SENV DNA病毒与输血因素的相关研究

【关键词】  SENV病毒;DNA;输血

　　1999年底意大利学者Primi等从一名感染艾滋病病毒（HIV）的毒瘾者血清中分离到一种新近发现无外膜单链脱氧核糖核酸病毒，以病人姓名的第一个字母命名为SEN病毒（SENV）。SENV基因组为单链环状属环状病毒科，基因组全长约3.9kb，与其它肝炎病毒比较其碱基序列同源性比较丰富，至少有A-H8种亚型成员，分别命名为SENV-A-H，各株间核苷酸序列差异可高达30%，与TTV相似，可能来源于同一祖先。目前研究较多的是SENV-D和SENV-H，它们与输血后非甲-戊型肝炎关系较为密切，通过对397例肝病患者的血清标本进行SENV DNA与HAV-HGV标志物、肝功能检测，研究SENA感染与输血的关系，报道如下。
    
　　1 材料与方法
    
　　1.1 材料

　　血清来源:本院住院患者。HAV、HBV、HCV标志物检测试剂盒由厦门新创有限公司提供。HDV、HEV、HGV、TTV标志物检测试剂盒由302提供。10×Taq聚合酶缓冲液、Taq聚合酶、dNTps购自美国Promega公司。病毒核酸提取试剂盒购自美国Biocronics公司。SENV DNA引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。仪器:美国BIO-RAD生产的荧光PCR扩增仪。
   
　　1.2 方法

　　HAV-HGV标志物检测:ELISA方法，参照说明书。SENV DNA检测:样品DNA提取:采用PEG沉淀提取法，取25ul血清标本与25ulPEG沉淀剂充分混合，13000r.min离心10min，弃上清，沉淀物中加入25ul裂解液打均，煮沸10min，13000r.min，离心10min后，取上清作为PCR扩增模板液。PCR扩增:选用美国BIO-RAD生产的荧光PCR扩增仪icycler。反应系统包括反应液（内含buffer缓冲液、dNTPs、荧光标记探针）39.6ul、Taq酶0.4ul，加入10ul模板提取液，总体积50ul。反应条件为:94℃30s、52℃30s、72℃30s共40个循环，荧光退火阶段52℃采集。 

　　2 结果
    
　　2.1 397例肝病患者的血清中HAV-HGV标志物、TTV检测结果 均为阴性。

    2.2 397例肝病患者血清中SENV DNA与ALT检测结果

　　见表1。表1 SENV DNA与ALT检测结果（略）
    
　　2.3 输血与非输血肝病患者中SENV感染情况与ALT的变化

　　见表2。表2 97例SENV DNA阳性与输血的关系（略）
  
　　3 讨论
    
　　3.1 本文对397例非甲-非庚型肝炎患者血清检测SENV DNA，检出率为24.4%（97.397），提示SENV可能是一种潜在的非甲-非庚型肝炎中主要的致病病毒。286例ALT升高（53-819U.L）的非甲-非庚型肝炎患者血清检测SENV DNA阳性率32.2%（92.286），在111例ALT正常（〈40U.L）血清中SENA DNA阳性率4.5%（5.111），表明ALT升高幅度与病毒水平有一定的相关性，提示SENV在急性肝损伤期易检出［1］。
   
　　3.2 在92例ALT升高SENV DNA阳性血清中输出者90例（97.8%），非输血者2例（2.2%），表明输血患者SENV感染率明显高于未输血者。提示SENV可能是一种经血传播的非甲-非庚型肝炎病毒，并能使肝细胞受到损害的新的病原体［2］。

    3.3 92例ALT升高SENA DNA阳性患者中，未输血者2例（2.2%），提示SENV经血传播，在不同人群中感染率不同，辅血中感染率较高，而且与辅血量有关。但少数未输血者也有感染，提示可能有院内感染或潜伏激活［2］ ，也可能有输血外途径传播。

    综上，SENV与HCV等常见经血传播病毒有相似的传播途径。因此对献血人群应检测SENV DNA，防止新的经血传播的传染病发生是十分有必要的。

【】
  　　［1］Bowden S，New hepetitis vinises:Contenders and pretenders［J］.JGastroenterol Hepatol，2001，16（2）:124.

［2］张翠萍，孙庆国，高俊芬，等.荧光聚合酶链反应检测SENV DNA的研究与探讨［J］.实验诊断学，2004，6（8）:668.