生白饮制剂中淫羊藿与黄芪及枸杞子的鉴别研究

【摘要】  目的：对生白饮中的淫羊藿、黄芪、枸杞子进行TLC鉴别。方法：采用薄层色谱法，对制剂中的淫羊藿、黄芪、枸杞子进行定性鉴别。结果：用薄层层析能得到清晰的分离结果，方法简单，可靠易行。结论：为生白饮提升标准提供了可靠的依据，可作为控制生白饮质量控制方法之一。

【关键词】  生白饮；淫羊藿；黄芪；枸杞子；鉴别

　　生白饮由淫羊藿、黄芪、枸杞、炮山甲、人血草、荞麦七等十二味药材组成。具有益气固本，养血生津的作用。由本院制剂室生产的生白饮临床上主用于眩晕、神疲乏力、纳差、气血虚弱、白细胞减少症。为有效地控制本品质量，笔者对其主药淫羊藿、黄芪、枸杞子进行了薄层鉴别，结果斑点明显，重现性好。

　　1  仪器与试药

　　硅胶G、硅胶H(青岛海洋化工厂)、层析用中性氧化铝(上海陆都化学试剂厂)；枸杞子对照药材、黄芪甲苷对照品和淫羊藿苷对照品(均购自药品生物制品检定所)；试剂均为分析纯；生白饮(本院制剂室提供，批号：041001、050601、061001)。紫外线分析暗箱(型号YOKO?ZX)，超声波清洗机(型号：KQ?50B)；电热恒温干燥箱(型号：GZX?DH)，数显恒温水浴锅(型号HH?2)。

　　2  薄层鉴别

　　2.1  淫羊藿实验方法

　　2.1.1  供试品溶液的制备  取生白饮5 ml，置水浴上蒸干，加乙醇10 ml，超声提取20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 ml溶解，作为供试品溶液。

　　2.1.2  淫羊藿苷对照品溶液的制备  取淫羊藿苷对照品加甲醇制成0.1 mg/ml的溶液，作为对照品溶液。

　　2.1.3  阴性对照液制备  取缺淫羊藿的生白饮5 ml，按供试品溶液的制备，制成阴性对照品溶液。

　　2.1.4  薄层层析［1］  取供试品液，淫羊藿苷对照液，阴性对照液各10 μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，以乙酸乙酯—丁酮—甲酸—水(10∶1∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的暗红色斑点；喷以三氯化铝试液，在105℃加热2 min～5 min，置紫外光灯(365 nm)下检视，显相同的橙红色至黄色荧光斑点。阴性对照液无此斑点，结果见图1(3.样品批号041001；4.样品批号050601；5.样品批号061001)。

　　2.2  黄芪实验方法

　　2.2.1  供试品溶液的制备  取生白饮30 ml，置水浴上蒸干，用正丁醇30 ml超声提取30 min，滤过，滤液加于中性氧化铝柱(100～120目，5 g，内径10 mm～15 mm)上，用40%甲醇100 ml洗脱，蒸干，残渣加水30 ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，20 ml/次，合并正丁醇液；用水洗涤2次，20 ml/次；弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5 ml使溶解，作为供试品溶液。

　　2.2.2  黄芪甲苷对照品溶液的制备  取黄芪甲苷对照品加甲醇制成1 mg/ml的溶液，作为对照品溶液。

　　2.2.3  阴性对照液制备  取缺黄芪的生白饮30 ml，按供试品溶液的制备，制成阴性对照品溶液。

　　2.2.4  薄层层析［1］  取供试品溶液，黄芪甲苷对照液，阴性对照液各5 μl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷—甲醇—水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展至12 cm~15 cm，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点；紫外光灯(365 nm)下显相同的橙黄色荧光斑点。阴性对照液无此斑点，结果见图2(3.样品批号041001；4.样品批号050601；5.样品批号061001)。

　　2.3  枸杞子实验方法

　　2.3.1  供试品溶液的制备  取生白饮5 ml，加乙酸乙酯提取，提取液浓缩至约1 ml，作为供试品溶液。

　　2.3.2  对照液制备  取枸杞子对照药材0.5 g,加水35 ml，超声处理10 min，滤过，滤液用乙酸乙酯15 ml振摇提取，提取液浓缩至约1 ml，作为对照药材溶液。

　　2.3.3  阴性对照液制备  取缺枸杞子的生白饮5 ml，按供试品溶液的制备，制成阴性对照品溶液。

　　2.3.4  薄层层析［2］  取供试品溶液，枸杞子对照药材溶液，阴性对照液各5 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯?丙酮?甲酸(4∶1∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照液无此斑点，结果见图3(3.样品批号041001；4.样品批号050601；5.样品批号061001)。

　　3  讨论

　　淫羊藿有刺激骨髓粒系和干系造血的功能，黄芪、枸杞子有显著的提高人体免疫功能的作用，能促进白细胞生成。选用此三味药进行薄层鉴别，能有效控制制剂的质量。参照［1］的提取方法，笔者将三味药材有效成分的提取，均改为超声提取，效果好，方法简单。黄芪的薄层层析中，如展距短，“杂质斑点”与主斑点分离较差，因此将展距控制在12 cm~15 cm，色谱分离度，重复性和可鉴别性良好，斑点清晰，供试品主斑点与对照品色谱相对应，阴性对照无干扰，结果易分辨。按照文献［1］进行淫羊藿的鉴别，喷以三氯化铝试液，不加热，直接置紫外光灯(365 nm)下检视，对照品和供试品斑点颜色变化不大，无荧光，不能判定，经过加热，再置紫外光灯365 nm下检视，对照品和供试品在相同位置均显相同颜色的荧光斑点，且斑点非常清晰、明亮，阴性对照也无干扰，便于判定。按文献［2］进行枸杞子的鉴别，斑点较文献［1］分离效果要好，斑点清晰，重现性好。按照上述方法进行生白饮的鉴别，方法简单，重现性好，可作为生白饮的质量控制方法之一。

【文献】
  　　［1］ 药典一部［S］．2005，212：229．

　　［2］ 中华人民共和国卫生部部颁标准(中药成方制剂第十三册)［S］.1997：3．