瘿气灵对Graves病细胞凋亡及免疫功能的影响
【摘要】 目的：观察瘿气灵对Graves病细胞凋亡的影响。方法：将80例Graves病人随机分为两组，每组40例。对照组给予他巴唑，治疗组给予瘿气灵治疗，分别于治疗前后检测两组患者细胞凋亡因子Bcl-2、sFas及甲状腺自身抗体TGAb、TPO-Ab的变化。结果：治疗组在临床疗效、免疫功能、细胞凋亡方面与对照组比较有显著性差异（P<0.05），表明治疗组疗效优于对照组。结论：瘿气灵能改善患者的免疫功能，使下降的细胞凋亡恢复正常，临床疗效优于他巴唑。
【关键词】 中医药 甲状腺功能亢进症 细胞凋亡 瘿气灵 他巴唑
1 材料与方法
1.1 临床资料
80例病例均为我院住院病人，随机分为两组，每组40例。对照组中男8例，女32例；年龄（35.72±11.30）岁；病程（12.62±8.32）个月；病情：轻度10例，中度13例，重度17例；职业：干部9例，工人20例，农民11例。治疗组中男9例，女31例；年龄（35.90±12.77）岁；病程（13.32±8.51）月；病情：轻度9例，中度14例，重度17例；职业：干部8例，工人19例，农民13例。两组患者在性别、年龄、病程、病情、职业等方面经统计学分析无显著性差异（P＞0.05），具有可比性。所有患者诊断均参照《中药新药临床研究指导原则》 ［1］进行。甲状腺肿大判定标准参照［2］进行，甲状腺肿大的程度分5度。Graves眼病判定标准参照文献 ［3］进行，Graves眼病分级，共分7级。
1.2 治疗方法
对照组给予他巴唑（广东华南药业有限公司，批号：060101～061201）10 mg/次，3次/ d，足量2月。治疗组予瘿气灵5片/次，3次/ d，共治疗3个月。症状控制后逐渐减量。
1.3 指标检测
1.3.1 甲状腺激素及免疫功能的检查 采用化学发光法检测，配套试剂盒由美国雅培制药有限公司生产，试剂盒批号TT3为44805Q101，TT4为46371Q100，FT3为44166Q100，FT4为46462Q100，TSH为46711Q100，TGAb（甲状腺球蛋白抗体）为41520HN00、TPO-Ab（甲状腺过氧化物酶抗体）为41519HN00。检测仪器为美国雅培制药有限公司生产的Axsym。
1.3.2 细胞凋亡的检测 采用ELISA双抗体夹心法检测血清sFas和Bcl-2值，按试剂盒说明书操作。sFas试剂盒由Diaclone公司生产（DA850.740.096），批内差异2.36%，批间差异3.98%。Bcl-2试剂盒由Bender Medsystems公司生产（BMS244/3），批内差异2.65%，批间差异3.84%。仪器为多功能酶标仪（瑞典TECAN公司），HZS-H超级恒温水浴振荡器（哈尔滨东联公司）。
1.4 统计方法
采用SPSS13.0统计分析软件进行分析。
2 结 果
2.1 两组患者治疗后疗效比较
所有患者疗效评定均参照《中药新药临床研究指导原则》 ［1］进行。两组患者治疗后疗效比较，结果见表1。
由表1可见，对照组治疗后总有效率为85.0％，治疗组总有效率为100％，两组患者治疗后疗效比较有显著性差异（P<0.05），提示治疗组治疗后疗效优于对照组。
2.2 两组患者前后TGAb、TPO-Ab、sFas、Bcl-2比较
结果见表2。
由表2可知，两组患者治疗后TGAb、TPO-Ab、sFas、Bcl-2均下降，TPO-Ab、sFas、Bcl-2治疗后与治疗前比较，均有显著性差异（P<0.05或P<0.01），而对照组TGAb治疗前后无显著差异（P＞0.05），治疗组TGAb治疗前后有显著差异（P<0.01）。治疗后TGAb、TPO-Ab、sFas、Bcl-2组间比较，均有显著差异（P<0.05或P<0.01）。
3 讨 论
凋亡是发生于体内的一种经常性事件，它涉及到机体的进化、生长、发育及内环境的稳定。凋亡涉及许多分子，如细胞表面的Fas及FasL，调节凋亡的Bcl-2，Bax，caspase等。
Bcl-2是作用于细胞凋亡过程中一个抑制凋亡的Bcl-2基因的表达产物， Bcl-2的功能是通过阻断细胞凋亡而促进细胞存活。其抗凋亡的作用机制之一是维持线粒体功能的完整性；同时也可通过阻断凋亡信息传递系统的最后通路，干扰Fas系统诱导的凋亡等途径抑制细胞凋亡的发生。研究发现毒性弥漫性甲状腺肿（Graves病）患者血清中Bcl-2的含量在未经治疗的甲亢患者中增高，治疗后浓度下降 ［4］。Graves病中凋亡抑制因子Bcl-2的过度表达，引起甲状腺细胞及浸润的淋巴细胞的凋亡清除减少，从而参与该病的发病过程 ［5］。
可溶性Fas（sFas）是一种因Fas基因转录过程mRNA剪切方式改变，编码合成跨膜区不完整或缺失的可溶性Fas，它可与膜Fas竞争FasL而抑制凋亡。研究发现，在未经治疗的Graves病患者血清中sFas含量增高 ［4，6］。高水平的sFas能阻断Fas/FasL介导的甲状腺细胞及浸润的淋巴细胞的凋亡而使甲状腺增生、肿大 ［7］，而经用丙基硫氧嘧啶治疗至甲状腺功能恢复正常后其血中浓度下降，提示sFas可能参与Graves病的发病。sFas通过竞争Fas与FasL结合，使Fas/FasL系统介导的凋亡受到抑制，当细胞凋亡减少时，不能有效清除自身反应性T细胞，增加自身反应性淋巴细胞产生甲状腺刺激性抗体，从而促进甲状腺生长；另外sFas作为膜Fas的脱落部分，减低了细胞膜上Fas密度，也减少了Fas介导的凋亡，加重甲状腺局部内环境的紊乱，导致Graves病的发生。sFas与游离甲状腺素（FT3、FT4）及TPOAb、TGAb无明显相关，提示sFas的变化不能完全以水平来解释，同时对评价疾病的活动性也无意义 ［4］，提示Graves病患者sFas的改变并非缘自甲状腺激素的升高，而是与自身免疫活性有关。
研究结果表明，治疗后治疗组的sFas、Bcl-2比对照组减少更多，差异有显著性，治疗组优于对照组。说明瘿气灵较西药更能调节甲亢患者的细胞凋亡水平，使下降的细胞凋亡恢复正常，肿大的甲状腺变小，符合病情的变化过程。研究亦表明，瘿气灵治疗甲亢的临床疗效优于单用他巴唑组。Graves病是甲状腺自身免疫性疾病，TGAb、TPO-Ab是免疫过程中产生的甲状腺自身抗体，在自身免疫性疾病患者的血中可以测出，于治疗好转后，含量大都降低。本研究显示，经治疗后治疗组的TGAb、TPO-Ab比对照组降低更多，差异有显著性，治疗组优于对照组，说明瘿气灵能够下调血清TGA、TPO-Ab水平，改善Graves病病人的免疫状态。
总之，瘿气灵能改善患者的免疫功能，使下降的细胞凋亡恢复正常，作用较他巴唑明显，临床疗效亦优于他巴唑，但对甲状腺激素的影响与他巴唑无异。
【】
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