Survivin和热休克蛋白27在胰腺癌组织中的表达及关系

          作者：刘源 赵海鹰 田忠 乔麟 杨福全 余云 刘金钢

【摘要】目的：探讨Survivin和热休克蛋白27（HSP27）在胰腺癌组织中的表达及二者的相关性。方法：用免疫组织化学法检测59例胰腺癌及癌旁组织中Survivin与HSP27的表达，比较其阳性表达率及Survivin表达与HSP27表达的关系。结果：Survivin在胰腺癌中阳性表达率为74.6%，而在癌旁组织中未见表达（P＜0.01）；Survivin表达与胰腺癌的分化程度、临床分期及淋巴结转移无相关性；HSP27在胰腺癌中的表达率为66.1%，明显高于癌旁组织22.8%(P＜0.01)，并且与胰腺癌的分化程度相关，但与临床分期及淋巴结转移无关；胰腺癌组织中Survivin与HSP27的表达有相关性。结论：Survivin和HSP27在胰腺癌中过度表达，提示二者在胰腺癌的发生中起重要作用；Survivin和HSP27通过抗凋亡机制协同参与胰腺癌的发生。

    【关键词】胰腺肿瘤・Survivin蛋白质・热休克蛋白质类

      Expression and relationship of Survivin and HSP27 in pancreatic carcinoma

      【ABSTRACT】Objective:To study the expression and relationship of Survivin and HSP27 in pancreatic carcinoma.Methods:The expressions of Survivin and HSP27 were investigated by immunohistochemistry assay in 59 cases of pancreatic cancer and tumor surrounding tissue.Results:The expression rate of Survivin in pancreatic cancer was 74.6%.And Survivin didn’t experss in tumor surrounding tissue.There was no relationship between the expression of Survivin and the histological differentiation,clinical staging,and lymph node metastasis of pancreatic cancer.The expression rate of HSP 27 in pancreatic carcinoma (66.1%) was higher than that in

    tumor surrounding tissue(22.8%)(χ2=20.03）,(P＜0.01).HSP27 expression was correlated with the differentiation of pancreatic cancer,but had no relationship with the staging or lymph node metastasis.The expression of Survivin was correlated with the expression of HSP27 in pancreatic cancer.Conclusions:Survivin and HSP27 were upregulated in pancreatic carcinoma,which indicated that they may play an important role  in the genesis and development of pancreatic cancer.Survivin and HSP27 have synergistic role in participating in the pathogenesis of pancreatic cancer.

    【KEY WORDS】Pancreatic neoplasms ・Survivin protein・HeatShock proteins   

　 胰腺癌是一个复杂过程。研究证实，凋亡对正常细胞及肿瘤细胞的形态发生、内环境平衡的调节起重要作用，而凋亡的抑制与肿瘤的发生发展密切相关。Survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAP)家族的重要成员，在近乎所有的人类肿瘤组织中均有表达，而在正常组织中几乎不表达。热休克蛋白（heatshock protein,HSP）参与细胞凋亡［1］，特别是HSP27与肿瘤的关系较为密切。为此，我们研究Survivin和HSP27在胰腺癌组织中表达的意义及相关性，探讨胰腺癌诊断和基因的新思路。

    1  资料与方法

    1.1  临床资料  2002年8月~2004年7月收治的胰腺癌手术患者59例，均经病检查确诊。男34例，女25例，年龄42~72岁，平均58岁。肿瘤分化程度高：高、中分化39例，低分化20例。TNM分期：Ⅰ期15例，Ⅱ期19例，Ⅲ期16例，Ⅳ期9例。局部淋巴结转移20例。癌旁组织（正常对照），取自距肿瘤2cm外的胰腺组织。

    1.2  方法  取材后，立即用生理盐水冲洗至无血迹后，10%福尔马林固定，石蜡包埋，制作石蜡切片。免疫组织化学SP法检测Survivin和HSP27的表达。羊抗人Survivin单克隆抗体为美国Santa Cruz公司产品，鼠抗人HSP27单克隆抗体购自北京中山生物技术有限公司。操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。PBS代替一抗作为阴性对照。结果判定：以＞10%的癌细胞胞浆成棕黄色为阳性。

    1.3  统计学方法  采用χ2检验，应用SPSS12.0软件进行数据分析。

    2  结  果

     2.1  胰腺癌组织中Survivin的表达  59例胰腺癌组织中有44例（74.6%）阳性表达，而癌旁组织中未见表达（P＜0.01），见图1。Survivin的表达与胰腺癌的分化程度、临床分期及淋巴结转移无关（P＞0.05）。

    2.2  胰腺癌组织中HSP27的表达  59例胰腺癌组织中HSP27阳性表达39例（66.1%）（图2），癌旁组织中HSP27阳性表达17例（28.8%），差异有统计学意义（ χ2=20.03,P＜0.01）。高、中分化胰腺癌HSP27的阳性率为56.4%（22/39），低分化胰腺癌中HSP27阳性率为85.0%（17/20），二者差异有统计学意义（ χ2=4.82,P＜0.05）。HSP27表达与胰腺癌的临床分期及淋巴结转移无关（P＞0.05）。

    2.3  胰腺癌组织中Survivin和HSP27表达的关系  HSP27阳性组Survivin阳性表达率为84.6%（33/36），阴性组Survivin阳性表达率为55.0%(11/20)，二者差异有统计学意义（ χ2=6.12，P＜0.05）。

    3  讨  论

　Survivin是IAP家族中一个结构特殊的成员，n端只有一个BIR（baculoviral IAP repeat）结构域，C端有一个延伸的螺旋卷曲结构区域，没有锌指环结构。Survivin定位于染色体17q25，全长约16.5kb，编码由142个氨基酸组成的蛋白，参与调控调亡和细胞分裂。其抗调亡功能主要是通过BIR结构直接或间接抑制凋亡终末效应因子caspase3，7实现的，其调节细胞分裂功能是通过C端螺旋卷曲结构与分裂装置结合完成的。其调节细胞分裂功能表现在与纺锤体结合，参与中心体装配，调控纺锤体的延长、染色体分离和胞质分裂［3，4］。与其它IAP家族成员不同的是，Survivin在组织分布上具有明显的细胞选择性，通常只表达于胚胎和发育的胎儿组织，除胸腺外不见于其它正常终末分化的成人组织，而在大多数肿瘤组织内均可见Survivin表达［5，6］。我们的研究证实，在癌旁正常胰腺组织中有Survivin基因无表达，而在74.6%的胰腺癌组织中Survivin表达，表明Survivin基因在胰腺癌组织中表达上调，提示Survivin基因可能通过抑制细胞凋亡，对胰腺癌的发生起重要作用。Survivin基因在胰腺癌中高表达，有望成为胰腺癌基因的靶点［6］。Survivin基因的表达与胰腺癌分化程度、TNM分期和淋巴结转移均无明显相关性，推测Survivin表达上调出现在胰腺癌发生的早期阶段，提示用RTPCR检测Survivin mRNA对于恶性程度及病期早晚的预测无明显价值［7］。研究显示，检测Survivin mRNA或蛋白表达对于预测结肠癌、乳腺癌和神经母细胞瘤等恶性肿瘤的预后有一定价值［8，9］。有关Survivin与胰腺癌的预后有待于进一步研究。HSP是一组在进化上高度保守的蛋白质，可作为分子伴侣参与蛋白质折叠、亚基的组成、细胞内运输以及蛋白质降解等过程，调节并稳定靶蛋白的活性和功能。当细胞受到应激损伤时，HSP可防止蛋白质的变性并加速异常蛋白质的降解，维持细胞的正常代谢，提高细胞生存率。HSP27属于小分子HSP家族，由132~186个氨基酸组成，其表达可保护细胞抵抗各种刺激，如理化因素、细胞因子处理引起的细胞凋亡。近年来不少报道，HSP27在多种腺癌组织中高表达是预后的不良因素［10，11］。本研究发现，胰腺癌组织中HSP27的表达上调，提示其与胰腺癌的发生发展有关。在胰腺癌中，低分化组织HSP27的表达高于高、中分化组织，提示HSP表达是胰腺癌预后不良的因素之一。肿瘤发生最突出的表现是细胞的失控性增殖，这与凋亡调控失常有关。Survivin和HSP27抗凋亡的机制是：HSP27既可与细胞色素C结合，抑制凋亡体的形成，防止caspase9激活，阻断内源性凋亡途径，还可参与由TNF诱导凋亡的外源性凋亡途径；而Survivin则是直接抑制凋亡途径的终末效应因子caspase3和caspase7的活性，从而抑制细胞凋亡。本研究结果表明，胰腺癌组织Survivin和HSP27的表达存在相关性，提示二者通过抗凋亡机制对胰腺癌的发生发展有协同作用。

　参  考  文  献

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