金纳多对RCS鼠视网膜色素变性神经元保护作用
EGb761俗称银杏黄酮，主要含黄酮甙、萜内酯、白果内酯。自从被发现以来临床上广泛用于治疗脑部、外周等血液循环障碍。然而近年来许多研究表明,EGb761在缺血、低氧以及非自然原因凋亡所致损伤的保护作用中发挥着重要作用。有研究证实,EGb761对羟自由基诱导的大鼠脑神经细胞的 凋亡有抑制作用［4］。BEHARCOHEN等［5］的实验证实了NO参与了亚硝酸盐细胞毒性对培养的牛视网膜色素上皮细胞的作用，EGb761作为一种自由基清除剂可保护视网膜色素上皮细胞免受亚硝酸盐细胞毒性的损伤。EGb761还可以延缓白内障动物模型中眼球混浊的进程，可能有抗白内障的有益作用。FIES等［6］发现EGb761对老年黄斑变性导致的视力受损有治疗作用。这些均为EGb761对遗传性视网膜色素变性可能的治疗作用提供了依据。
自从首次报道RCS大鼠以来，人们对这一动物模型视网膜色素变性导致感光细胞凋亡的机制进行了大量研究。刘斌等［7］报道，RCS大鼠出生后25 d时，视网膜PRC内节处偶见有P53阳性染色，30 d时PRC胞质内有明显的阳性染色颗粒，主要位于内节，外节处为阴性，少许PRC细胞核呈阳性染色。RCS大鼠出生后30 d P53蛋白呈强阳性，提示PRC的凋亡可能为P53依赖性。迟焕芳等［8］研究显示,RCS大鼠视网膜变性过程中bcl2原癌基因可能不参与感光细胞的保护机制。目前对视网膜色素变性的治疗方法主要有基因治疗、感光细胞移植、药物干预。前两种方法因目前尚难解决的一些技术问题使其应用受到很大限制，而药物干预则通过影响视网膜色素变性形成过程中一些代谢变化而显示了良好的应用前景。本实验中我们观察到,给药组大鼠在生后20、25 d外核层感光细胞的数目比对照组多（P<0.05），提示EGb761在RCS大鼠感光细胞变性的早期对感光细胞有保护作用。但研究结果还表明，RCS大鼠出生25 d以后，给药组和对照组视网膜感光细胞存留数目的差别无显著性，这可能是由于RCS大鼠生后25 d感光细胞发生凋亡，35 d是感光细胞凋亡的高峰期。TUNEL检测表明，给药组大鼠视网膜在25 d时凋亡的细胞数比对照组减少（P<0.05），余时间段两者差异无显著意义。本实验结果提示，EGb761对感光细胞早期凋亡有抑制作用。
Caspase即半胱氨酸天冬氨酸酶，通常以无活性的蛋白酶原形式在细胞内合成和分泌。在放射线、氧化损伤、缺血低氧等诱导凋亡信号的刺激下，酶原形成四聚体而活化，形成Caspase活化级联反应。Caspase一经激活裂解其作用底物，细胞凋亡便不可逆地进入实施阶段，并以细胞解体、凋亡小体形成而告终。Caspases2检测显示,生后25～40 d，给药组和对照组大鼠在节细胞层和INL观察到Caspase2阳性染色。给药组在20、25 d时INL的Caspase2阳性细胞数少于对照组（P<0.05）。给药组和对照组INL Caspase2阳性细胞数均在35 d达到高峰，其趋势与TUNEL检测相一致。结果提示，EGb761对凋亡抑制作用可能与抑制Caspase2蛋白的表达有关。
视网膜色素变性是一种发病年龄早、病程进展慢、对视力影响大的遗传性致盲眼病。多种突变基因干扰了感光细胞内光电转化反应和能量代谢，并通过不同途径，激活视网膜色素上皮细胞及感光细胞内程序化死亡过程。但迄今为止，视网膜色素变性一直没有有效的药物治疗。本实验在RCS大鼠不同鼠龄段注射EGb761，通过TUNEL及凋亡相关因子检测，结果显示EGb761能抑制感光细胞早期神经元的凋亡。EGb761对神经元具有保护作用，临床应用较为安全，因此，将来或许可以把EGb761作为视网膜色素变性的治疗药物之一。
【参考文献】
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［6］ FIES P, DIENEL A. Ginkgo extract in impaired vision——treatment with special extract EGb761 of impaired vision due to dry senile macular degeneration ［J］. Wien Med Wochenschr, 2002,152(15/16):423426.
［7］ 刘斌,朱秀安. 遗传性视网膜变性感光细胞凋亡与P53蛋白表达［J］. 北京医科大学学报, 1998,30(2):110112.
［8］ 迟焕芳,乔淑红,曹文强. RCS大鼠感光细胞凋亡与Bcl2蛋白表达［J］. 青岛大学医学院学报, 2003,39:123126.