基质金属蛋白酶－3活性及C－erbB－2在乳腺癌中的表达意义

                        作者：赵新，罗荣，朱兴仁，陈德荣，张晓云

【摘要】  目的 探讨乳腺癌中基质金属蛋白酶－3（MMP-3）的活性和C－erbB－2表达的关系。方法 应用S－P法检测209例浸润性乳腺癌组织中MMP－3及C－erbB－2表达的情况。结果 MMP－3在浸润性乳腺癌中的表达与C－erbB－2表达呈正相关性（P<0.05）。结论 MMP－3与乳腺癌中C－erbB－2表达呈正相关。

【关键词】  乳腺癌；MMP－3；C－erbB－2；免疫组化

    【Abstract】  Objective  To study the clinical significance and correlation of matrix metalloproteinase-3 （MMP-3） and c- erbB-2 in breast cancer.Methods  The S-P immunohistochemical staining technique was used to detect the expression of MMP-3 and c-erbB-2 in 209 cases with breast cancer.Results  The relationship between MMP-3 and c-erbB-2 was positive correlation （P<0.05）. Conclusion  The expression of MMP-3 was positively with the expression of c-erbB-2 in breast cancer.

    【Key words】  breast cancer；MMP-3；c-erbB-2；immunohistochemistry

    诸多研究表明，人类许多肿瘤的细胞均可产生多种蛋白酶，在肿瘤细胞侵袭与转移的过程中发挥作用，其中以基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）的作用尤为重要，同时宿主细胞和肿瘤细胞均可产生基质金属蛋白酶抑制剂（tissue inhibitors of MMPs,TiMPs），抑制MMPs的活性［1］。C－erbB－2基因所编码的蛋白是分子量185Kda的穿膜蛋白，是细胞表面生长因子受体大家族中的成员，可以抑制酪氨酸激酶的活性，该基因的过度表达和扩增可见于多种肿瘤，与肿瘤的分化程度和分级有密切关系。我们应用免疫组织化学技术检测浸润性乳腺癌组织中的MMP－3及C－erbB－2表达的相关性，探讨MMP－3、C－erbB－2与乳腺癌分化程度、淋巴结转移等生物学行为的关系。

　　1  资料与方法

    1.1  一般资料  收集张掖市人民1997～2006年间手术切除，术前均未经过化疗并经病理证实的乳腺癌原发灶209例石蜡标本，均为女性，年龄27～68岁，中位年龄47.5岁。肿块大小0.5～9.5cm，按分化程度：高分化浸润性导管癌13例，中分化浸润性导管癌174例，低分化浸润性导管癌22例，同侧腋下淋巴结转移情况：有淋巴结转移者154例，无淋巴结转移者55例。

    1.2  方法  S－P法检测试剂盒，即用型鼠抗人单克隆抗体MMP－3、C－erbB－2均购自福州迈新生物技术开发有限公司。以PBS代替一抗作阴性对照，已知阳性的乳腺癌切片做阳性对照。

    1.3  免疫组化结果判断  高倍镜下（40×10）取10个不同视野，每个视野计数100个细胞，MMP－3阳性标准为细胞胞浆出现棕黄色颗粒，C－erbB－2阳性标准为细胞膜出现棕黄色颗粒，染色强度高于背景非特异性染色为准。按阳性细胞所占百分比进行分析：（－）阳性细胞百分率25％以下；（＋）阳性细胞百分率25％～50％；（＋＋）阳性细胞百分率50％～75％；（＋＋＋）阳性细胞百分率75％以上。

    1.4  统计学处理  SPSS10.5统计软件包进行分析，所得计数资料用χ2检验比较组间的差异。

　　2  结果

    2.1  MMP－3蛋白的表达  MMP－3在浸润性乳腺癌中的表达与患者年龄、肿瘤部位、浸润深度无明显关系（P>0.05）。在有淋巴结转移者癌组织中的表达高于无淋巴结转移者（P＝0.025），且在癌组织高、中、低不同组织分化程度间差异有显著性（P<0.05），见表1。

    2.2  C－erbB－2的表达  C－erbB－2在浸润性乳腺癌中的表达与患者年龄、肿瘤部位、浸润深度无明显关系（P>0.05）。在有淋巴结转移者癌组织中的表达高于无淋巴结转移者（P<0.05），且在癌组织高、中、低不同组织分化程度间差异有显著性（P<0.05），见表2。表1  MMP－3在乳腺癌中的表达与临床因素的关系表2  C－erbB－2在乳腺癌中的表达与临床因素的关系

    2.3  MMP－3蛋白表达与C－erbB－2表达的相关性分析  使用SPSS10.5软件，通过对MMP－3与C－erbB－2表达评分的分析发现，MMP－3与C－erbB－2表达之间呈明显正相关关系，见表3。表3  MMP－3蛋白表达与C－erbB－2表达的相关性分析

    3  讨论

    近年来研究人员对肿瘤细胞浸润、转移的生物学机制进行了大量研究，逐渐意识到肿瘤细胞发生浸润、转移的一个关键是必须具备降解细胞外基质（ECM）的能力。因为ECM是肿瘤细胞移动所遇到的屏障。

    MMP－3属MMP家族中的基质水解酶类，是细胞外基质降解过程中必不可少的酶，几乎能降解细胞外基质的所有成分，亦称溶基质素，其主要功能为降解粘蛋白、纤维连接蛋白和层粘连蛋白，同时MMP－3可以将基质分子核心蛋白聚糖剪切，然后释放具有生物学活性的转化生长因子－β（TGF－β）［2］。因为TGF－β不仅调控细胞的增值，且对血管生成也有作用。我们经过研究发现MMP－3在乳腺癌中的表达在有淋巴结转移者癌组织中的表达明显高于无淋巴结转移者，两者间差异有显著性（P＝0.025）；在不同组织分化程度间差异有显著性（P<0.05），在低分化癌组织中的表达阳性率明显高于高分化癌组织中的表达阳性率。该结果说明MMP－3与乳腺癌的发生、关系密切，而且在乳腺癌的浸润、转移过程中起重要作用。

    C－erbB－2基因所编码蛋白是分子量185Kda的穿膜蛋白，是细胞表面生长因子大家族中的成员，可以抑制酪氨酸激酶活性，该基因的过度表达和扩增可见于多种肿瘤，与肿瘤的分化程度和分级有密切关系［3］。通过我们的研究发现C－erbB－2在乳腺癌中的表达在有淋巴结转移者癌组织中的表达高于无淋巴结转移者，两者间差异具有显著性（P<0.05），在低分化癌组织中的表达阳性率高于高分化癌组织，差异有显著性（P<0.05）。MMP－3和C－erbB－2在乳腺癌中的表达呈正相关性。

    乳腺癌的浸润和转移是个复杂的多步骤、多因素的病理过程，MMP－3在ECM降解中起了重要作用，测定乳腺癌组织中的MMP－3及C－erbB－2表达的情况，对预测乳腺癌的浸润、转移，判断复发危险等方面具有重要意义，有望成为判断乳腺癌预后情况的主要生物学标志物。

【】
  1 Steeg Ps,Bevilaequa G,Kopper L,et al.J Nail Cancer Inst,1988,80（3）:200-201.

2 王爱明，杨跃伟.基质金属蛋白酶及其抑制因子在肿瘤浸润、转移中的作用.国外医学·临床生物化学与检验学分册，1998，19，258.

3 杨建林，林若柏.基质金属蛋白酶及其抑制剂与食管癌浸润转移的研究进展.肿瘤防治杂志，2003，10，664.