ki67与c?erbB2在结肠癌及腺瘤中的表达及意义
【摘要】 目的：探讨ki67、c?erbB?2在结肠癌及腺瘤中的表达及意义。方法：采用免疫组化S?P法检测58例结肠癌，36例结肠腺瘤，20例正常结肠组织，分别进行了ki67蛋白、c?erbB?2蛋白的检测。结果：ki67在腺癌中的阳性率及表达强度最高，显著高于腺瘤（P＜0.01），腺瘤的中、重度不典型增生明显高于轻度不典型增生（P＜0.01）。c?erbB?2在腺癌中的阳性表达强度和表达率与正常黏膜及腺瘤相比差异有显著性（P＜0.01），有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者（P＜0.01）。结论：ki67的阳性表达及表达强度对诊断腺癌和监视腺瘤癌变有重要意义。c?erbB?2的阳性表达与结肠癌的发生、密切相关，可作为判断结肠癌恶性程度、淋巴结转移及预后的重要指标。
【关键词】 结肠癌；ki67蛋白；c?erbB?2蛋白；免疫组织化学
The Expression and Significance of ki67、c?erbB?2 in Colon Cancer and Adenoma
Abstract：Objective Discussing the expression and significance of ki67、c?erbB?2 in colon cancer and adenoma. Methods Uses the Immunochistochemistry S?P law to examine 58 colon cancers, 36 colon adenomaes, 20 example normal colon organization, has carried on ki67, the c?erbB?2 protein examination separately. Results Ki 67 and the expression intensity is highest in the gland cancer masculine gender rate Obviously higher then adenoma, P＜0.01. Adenoma, the specific weight atypical proliferation is higher than the mild atypical proliferation obviously, P＜0.01. c?erbB?2 and the expression rate compares in the gland cancer masculine expression intensity with the normal mucous membrane and the adenoma has the remarkable difference, P＜0.01. Has the lymph node shift to be higher than the non?lymph node shift obviously, P＜0.01. Conclusion ki67 and the c?erbB?2 masculine expression may take the judgment colon cancer malignant degree, the lymph node shift and the prognosis important norm for reference.
Key words：Colon cancer; Pro? ki67; Pro?c?erbB?2; Immunochistochemistry
结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤，结肠腺瘤是最常见的癌前病变，是发展为癌的首要危险因素，中报道90％以上的结肠癌来源于腺瘤。本研究旨在探讨ki67、c?erbB?2在结肠癌与腺瘤中的表达状况及意义，为结肠癌的早期诊断和预后评估提供帮助。
1 资料与方法
1.1 一般资料
标本为江西省乐平市人民病理科（作者原工作位）1997年3月至2003年3月间收检的结肠癌手术标本58例，手术及内镜下电切大肠腺瘤36例，其中轻度不典型增生19例，中、重度不典型增生17例。按WHO 1989年版肠道肿瘤分级标准，将58例结肠癌分为高、中、低分化，其中高分化癌15例，中分化癌26例，低分化癌17例；见有淋巴结转移32例，无淋巴结转移26例；选取20例正常结肠组织作为对照。
1.2 免疫组化染色
标本均经10％甲醛固定，石蜡包埋切片，切取4 μm厚切片，分别作HE染色和S?P法作ki67、c?erbB?2免疫组化。S?P试剂盒、ki67、c?erbB?2鼠抗人单克隆抗体均购自福州迈新公司。严格按照试剂盒及抗体的要求操作程序进行。DAB显色、苏木素复染、中性树胶封固、阳性对照用已知的阳性片作对照，阴性对照用PBS代一抗。
1.3 结果判断
ki67细胞核、c?erbB?2胞膜/胞浆出现黄色或棕黄色颗粒为阳性标志。每张切片观察5个高倍镜视野。每个视野计数100个肿瘤细胞，取其平均值为细胞阳性率，参照文献［1，2］方法，阳性细胞数≥50％为强阳性（+++），49％～30％为阳性（++），29％～10％为弱阳性（+），＜10％为阴性。
1.4 统计学处理
采用χ2检验，所得数据应用SPSS 11.5统计学软件进行处理。
2 结果
2.1 ki67细胞核表达
58例腺癌中弱阳性（+）4例，阳性（＋＋）16例，强阳性（＋＋＋）36例，表达率为96.55％；36例腺瘤中弱阳性（＋）10例，阳性（＋＋）5例，强阳性（＋＋＋）2例，表达率为47.22％；正常黏膜无一例表达，腺癌的阳性表达率及表达强度显著高于腺瘤（P＜0.01）。腺瘤中轻度不典型增生19例，4例弱阳性（＋），表达率为21.05％；中重度不典型增生17例，弱阳性（＋）6例，阳性（＋＋）5例，强阳性（＋＋＋）2例，表达率为76.47％，中重度不典型增生的表达率显著高于轻度不典型增生（P＜0.01）。
2.2 c?erbB?2胞膜/胞浆表达
58例腺癌中弱阳性（＋）3例，阳性（＋＋）12例，强阳性（＋＋＋）22例，表达率为63.79％；36例腺瘤中弱阳性（＋）6例，阳性（＋＋）2例，表达率为22.22％；20例正常黏膜中弱阳性（＋）2例，表达率为10％；腺癌的阳性表达率及表达强度显著高于腺瘤（P＜0.01），腺瘤的表达率高于正常黏膜，但统计学差异无显著性（P＞0.05）。
2.3 ki67、c?erbB?2阳性与结肠癌组织学分级和淋巴结转移的关系 见表1。表1 ki67、c?erbB?2阳性与结肠癌组织学分级和淋巴结转移的关系（略）
3 讨论
ki67为细胞增殖的一种标记，在细胞凋亡中S期、G2期、M期均有表达，它是一种核增殖抗原，主要定位于细胞核，与细胞周期密切相连，在有丝分裂中起着维持DNA有规则结构的重要作用。本研究显示：腺癌中的阳性率及表达强度显著高于腺瘤（P＜0.01）。ki67的阳性表达随着腺癌的组织学降低而增高，但无统计学意义（P＞0.05），有淋巴结转移和无淋巴结转移的表达状况差异无显著性（P＞0.05）。腺瘤中ki67的表达随着腺瘤不典型增生程度的增高而增强，中、重度不典型增生的明显高于轻度不典型增生（P＜0.01）。结果表明：ki67的阳性表达强度对诊断结肠腺癌和监视腺瘤癌变有重要意义，对结肠癌早期发现有较高价值，而与结肠癌的分化程度和淋巴结转移无明显相关性。
c?erbB?2癌基因又称neu或HER?2，是一个生长因子受体，研究表明c?erbB?2癌基因的扩增及其蛋白产物在某些腺癌组织中过度表达与预后密切相关［3，4］。有多篇报道了c?erbB?2基因在卵巢癌、胃癌、肺癌、结直肠癌等肿瘤中表达与这些肿瘤的诊断、、预后可能均有意义［5］。本研究显示：c?erbB?2阳性表达率腺瘤高于正常黏膜，但无统计学意义（P＞0.05），腺癌显著高于腺瘤（P＜0.01），有淋巴结转移的显著高于无淋巴结转移（P＜0.01）。结果表明：c?erbB?2蛋白的过分表达与结肠癌的发生、密切相关，与癌细胞的分化程度和淋巴结转移相关。提示：c?erbB?2蛋白的表达可作为鉴别大肠良恶性病变的重要指标之一，可成为判断结肠癌恶性程度、淋巴结转移及预后的主要指标。
【参考文献】
［1］王常会，魏良洲，杨献勇，等.表皮生长因子受体及ki67在大肠肿瘤组织中表达及意义［J］. 泰山医学院学报，2005，26（2）：99?101.
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