浅议杜仲降压片的质量标准

    2.3   黄芩苷的含量测定 [5]
    2.3.1   色谱分析条件   用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.2)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长为315 nm。理论塔板数按黄芩苷峰计算应不低于2 000。
    2.3.2   供试品溶液的制备与测定   取本品10片,去包衣,研碎,混匀,取约0.25 g,精密称定,置于50 mL具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇30 mL,密闭,超声处理30 min,摇匀,滤过,滤液置50 mL容量瓶中,药渣及滤器用70%乙醇适量洗涤,洗液并入同一容量瓶中,加70%乙醇稀释至刻度,摇匀,滤过,即得。HPLC测定结果见图3。
    2.3.3   对照品溶液的制备与测定   精密称取减压干燥4 h的黄芩苷对照品10 mg,置100 mL容量瓶中,加甲醇使溶解,并稀释至刻度,摇匀,即得(每毫升含黄芩苷0.1 mg)。HPLC测定结果见图4。
    2.3.4   阴性对照溶液制备与测定   按处方比例及制法制备缺黄芩的阴性对照品,按供试品溶液的制备方法同法制成阴性对照溶液。经进样检测阴性对照图谱中在与黄芩苷峰相同保留时间处未见干扰。结果见图5。
    2.3.5   标准曲线的制备   精密称取黄芩苷对照品,制成浓度为0.1 mg/mL的样品,分别进样2.5 μL、5.0 μL、10 μL、15 μL、20 μL测定峰面积,以峰面积积分值为纵坐标,黄芩苷进样量为横坐标绘制标准曲线,得回归方程Y=185 755X+23 136,r=0.999 9。表明黄芩苷在0.25 μg~2 μg之间呈良好的线性关系。
    2.3.6   精密度测定试验   取同一对照品溶液10 L,注入高效液相色谱仪,重复进样5次,测定黄芩苷峰面积,并计算相对标准偏差RSD为1.23%。
    2.3.7   稳定性试验   取同一供试品溶液,每隔2 h进样一次,共进样5次,按上述色谱条件测定黄芩苷峰面积,并计算黄芩苷峰面积积分值的相对标准偏差RSD为0.8%(n=5),表明供试品溶液在8 h内基本稳定。
    2.3.8   重现性实验   取同一批号(批号:060516)供试品,按供试品溶液制备方法制备5份供试液,分别测定黄芩苷峰面积,并计算黄芩苷含量和相对标准偏差。结果黄芩苷平均含量为5.78 mg/片,RSD为1.88%。
    2.3.9   加样回收率试验   取同一批号已知含量供试品(批号:060516;黄芩苷含量5.78 mg/片)20片,去包衣,研碎,混匀,取0.125 g,精密称定,共取5份,均加入黄芩苷对照品2.4 mg,按照供试品溶液制备方法制备供试液,进样量10 μL,测定黄芩苷峰面积,计算黄芩苷含量,并计算加样回收率,结果见表1。
    2.3.10   样品含量测定   分别吸取对照品溶液及供试品溶液各10 μL注入色谱仪,测得峰面积,以外标法计算黄芩苷含量。结果见表2。
    3   讨   论
    杜仲降压片的君药为杜仲,主含木脂素、环烯醚萜类及杜仲胶等成分,降压成分为松脂醇-二葡萄糖苷,但中国药品生物制品检定所未能提供相应对照品,故无法进行定量测定。黄芩为方中臣药,采用HPLC法测定制剂中黄芩苷含量,方法简单,重复性好,可以作为含量测定指标。
    【参考文献】
    [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版社,2005.
    [2]王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究[M].北京:中国医药科技出版社,1994:209-211.
    [3]陈黄保.七星茶中钩藤及防风的薄层色谱鉴别[J].广东药学,1994(4):21.
    [4]张榕,张春兰,方平飞,等.天麻钩藤颗粒的薄层色谱研究[J].华西药学杂志,2001,16(5):384-386.