益肾活血清利方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中ED1及NF-κB表达的影响作用

　　3 结果

　　3.1 肾形态学检查 肉眼观察可见各结扎鼠左肾(术侧)肿大，颜色变浅，有囊性感，内含混浊的褐色尿液，肾实质变薄或消失;右肾稍肿大、颜色稍浅，肾组织结构清楚。

　　3.2 肾组织标本ED1/ NF-κB免疫组化染色阳性面积 UUO术后21天假手术组右肾小管轻度变性，模型组大鼠右肾小管间质纤维组织呈片状分布，ED1表达以肾间质明显，其中模型组与假手术组比较，P<0.00;中药组、中药高剂量组及苯那普利组表达与模型组比较，P<0.01;中药组、中药高剂量组与假手术组比较，P<0.05;苯那普利组表达与假手术组比较，P<0.01(详见表1及附图1)。

　　NF-κB表达以肾间质明显，其中模型组、中药组与假手术组比较，P<0.01;中药高剂量组表达与模型组比较，P<0.05(详见表1及附图2)。表1 肾组织免疫组化ED1、 NF-κB光密度阳性表达值图1 UUO大鼠肾组织ED1免疫组化表达(×400) 说明：NF-κB在正常组(Ⅰ)表达量极少，模型组(Ⅱ)已丧失正常间质结构，广泛表达NF-κB，中药组(G)、中药高剂量组(H)及洛汀新组(X)的表达依次增强。图2 UUO大鼠肾组织NF-κB免疫组化表达(×400)

　　4 讨论

　　益肾活血清利方是根据慢性肾病“肾虚湿瘀”理论总结的治疗原则组方，本方实验结果显示对UUO大鼠肾间质纤维化进程有着显著的干预作用[2]。慢性肾间质纤维化是多种肾脏疾患进展至终末期肾病的共同通路，与肾损害进展密切相关，决定肾功能的预后[3]。肾间质巨噬细胞积聚可促进肾间质纤维化的发生和进展[4]，巨噬细胞进入肾间质后，分泌一系列促纤维化因子，如TGF-β、FGF、TNF-α、PDGF、EGF等，这些细胞因子可使肾间质肌成纤维细胞合成TIMP、纤溶酶原激活剂抑制物(PAI 1)增多，使基质金属蛋白酶(MMP)减少，从而影响基质转运，加重肾间质纤维化[4]。本实验用药各组对ED1的积聚有着明显的抑制作用，但中药组优于西药组。

　　过量表达的趋化及粘附分子如单核细胞趋化蛋白MCP-1、VCAM-1、ICAM-1等，可导致组织局部单核/巨噬细胞浸润[5]。NF-κB是一种重要的核转录因子，通常情况下，与其细胞内抑制物IκB结合，以非活性形式存在于胞浆中，当被激活后，NF-B/ IκB复合物解离，NF-κB进入细胞核，在核内与多种基因启动子特异性序列结合，调节这些基因的转录活性，其中包括MCP-1、VCAM-1、ICAM-1等[6]。体外实验已发现高糖能通过PKC-NF-B途径引起系膜细胞活化，并分泌粘附分子，导致单核/巨噬细胞浸润[7，8]。笔者研究发现ED1表达减少的各组NF-κB表达亦轻，中药各组对NF-κB的积聚有着明显的抑制作用，且优于西药组。从而可见中药抗肾纤维化的潜力是值得深入挖掘的。

【参考文献】
  　1 Yang J,Liu Y.Delayed administration of hepate growth factor reduces renal fibrosis in obstructive nephropathy.Am　J　Physiol　Renal　Physiol，2003，284：349-357.

　　2 孙世竹，孙伟.益肾活血清利方对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用.中国中医药信息杂志，2005，12:30-32.

　　3 Becker G J，Hewitson T D.The role of tubulointerstitial in jury in chronic renal failure.Curr Opin Nephrol Hypertens，2000，9(2)：133-138.

　　4 Eddy A.Role of cellular in filtrates in response to proteinuria.Am J Kidney Dis，2001，37(Suppl2)：25-29.

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　　6 Klahr S，Morrissey J.Angiotensin II and geng expression in the kidney.Am J Kidney Dis，1998，31：171-176.

　　7 Kunnar A，Harkins K S，Hannan M A，et al.Activation of PKC-beta(I) in glomerual mesangial cells is associated with specific NF-kappaB submit translocation.Am J physiol renal physiol，2001，281：613-619.

　　8 Park C W，Kim J H，Lee J H，et al.High glucose-induced intercellar adhesion molecule-1(ICAM-1) expression through an osmotic effect in rat mesangial cells is PKC-NF-kappaB-dependent.Diabetologia，2000，43:1544-1553.