根据各试验因子平均数可以看出,最佳条件应选取A2B3C3D1,即:每次加0.4%的氨水2 000 mL,每次振荡2 h,共进行2次。根据极差(2)分析如下:因为9 768.7/E×L>5 651.5/E×L>4 625.3/E×L>4 511.7/E×L,所以,溶剂量>提取次数>振荡时间>氨水浓度。根据各试验因子平均数可看出,最佳条件应选取A2B3C3D1,即:每次加0.4%的氨水2 000 mL,每次振荡2 h,共进行2次。
2组结果一致,为了提取效率更高一些,选择提取次数为4次。
3.3 2种最佳条件甘草酸提取率的对比
各取200 g甘草2份,分别按照上述最佳实验条件进行试验,结果见表5。表5 2种方法所得甘草酸纯度和提取率的对比(略)注:甘草酸纯度=(甘草酸浓度×甘草原料质量)/甘草酸质量;
甘草酸提取率(%)=(甘草酸质量/甘草原料质量)×100%
3.4 验证试验
(见表6)表6 验证试验结果(略)
取甘草200 g,以氨水法A2B3C3D1、水酸法A3B3C1D2为最佳条件,重复试验3次。从表6结果看出,氨水法比水酸法甘草酸纯度高,提取率提高6%,且得出率稳定。
4 讨论
根据正交试验确立的2种最佳条件下提取出的甘草酸粗品和甘草酸溶液中的甘草酸纯度进行对比,发现氨水提较酸水提的甘草酸质量、纯度、提取率都好,可能与水酸提法提取的杂质多有关,而且水酸提时陈化离心去上清,使甘草酸损失较大。同时,水酸提需要恒温振荡2 h,陈化时间2 h,氨水提每次比水酸提缩短5 h左右,而且沉淀物少,说明其提取效率高。经最佳工艺重复试验,氨水提提取率均在25%以上,较以往报道高出15%左右[5],同时与其他工艺相比,具有提取设备简单、操作简单、工作效率高等优点。
致谢:北京医科大学徐治鸿教授在百忙中给予本研究工作具体指导,使工作顺利实施,在此表示感谢!
【参考文献】
[1] Hoever G, Baltina L, Michaelis M, et al. Antiviral activity of glycyrrhizic acid derivatives against SARS-coronavirus[J]. Med Chem,2005,48(4):1256-1259.
[2] 凌秀菊,万端极,吴正奇.甘草酸提取工艺研究[J].湖北工业大学学报, 2006,21(2):12-14.
[3] 上海药物研究所.中草药有效成分的提取和分离[M].上海:上海人民出版社,1972.284.
[4] 黄维安,蒙 颜,黄品莲.正交法试验比较甘草浸膏的提取工艺[J].中国中药杂志,1994,19(5):283-284.
[5] 赖 瑛,王 佩.3种紫外分光光度法测定甘草酸二铵含量的比较[J].中国药业,2004,13(12):46-46.
[6] 贵州农学院.生物统计附试验设计[M].北京:农业出版社,1980.