多指标正交优选肺宁合剂提取工艺

【摘要】  目的 优选肺宁合剂提取工艺。方法 采用正交设计对肺宁合剂水提工艺优化,以浸膏得率、正丁醇萃取得率、甘草酸含量、麻黄碱及伪麻黄碱含量作为指标。结果 肺宁合剂最佳提取工艺为：8倍量水提取2次,每次1 h。结论 优选出的方法准确,重复性好,可用于工业化生产。

【关键词】  肺宁合剂；正交试验；提取工艺

    Key words：Feining mixture；orthogonal design；extraction process

    肺宁合剂是江苏省中医院院内制剂,由麻黄、杏仁、桔梗等7味中药组成,具有止咳、祛痰、平喘作用,临床用于外感咳嗽、支气管炎等症。本试验通过正交设计,以浸膏得率、正丁醇萃取得率、甘草酸含量、麻黄碱及伪麻黄碱含量为指标,优化肺宁合剂提取工艺,为生产提供依据。

　　1  仪器与试药
   
　　Agilent1100高效液相色谱仪,四元泵(G1311A),柱温箱(G1316A),VWD检测器(G1314A),工作站(Chemstation), Agilent手动进样器(10 μL定量环)。Shimazhu Libror AEL- 40SM电子天平(Shimadzu公司)；101-1A型电热鼓风干燥箱(南通沪通制药机械厂)。
   
　　对照品麻黄碱(批号171242-200405)、伪麻黄碱(批号171237-200505)均购于中国药品生物制品检定所；对照品甘草酸购于上海君创生物科技有限公司(纯度>98%)；所用中药材均购于江苏省药材公司,并经本室专家鉴定。色谱测定用水为超纯水,乙腈为色谱纯,其余化学试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  提取溶剂的选择

    通过对麻黄、甘草、桔梗等药物有效成分的分析,麻黄中的生物碱、甘草中的甘草酸及其他各味药材中作为有效成分的皂苷均为水溶性成分,因此,采用水为溶剂回流提取。

　　2.2  正交试验方案
  
　　称取处方量药材9份,选取提取时间(A)、提取次数(B)、
加水量(C)3个试验因素,每个因素3个水平,按L9(34)正交表进行试验,每组平行3份。因素水平安排见表1。以浸膏得率、正丁醇萃取得率、甘草酸含量、麻黄碱、伪麻黄碱含量为指标,综合评价此提取工艺各水平优劣。表1  正交试验因素水平表（略）

　　2.3  各指标含量测定

　　2.3.1  浸膏得率 

　　精密量取正交试验样品9份各10 mL,置蒸发皿中,水浴蒸干后置烘箱中,105 ℃干燥至恒重,计算得率。

　　2.3.2  正丁醇萃取得率 

　　预试验：取正交试验9份样品中浓度最高的一份,即1号样品20 mL,考察萃取次数和每次萃取量对萃取得率的影响。结果前3次萃取得率之和占总共5次萃取得率的95%,从节约的角度出发确定了正丁醇萃取3次即可。

    精密量取9份样品各20 mL,以水饱和的正丁醇萃取3次,每次20 mL,合并萃取液,置蒸发皿中水浴蒸干,恒重,计算得率。

　　2.3.3  甘草酸含量测定 

　　采用Supelco ODS C18(4.6 mm×25 cm, 5 μm)色谱柱,流速：1 mL/min；流动相：乙腈-0.2%磷酸水(35∶65)；检测波长：250 nm；进样量为10 μL[1-4]。正交试验9份样品每份取相当于甘草原药材0.1 g的药液,蒸馏水定容至100 mL,混匀,微孔滤膜滤过,即得供试品溶液。取甘草阴性样品、甘草酸对照品、肺宁合剂样品,分别按上述色谱条件进样,结果甘草酸对照品和肺宁样品在16 min处出现相同峰,甘草阴性样品无干扰。可证明16 min处峰即为甘草酸峰,理论塔板数为9 482,分离度为5.29。