安脉颗粒提取工艺的正交优选

　　2.3.4  供试品的测定 

　　精密量取上述对照品和各供试品溶液,注入液相色谱仪,测定并计算含量。色谱图见图1。

　　2.4  数据处理

    用多指标试验全概率法[3]进行数据处理。设Bi为第i号试验,Aj为第j个指标。i＝1,2……n；j＝1,2……k；且A1,A2……An互不相容,又设各指标的重要程度之比为A1∶A2∶……∶Ak＝m1∶m2∶……∶mk,则
   
　　P(Aj)＝mj/N,j＝1,2……k                  [1]

    以Xij表示第j个指标下的第i个测定值,以Sj表示第j个指标下各次(n次)试验结果的和,即：

    Sj＝   Xij     i＝1,2……n,j＝1,2……k,则
    P(B1/A1)＝Xij/Sj                           [2]
于是全概率公式为：
   
　　P(Bi  ＝∑P(Aj)P(Bi/Ai)     i＝1,2……n   [3]

    [3]式即为同时兼顾各指标综合效应的全概率公式。本例由于2个指标同等重要,互不相容,为方便起见,可按下式计算同时兼顾各指标综合效应的全概率公式,结果见表2。

    P(Bi)＝P(Bi/A1)＋P(Bi/A2)     i＝1,2……n

　　2.5  结果分析
   
　　正交试验结果见表2,方差分析结果见表3。表2  L9(34)提取正交试验结果(略)表3  综合得分方差分析(略)注：F0.01(2,2)=99.00,F0.05(2,2)=19.00
   
　　表3表明,B、C因素不同水平之间有显著性差异,结合Ki值,其最佳的因素水平为A3B3C2D1。即最佳醇提工艺为以药材饮片投料,加9倍量的70%乙醇,回流提取2次,每次1.0 h。

　　2.6  提取工艺验证
   
　　按比例称取药材,共3批。以上述最佳醇提工艺考察并验证最佳工艺,样品处理及测定方法同上。分别测定绿原酸和肉桂酸的含量(见表4)。试验结果显示：优化提取的结果与正交表中的最优水平相接近,说明本研究所确定的工艺合理可行,可操作性强。表4  水提取最佳工艺验证试验结果(略)

　　3  讨论

　　本处方中有多味药材,其制剂工艺的评价如采用单一指标则代表性较差,用不同种类的成分作为评价指标其结果有较广泛的代表性。但由于成分含量不在同一数量级,直接累加则使数量级大的对结果的贡献大,而小的则贡献小,不符合组方原则及治则。通过概率转化可使不同量纲及不同数量级的数据整齐化,且包含了原始数据的可比信息,可直接累加。

    从表3可知,因素B对试验结果影响极显著(P<0.01),因素C对结果影响显著(P<0.05),而因素A对试验结果影响不显著。根据正交试验绿原酸、肉桂酸提取率可见,样品中绿原酸、肉桂酸的含量会因乙醇用量的增加而明显升高,因此选择9倍量的溶剂。综合绿原酸、肉桂酸提取率,选择提取2次为最佳条件。

    在流动相的选择中,经反复试验摸索,选择酸性流动相,因绿原酸、肉桂酸为有机酸,酸性可抑制其电离,出峰时间早,峰形稳定,分离度好。

    笔者在正交试验的基础上对提取工艺进行了试验考察,优化提取的结果与正交表中的最优水平一致,可以作为安脉颗粒提取工艺的

【参考文献】
  1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.153.

　　[2] 马 柯.高效液相色谱法测定清咽颗粒中绿原酸的含量[J].中南药学, 2006,4(6)：452.

　　[3] 倪水兴,彭图婉,曾 译.多指标试验全概率公试评分法研究槐米炭炮制工艺[J].中国药科大学学报,1995,26(6)：259.