HPLC法测定骨痛灵巴布剂中雪上一枝蒿甲素含量

　　2.6  重复性试验

　    取同批骨痛灵巴布剂6片,揭去保护膜,对折后剪碎,混合,称取6份,按“2.2”项下方法制备供试品溶液,分别进样测定,计算含量及平均值,结果RSD＝0.86%(n＝6)。

　　2.7  回收率试验
   
　　取已知含量的骨痛灵巴布剂,揭去保护膜,对折后剪碎,称量,加入雪上一枝蒿甲素对照品,按“2.2”项下方法进行实验,制备供试品溶液,进样测定,计算,结果平均回收率为100.10%, RSD＝2.53%(n＝6)。表1  骨痛灵巴布剂雪上一枝蒿甲素加样回收试验(略)

　　2.8  含量测定
   
　　按“2.2”项下方法实验,制备供试品溶液,分别进样,测定3批骨痛灵巴布剂中雪上一枝蒿甲素的含量,结果见表2。表2  3批骨痛灵巴布剂中雪上一枝蒿甲素的含量测定（略）

　　3  讨论

   　 巴布膏的含量测定难点在于排除基质的影响,找到最简单、可靠的方法。前期的预实验结果表明,由于中药巴布膏由中药提取浸膏、多种水溶性骨架材料、甘油、氮酮等组成,对供试液的制备带来很大的影响。雪上一枝蒿是本制剂的君药,又属有毒药物,测定其有效成分雪上一枝蒿甲素的含量对制剂的质量控制具有重要意义。本研究确定了一种简单、可靠、重复性好的含量测定方法,可以作为骨痛灵巴布膏的质量控制指标。

    　实验中进行了供试品溶液制备的方法学研究：①对提取溶媒进行比较,结果发现甲醇使巴布膏皱缩,某些辅料能溶解其中,使提取液的杂质太多,后续的处理繁琐；乙醚的提取率较低；在加入氨试液后氯仿的提取率高,并且处理方法简单,能够达到测定的要求。②对氨试液加入量的选择,在保证巴布膏能够均匀充分湿润下10、15、20 mL结果差别不大,选择15 mL作为巴布膏的润湿量,既能保证整片巴布膏的完全充分浸润,又使其中雪上一枝蒿甲素能完全碱化。③对提取溶媒氯仿的加入量选择,结果以加入50 mL为好。④对提取方法进行了水浴回流、超声、冷浸的比较,结果以水浴回流提取最完全。⑤对提取回流时间的选择,实验结果证明,回流2.0 h能够提取完全。

　　本研究中在供试品溶液的制备过程中加入氨试液,目的在于：一方面巴布膏吸收氨试液使膏体膨胀,提高了氯仿对膏体的穿透性,又碱化了目标成分,使其易溶于氯仿；另一方面,能够减少水溶性基质、甘油等在氯仿相的溶解。

　　目前《中华人民共和国药典》(一部)中尚未有关于中药巴布膏含量检测控制的标准,本试验方法可为其他巴布膏的质量标准研究提供参考。

【参考文献】
  　　[1] 高绍阳,喻 萍,陈武元,等.RP-HPLC法测定雪上一枝蒿中雪上一枝蒿甲素含量[J].药物分析杂志,2005,25(11)：1382.