生长抑素受体和雌孕激素受体在子宫内膜癌的表达及临床意义

【关键词】  子宫内膜肿瘤；,生长抑素受体,生长抑素；,受体,雌激素；,孕激素；,免疫组织化学

　　摘要:  目的  研究生长抑素受体（SSTR）在子宫内膜癌中的表达及其意义；探讨SSTR表达与雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）表达的关系及意义。  方法  采用免疫组织化学染色方法（SP法）检测60例子宫内膜癌组织中SSTR各亚型及ER、PR的表达情况，分析SSTR各亚型的表达与ER、PR表达的关系。  结果  在60例子宫内膜癌组织中，SSTR各亚型（SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4及SSTR5）的阳性表达率分别为70%,15%,21.7%,23.3%及18.3%；ER、PR的阳性表达率分别为46.7%，70%。SSTR3、SSTR4在中高分化组表达阳性率明显高于低分化组（P<0.05）；SSTR各亚型表达与患者年龄、手术病理分期、组织分级及肌层浸润深度无显著相关（P>0.05）；SSTR2、SSTR4的表达与ER的表达显著相关（P<0.05），SSTR3、SSTR5的表达与PR表达显著相关（P<0.05）。  结论  在子宫内膜癌中存在着SSTR各亚型的表达，一些亚型的表达与ER或PR的表达相关，相应的生长抑素类似物（SSTA）可能为SSTR阳性表达的子宫内膜癌的诊治及预后判定提供新的靶点，对孕激素有效的子宫内膜癌，SSTA也可能具有作用。

　　关键词:  子宫内膜肿瘤； 生长抑素受体，生长抑素； 受体，雌激素； 孕激素； 免疫组织化学

　　生长抑素（somatostatin，SST）是一种环状肽类激素，大量研究证实，SST不仅对垂体瘤等神经内分泌瘤的生长有抑制作用，对普通实体瘤生长亦有抑制作用[12]。近年来，生长抑素受体（somatostatin receptor，SSTR）及生长抑素类似物（somatostatin analogue，SSTA）在恶性肿瘤中的应用价值日益受到重视。子宫内膜癌被认为是激素依赖性肿瘤，临床上应用雌孕激素受体（ER、PR）作为判断肿瘤预后及指导内分泌治疗的指标。笔者应用免疫组织化学方法（SP法）检测SSTR各亚型及ER、PR在子宫内膜癌的表达情况，探讨SSTR表达与ER、PR表达的关系及意义。

　　1  材料和方法

　　1.1  对象  选择福建医科大学附属第二妇产科2000年1月～2004年10月住院手术治疗的子宫内膜癌患者60例，有完整的临床病资料，术前均无放疗、化疗和激素治疗。年龄（53.2±10.9）岁（26～79岁），其中<50岁18例，≥50岁42例。组织学类型均为腺癌。按1988年国际妇产科联盟（FIGO）的手术病理分期标准，Ⅰ期31例，Ⅱ期20例，Ⅲ期9例。组织学分级G1 9例，G2 22例，G3 19例。浅肌层浸润36例，深肌层浸润24例。

　　1.2  方法  手术切除标本存档的石蜡组织块，重新制作4 μm厚连续切片。兔抗人SSTR1多克隆抗体（即用型）、兔抗人ER（SP1）、PR（SP2）单克隆抗体、SP免疫组织化学染色试剂盒、DAB显色剂等购自福州迈新生物技术开发公司。羊抗人SSTR2（A20）、SSTR3（W15）、SSTR4（C15）、SSTR5（C15）多克隆抗体（浓缩型）购自美国Santa Cruz Biotechnology公司，稀释度为1∶400。应用SP法检测上述所有标本SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4、SSTR5、ER及PR的表达情况。每次实验均设阳性、阴性对照，用已知阳性切片作阳性对照，用PBS代替一抗为阴性对照，抗原修复采用枸橼酸缓冲液高温高压抗原修复法。

　　1.3  结果评估  免疫组织化学染色阳性反应为棕黄色颗粒，SSTR主要定位于细胞质；ER、PR主要定位于细胞核。SSTR及ER、PR表达判断采用定量法：根据着色深度和阳性细胞数计分；每例随机计数5个高倍镜视野，确定其每个视野的阳性率，取平均数。以阳性细胞数计分：（1）<5%为0分，（2）5%～24%为1分，（3）25%～49%为2分，（4）50%～74%为3分，（5）>75%为4分。以阳性细胞表达的着色深度计分：基本不着色为0分，浅黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分。两者得分相乘，<1分的病例判定为表达阴性，其余病例判定为表达阳性。

　　1.4  统计学处理  采用SPSS 11.5软件包进行统计学处理，SSTR各亚型表达与临床病理指标及ER、PR表达的关系采用χ2检验和精确概率法。P<0.05为差别有统计学意义。

　　2  结果

　　2.1  SSTR各亚型及ER、PR在子宫内膜癌的表达  SSTR表达定位于子宫内膜癌细胞的细胞质，在癌旁正常的子宫内膜细胞或癌巢周围基质细胞未见SSTR表达。ER、PR表达定位于子宫内膜癌细胞的细胞核。在60例子宫内膜癌细胞中SSTR各亚型（SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4及SSTR5）的阳性表达率分别为42例（70%），9例（15%），13例（21.7%），14例（23.3%）及11例（18.3%）；ER、PR的阳性表达率分别为46.7%与70%（图1）。

　　SSTR：生长抑素受体，ER：雌激素受体， PR：孕激素受体.  A：SSTR1，B：SSTR2；C：SSTR3；D.SSTR4；E：SSTR5；F：ER；G：PR.

　　图1  SSTR各亚型及ER、PR在子宫内膜癌中的阳性表达（SP法  ×400）（略）

　　Fig 1  SSTR and ER，PR immunocytochemical staining in human endometrial carcinoma

　　2.2  SSTR各亚型表达与临床病理指标的关系  在60例子宫内膜癌中，SSTR3、SSTR4在中高分化组表达阳性率均为46.4%，明显高于低分化组（0，5.56%），差别有统计学意义（P<0.05）；SSTR各亚型表达与年龄、手术病理分期、组织分级及肌层浸润深度等无明显相关（P>0.05，表1）。

　　2.3  SSTR各亚型的表达与ER、PR表达的关系  在60例子宫内膜癌中，SSTR2及SSTR4的表达与ER的表达显著相关（P<0.05），而SSTR3及SSTR5的表达与PR的表达显著相关（P<0.05）（表2）。

　　表1  子宫内膜癌患者SSTR各亚型的表达与临床病理指标的关系（略）

　　Tab 1  Relationship between SSTR expression and clinicopathological in human endometrial carcinomas

　　表中数据为例数.  SSTR:生长抑素受体.  组织分级组间比较，☆：P<0.05.

　　表2  SSTR各亚型的表达与ER、PR表达之间的关系（略）

　　Tab 2  Relationship between SSTR expression and ER,PR expression

　　表中数据为例数.  SSTR：生长抑素受体； ER：雌激素受体， PR：孕激素受体.  与ER表达相关，☆：P<0.05，与PR表达相关，△：P<0.05.

　　3  讨论
   
　　SST不仅对机体所有的生理性内外分泌反应均起抑制作用，还可广泛地抑制细胞增殖活性。近年来，SST抗肿瘤细胞增殖效应及人工合成的SSTA的临床应用，受到越来越多学者的关注。SST及SSTA是通过与SSTR结合产生一系列生物效应的。目前已发现5种SSTR亚型，分别命各为SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4和SSTR5。研究证明，子宫内膜癌组织中均有SSTR表达[34]，这为SST及其类似物应用于子宫内膜癌的诊断和提供了理论基础。Schulz等采用SP对28例子宫内膜癌中的SSTR 5种亚型的表达进行检测，在28例子宫内膜癌中的表达率分别为32%，39%，43%，4%和4%[5]。SSTR各亚型的表达与患者的年龄、临床分期及组织学分级等无关。有人尝试采用SSTA治疗妇科肿瘤,取得了一定疗效。Mishima等研究发现SSTA能抑制子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长[4]，Chatzistamou等研究显示，应用SSTA后卵巢癌裸鼠移植瘤的体积显著减小[6]。
   
　　笔者研究显示，SSTR 5种亚型在子宫内膜癌中均存在表达，在60例子宫内膜癌中的表达率分别为70%，15%，21.7%，23.3%和18.3%。SSTR3、SSTR4表达在中高分化组明显高于低分化组，差别有统计学意义（P<0.05）。由于组织学分级是反映肿瘤生物学行为的最本质的特征，是重要的预后指标，笔者的研究结果显示，SSTR3、SSTR4的表达水平与子宫内膜癌的组织学分级相关，可作为判断预后的指标之一。
   
　　本研究同时显示，SSTR2及SSTR4的表达与ER的表达显著相关（P<0.05），SSTR3及SSTR5的表达与PR的表达显著相关（P<0.05）。SSTR2及SSTR4在ER阳性组的阳性表达率明显高于ER阴性组，SSTR3及SSTR5在PR阳性组的阳性表达率明显高于PR阴性组，说明SSTR通常在ER、PR阳性的子宫内膜癌中表达。这种相关性的机制尚不清楚，有待进一步研究。鉴于ER、PR是子宫内膜癌内分泌治疗对象选择及预后判断的重要指标，笔者研究显示，SSTR大部分亚型表达与ER、PR表达呈正相关，提示对孕激素有效的子宫内膜癌，SSTA也可能具有治疗作用。对同是激素依赖性肿瘤的原发性乳腺癌的研究显示，SSTR表达受到雌激素依赖性的调节[7],联合应用SSTA和三苯氧胺（TAM）治疗乳腺癌可增强抗肿瘤作用[8]。至于子宫内膜癌中雌、孕激素对SSTR的表达是否存在调节作用，以及对ER、PR阳性的子宫内膜癌采用SSTA与孕激素联合内分泌治疗的可行性，尚待进一步研究。

　　参考：

　　[1]  Kouroumalis E,Skoridilis P,Thermosk, et al. Treatment of hepatocelluar carcinoma with octreotide: a randomised controlled study[J]. Gut, 1998,42(3):442447.

　　[2]  Lamberts S W,Van derLelg A J,DeHerder W W, et al. Octreotide[J]. N Engl J Med, 1996,334(4):246254.

　　[3]  Denzler B,Deubi J C. Expression of somatostatin receptors in peritumoral veins of human tumors[J]. Cancer, 1999,85(1):188198.

　　[4]  Mishima M,Yano T,Jimbo H, et al. Inhibition of human endometrial cancer cell growth in vitro and in vivo by somatostatin anolog RC160[J]. Am J Obstet Gynecol, 1999,181(3):583590.

　　[5]  Schulz S,Schmitt J,Weise W, et al. Frequent expression of immunoreactive somatostatin receptors in cervical and endometrial cancer[J]. Gynecol Oncol, 2003,89(3):385390.

　　[6]  Chatzitamou I,Schally A V,Varga J L, et al. Antagonists of growth hormonereleasing hormone and somatostatin analog RC160 inhibit the growth of the OV1063 human epithelial ovarian cancer cell line xenografted into nude mice[J]. J Clin Endocrinol Metab, 2001,86(5):21442152.

　　[7]  Van DenBossche B,D’haeninck E. Oestrogenmediated regulation of somatostatin respression in human breast cancer cell lines assessed with 99mTcdepreotide[J]. Eur J Nucl Med Mol Imaging, 2004,31(7):10221030.

　　[8]  Ingle J N,Suman V J,Kardinal C G, et al. A randomized trial of tamoxifen alone or combined with octreotide in the treatment of women with metastatic breast carcinoma[J]. Cancer, 1999,85(6):12841292.