高致病性禽流感免疫与采样技术

　　2采样技术
　　2.1全血样品的采样
　　2.1.1器具。保温箱或保温瓶、酒精棉、碘酒棉、2～5 mL注射器及针头。1.5 mL塑料离心管、易封口样品袋、塑料包装袋等。塑料盒(1.5 mL小塑料离心管专用)封条,冰袋。不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单、记录本等;口罩、一次性手套、乳胶手套、防护服、防护帽、胶靴等。
　　2.1.2做好个人防护。必须戴口罩、手套,穿工作服和胶靴。
　　2.1.3采样操作规范。①饲养场内同日龄饲养在一起的家禽为一个群体,农户散养家禽以自然村为一个群体。②采样时间和数量。需检测的群体应在疫苗免疫后3～4周采样,每个群体应随机抽样30只家禽。散养禽应采自5个以上农户,不足30只的应全部采样检测。③翅静脉采血,每只家禽采血样1.5 mL,盛于1.5 mL离心管中,自然放置。④气温低时,在保温箱中放入热水袋,再将盛血样的离心管放入,以利于血清析出[3]。⑤析出血清后,将血清移到另外的塑料离心管中,封口、贴好标签。不同禽只的血样不能混合。
　　2.2棉拭子样品的采样
　　2.2.1器具。棉拭子、保温箱或保温瓶、1.5 mL塑料离心管、剪刀、易封口样品袋、塑料包装袋、封条、冰袋。加有抗生素的pH值7.4的渗磷酸盐缓冲液(PBS)。记录和防护材料。
　　2.2.2采样操作规范。①每只采集泄殖腔拭子和喉气管拭子各1个,将样品端剪下分别置于含有抗生素PBS的(加1.0～1.3 mL PBS)小塑料离心管中,封口、贴好标签。②泄殖腔拭子采集方法。将棉拭子插入泄殖腔约1.5～2.0 cm,旋转后沾上粪便。③粪便样品。小型珍禽采集泄殖腔拭子容易造成伤害,可只采集新鲜粪便样品(每个样品1～2 g),置于内含有抗生素PBS的西林瓶中,封口、贴好标签。④喉气管拭子采集方法。将棉拭子插入口腔至咽的后部直达喉气管,轻轻擦拭并慢慢旋转,沾上气管分泌物。喉气管拭子保存在含抗生素的PBS中。⑤填写采样单。要求字迹工整,书写规范,栏目齐全。⑥采样单应用钢笔或签字笔逐项填写(一式3份),样品标签、封条、保温容器外封条应用钢笔或签字笔填写,小塑料离心管上可用记号笔作标记。应将采样单装在塑料包装袋中,随样品一起送到实验室。
　　2.3样品的保存和运输
　　样品应置于保温容器中运输,保温容器应密封,防止渗漏[4]。一般使用保温箱或保温瓶,保温容器外贴封条,封条有贴封人(单位)签字或盖章,并注明贴封日期。棉拭子样品应作暂时的冷藏或冷冻处理,放于保温容器中,立即运送到实验室。
　　3参考文献
　　[1] 甘孟侯.禽流感[M].2版.北京:中国农业大学出版社,2002.
　　[2] 殷震,刘景华.动物病毒学[M].2版.北京:科学出版社,1997.
　　[3] 王秀荣.高致病性禽流感防治技术问答[J].畜牧兽医科技信息,2010(3):107-108.
　　[4] 秦发才,陈学斌,鲍兴智.如何搞好农村散养鸡高致病性禽流感免疫[J].畜牧兽医科技信息,2010(1):68.