一氧化氮在高胆固醇血症家兔Oddi括约肌中的含量变化

           作者：王小军，朱志立，李虎城，董家鸿 

【摘要】  　　目的探讨一氧化氮在高胆固醇血症家兔Oddi括约肌中的变化。方法将32只成年家兔随机分成正常对照组、高胆固醇血症4周组、6周组、10周组，每组8只，分别以高胆固醇饲料喂养，取其Oddi括约肌用硝酸还原酶法行一氧化氮含量检测。结果家兔喂养高胆固醇饲料后可形成高胆固醇血症，Oddi括约肌中一氧化氮的含量明显改变（P＜0.05）。结论高胆固醇血症家兔Oddi括约肌一氧化氮含量降低；高胆固醇血症通过影响NO的含量改变Oddi的舒张功能。

【关键词】  高胆固醇血症　Oddi括约肌　一氧化氮

　　Nitric oxide changes of sphincter of Oddi in rabbits with hypercholesteremia

    Abstract: Objective To investigate the changes of nitric oxide in sphincter of Oddi (SO) of hypercholesteremia rabbits.  Methods A total of 32 rabbits were randomized into 4 groups. In control group, the rabbits were fed with normal diet. In experimental groups, the animals were fed with normal diet + cholesterol for 4, 6,10weeks. The content of nitric oxide were examined in SO of all animals by nitrate reductase method.  Results  The rabbits fed with normal diet + cholesterol suffered hypercholesteremia; In the experimental group, the content of nitric oxide in SO was significantly lower (P﹤0.05). Conclusion Nitric oxide in SO is lower in hypercholesteremia animals. The hypercholesteremia may influence the relaxation function of SO because of NO.

    Keywords: hypercholesteremia; sphincter of Oddi; nitric oxide

    胆固醇升高是胆囊结石形成的基础，其对Oddi括约肌（sphincter of Oddi，SO）的作用报道多见于结石形成的因素探讨，而对于SO本身的影响报道较少，有研究显示一氧化氮（nitric oxide，NO）在SO的运动中有着重要的作用。本实验通过建立高胆固醇血症模型对Oddi括约肌中的一氧化氮含量进行检测，初步了解和探讨高胆固醇血症下NO的含量变化情况以及对SO功能的作用。

    1材料与方法

    1.1动物模型的建立

    家兔32只，雌雄不限，年龄3~4月，体重2~3 kg，均来自第三军医大学实验动物中心。随机分为4组：正常对照组和高胆固醇血症4周、6周、10周组，每组8只。高胆固醇血症模型的建立：对照组饲以标准饲料；实验组饲以掺有1.2%胆固醇（成都市科龙化工试剂厂，99.5%）的标准饲料，制作实验性高胆固醇血症模型。动物模型判定标准：兔血清总胆固醇＜3.0 mmol/L为正常，＞10 mmol/L为高胆固醇血症。实验开始前将血清总胆固醇＞3.0 mmol/L兔剔除［1］。

    1.2手术方法

    实验前禁食14~18 h，禁水4 h。速眠新(解放军农牧大学制药厂，0.2 ml/kg)肌注麻醉，备皮，术中速眠新（0.1 ml/kg）肌注维持麻醉。麻醉满意后，经腹中线开腹，切开十二指肠，暴露乳头。逆行插入一导管，沿导管取SO组织约10 mm长，进行修剪后迅速置入液氮中保存。手术结束后空气注射处死，迅速抽取心脏血，离心后取上清检测肝功能变化。

    1.3NO含量的检测

    将已保存好的SO组织匀浆，参照试剂盒说明书用硝酸还原酶法直接检测局部SO组织中蛋白的含量以及NO含量的变化情况。

    1.4胆囊胆汁胆固醇结晶及结石判断标准

    肉眼观察胆汁内有成形粗大颗粒,光镜下观察为致密大团块结晶，即定为结石［2］，正常兔胆囊胆汁均未见有形成分。胆固醇结晶定量：取部分胆囊胆汁离心，沉淀物涂片，光镜下观察有无胆固醇结晶。胆固醇结晶定量参照Juniper标准分为+，++，+++ 及++++四个等级。

    1.6统计方法

    采用SPSS13.0软件进行统计分析。计量数据以均数±标准差(±s)表示，两组间样本均数比较采用ｔ检验，P＜0.05为差异显著。

    2结果

    2.1实验动物一般情况及体重变化

    对照组动物生长良好，平均每周体重增加0.05~0.1 kg。实验组动物饲高胆固醇膳食后生长较快，体重增长明显，每周平均增长0.10~0.20 kg。各组动物喂养期间均无死亡。

    2.2胆固醇结晶形成情况

    胆固醇结晶与成石情况：对照组胆囊胆汁几乎无胆固醇结晶（0~±），高胆固醇膳食4周组胆固醇结晶开始增加（+++~++++），6周组及10周组明显增加（++++）；4周组未观察到明显结石，6周组4/8只、10周组7/8只出现结石。