过敏性紫癜患儿血清ＩＬ－８、ＩＬ－１２及ＴＮＦ－α表达的意义

　　【摘要】 目的探讨血清白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-12(IL-12)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在过敏性紫癜(HSP)患儿中表达及其临床意义。方法 对本研究采用ELISA方法检测了48例过敏性紫癜患儿(其中22例合并肾脏损害)以及30例正常健康儿童的血清IL-8、IL-12及TNF-α水平，分别比较急性期和缓解期以及有无合并肾损害的过敏性紫癜患儿的细胞因子水平；分析IL-8、IL-12与TNF-α是否存在相关关系。结果 HSP患儿血清IL-8、IL-12与TNF-α水平高于健康对照组(P<0．01)；无肾损害HSP与紫癜性肾炎(HSPN)组血清IL-8、IL-12水平均无统计学差异；HSPN组肿瘤坏死因子-α水平高于无肾损害HSP组； HSP血清TNF-α水平与IL-8正相关(r=0．524 P<0．01)。HSP患儿血清TNF-α水平与IL-12正相关(r=0．670，P<0．01)。结论 细胞因子IL-8、IL-12及TNF-α可能参与HSP／HSPN发病过程。?
　　【关键词】过敏性紫癜；白细胞介素-8；白细胞介素-12；肿瘤坏死因子-α??
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　　【Abstract】 Objective To investigate the of serum levels of interleukin 8(IL-8)，interleukin 12(IL-12) and tumor necrosis factor-α(TNF-α)，and probe their clinical significance in children with Henoch-Schonlein purpura(HSP)／Henoch-Sehonlein purpura nephritis(HSPN).MethodsTo examine the serum levels of IL-8、IL-12 and TNF-αof children with HSP／HSPN by ELISA，and analyze the changes and the correlation between the aforementioned cytokines in children with HSP／HSPN. ResultsSerum levels of IL-8，IL-12 and TNF-αof children with HSP were higher than those of control group(P< 0．01). No significant difference was found between non-renal involvement HSP and HSPN group on serum levels of IL-8 and IL-12.But the serum level of TNF-αof HSPN was higher than that of non-renal involvement HSP. The serum level of TNF-αwas was positively correlated to the serum levels of IL-8，IL-12 of patients with HSP(r=0．72, P< 0．01；r=0．78, P< 0．01)．Conclusion The cytokines of IL-8 and IL-12 may play role in the pathogeny of HSP，and the TNF-α cause resulting in the HSPN.?
　　【Key words】Henoch-schonlein purpura ； Interleukin 8; Interleukin 12; Tumor necrosis factor-α?
　　
　　过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura，HSP)是儿童时期最常见的一种血管性疾病，发病率高，且易反复发作，常继发肾脏损害即过敏性紫癜性肾炎（henoch-schonlein purpura nephritis，HSPN)，严重影响了患儿的身心健康，并给社会和家庭带来严重的和精神上的危害。其病因、发病机制尚未完全阐明。本文通过对HSP患儿白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-12(IL-12)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的检测旨在探讨它们在HSP和HSPN发病机制中的作用及其相互关系，期望在HSP的方面提供一些新的理论依据。?
　　1 资料与方法?
　　1．1 一般资料 病例组(HSP组)48例为2005年12月至2007年12月在本院儿科住院初次确诊为HSP且未接受治疗患儿； HSP的诊断标准1990年美国风湿病协会公布的诊断标准。病例组根据患儿是否存在肾脏损害分为HSPN和无肾损害组。HSPN组22例为HSP患儿病程中出现肾脏损害表现，如血尿、蛋白尿、 肾功能异常等。男12例，女10例；年龄(7．5±2．3)岁。无肾损害组26例为HSP患儿无肾脏损害表现,其中男14例，女12例；年龄(7．9±2．9)岁。正常对照组：2006年6月至2007年12月来本院门诊体检的健康儿童，其中男18例，女12例，年龄(7．2±2．6)岁。各组儿童性别、年龄比较差异无显著性。?
　　1．2 检测方法?
　　1．2．1 标本采集 治疗前清晨空腹无菌采静脉血2 ml，3 000 转/min 离心10 min，分离收集血清，置于-20℃冰箱保存待测。?
　　1．2．2 血清IL-8、IL-12及TNF-α水平的检测采用双抗体夹心酶免疫吸附法(ELISA)，试剂盒购自深圳晶美有限公司，检测仪器为Hyperion MR III型酶标仪，在410 nm处读出吸光度(A)值，操作严格按说明书进行。?
　　1．3 统计学方法 采用SPSS 12．0软件进行处理。计量资料用x±s表示，比较用t检验，相关性采用直线相关分析，P< 0．05为有差异统计学意义。?
　　2 结果?
　　2．1 HSP与正常对照组儿童血清IL-8、IL-12及TNF-α水平比较 HSP患儿血清IL-8、IL-12与TNF-α水平高于正常对照组儿童(P< 0．05),见表1。?
　　2．2 HSPN与无肾损害组血清IL-8、IL-12及TNF-α水平比较 HSP患儿血清IL-8、IL-12与TNF-α水平高于正常对照组儿童(P< 0．01),见表1。?
　　
　　2．3 HSP患儿血清IL-8、IL-12与TNF-α相关分析 HSP患儿血清IL-8 与TNF-α水平呈正相关(r=0．72,P< 0．01)。HSP患儿血清IL-12 与TNF-α水平呈正相关(r=0．78, P< 0．01)。?
　　3 讨论?
　　HSP的确切病因及发病机制尚不明确，其发病率有逐年上升趋势^[1]。HSPN是儿科最常见继发性肾小球疾病，其严重程度直接影响HSP预后。近年来越来越多的研究表明，过敏性紫癜患儿存在细胞及体液免疫功能的紊乱，炎性介质分泌增加，多克隆B细胞活化及免疫球蛋白的分泌增加^[2]。?
　　IL-8是由单核细胞和淋巴细胞产生， 是可趋化和激活中性粒细胞蛋白质多肽。HSP患儿免疫复合物的形成可诱导单核-巨嗜细胞合成并分泌IL-8。在IL-8刺激下，中性粒细胞胞浆Ca 增多，出现脱颗粒和呼吸爆发反应，导致溶酶体酶释放和过氧化氢类物质产生。IL-8降低认为与免疫复合物在毛细血管壁沉积，促使IL-8到毛细血管等微循环中有关。HSP急性期特征性表现是外周血白细胞增多及血管周围多形核白细胞浸润，可激活内皮细胞释放大量IL-8，而IL-8增加有助于HSP患儿血管周围聚集和白细胞增多,因此IL-8又可以通过趋化中性粒细胞释放溶酶体酶，导致毛细血管破坏^[3]。本组血清IL-8水平明显高于健康对照组，提示IL-8参与HSP发病。IL-8是HSP发病机制中重要的炎性反应性细胞因子之一，对判断HSP患者病情及预后有显著意义。?
　　IL-12主要由B细胞产生，是诱导组织特异性自身免疫的关键细胞因子，对自身免疫疾病的发病及病理性T细胞产生极重要作用。有人认为，IL-12可能是抗原递呈细胞(APC)产生的最重要的细胞因子，亦参与抗体介导的自身免疫性疾病，IL-12的主要生理功能是促进ThO细胞向Th1细胞分化、的重要因子，它能抑制ThO细胞向Th2细胞的分化^[4]。在本文中发现，HSP患儿及有肾脏损害的患儿血清中IL-12均升高，与正常对照组比较有显著差异，说明IL-12参与HSP的发生与发展。?
　　TNF-α 是一种由单核一巨嗜细胞分泌的具有多种生物活性的多肽调节因子，既参与机体的免疫防御功能，又作为机体的炎性反应、损伤、甚至休克发病中的重要介质，亦可诱导血管内皮细胞表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)等黏附分子 ，黏附分子在炎性反应时对白细胞的移动起重要作用，促进白细胞黏附于血管内皮致血管内皮损伤。适量TNF-α参与机体正常免疫调节，是机体免疫防护重要介质，分泌过多则参与机体免疫病理损伤，导致某些疾病。HSP患者可通过I、Ⅲ型变态反应，损伤毛细血管内皮细胞，使TNF-α分泌增加，提示TNF-α参与HSP的发生、发展。当TNF- 与其受体结合时可引起细胞溶解破坏。同时TNF-α亦能引起血管内皮细胞结构改变，并抑制内皮细胞生长，高水平TNF-α还可使血管内皮细胞凋亡增加，从而引起肾小球血管壁损伤^[5]。本文HSPN患儿血清TNF-α明显高于健康对照及无肾损害HSP组，提示TNF-α水平增高与HSPN发病有密切关系。?
　　总之，HSP的发病机制相当复杂，但免疫系统的异常是主要原因，其中存在多种免疫细胞活化及众多细胞因子参与，IL-8、IL-12与TNF-α作为HSP重要炎性反应性因子，参与HSP／HSPN病理生理过程。细胞因子测定为研究HSP／HSPN发病机制提供免疫学依据，而且可为使用免疫调节剂提供依据，还可作为预测HSP／HSPN预后的指标。?
　　
　　参考
　　［1］ Gardner-Medwin JM ，Dolezalova P，Cummins C，et al.Incidence of Henoch-Schonlein purpura，Kawasaki disease，and rare vasculitides inchildren of different ethnic origins.Lancet,2002,360：1197-1205.?
　　［2］ 陈谱，何韶衡，陈穗.过敏性紫癜患儿血浆白细胞介素分泌谱及意义.中华儿科杂志，2005，43(4)：312-313.?
　　［3］ Yang YH，Lai HJ，Huang CM，et al.Sera from children with active Henoch-Schenlein purpura can enhance the production of interleukin -8 by human umbilical venous endothelial cells.Ann Rheum Dis，2004，63(11)：1511-1513.?
　　［4］ 曾巧慧，梅志勇，钟凤仪，等.白介素12、白介素4及干扰素在过敏性紫癜儿童中的表达及意义.小儿血液，2006，10(6)：247-248.?
　　［5］ Ha TS.The role of tumor necrosis factor-alpha in Henoch-Schonlein purpura.PediatrNephrol，2005，20(2)：149-153.?