革兰阴性杆菌感染的分布及耐药性分析
【摘要】 目的：探讨革兰阴性杆菌感染的分布及常用抗生素耐药情况。方法：运用纸片扩散法（K?B法）检测1 448株革兰阴性杆菌对12种抗生素的敏感性。结果：医院感染前5位的阴性杆菌分别是大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌。敏感的抗生素分别是亚胺培南、头孢哌酮/ 舒巴坦、头孢吡肟、头孢他啶。结论：根据医院革兰阴性杆菌感染的细菌种类和耐药情况，为临床感染合理使用抗生素提供依据。
【关键词】 革兰阴性杆菌（G-）；微生物敏感试验；医院感染
近年来，随着广谱抗生素、免疫抑制剂的广泛应用，医院感染菌不断发生变化，同时细菌耐药现象愈来愈严重，导致临床抗感染治疗效果不佳［1］。因此，了解医院感染细菌分布及耐药性趋势，具有重要临床意义。现就我院3 年来革兰阴性杆菌感染的分布及耐药性进行分析，旨在对临床抗感染治疗提供依据。
1 材料与方法
1.1 菌株来源 2003 年10 月至2006 年10 月，我院临床分离细菌菌种2 406株，其中，革兰阳性球菌958株（39.8%），革兰阴性杆菌1 448株（60.2%）。在1 448株革兰阴性杆菌中，来自呼吸系统的痰液和咽拭子739株（51.0%），尿液417株（28.8%），分泌物225株（15.5%），其余的67株（4.7%）来自血液、骨髓、胆汁、前列腺液等。质控标准菌：大肠埃希菌（ATCC 25922），铜绿假单胞菌(ATCC 27853），购自卫生部临床检验中心。
1.2 细菌分离鉴定 严格按照《全国临床检验操作规程》进行接种培养，运用生物梅里埃公司提供的API 20 E、API 20 NE 微生物鉴定板条进行鉴定。
1.3 药敏试验 严格按照NCCLS的规定进行药敏操作。超广谱β?内酰胺酶（ESBLs）的检测采用头孢噻肟、头孢噻肟/ 克拉维酸和头孢他啶、头孢他啶/ 克拉维酸双纸片扩散法。药敏纸片购自北京天坛科技生物公司，结果根据NCCLS 2002 年的标准判定。
2 结果
2.1 细菌种类分布与耐药率 在1 448株的革兰阴性杆菌中，肠杆菌科细菌897株（61.9%），非发酵菌551株（38.1%）。排在前5位的分别是大肠埃希菌394株（27.2%）、铜绿假单胞菌232株（16.0%）、肺炎克雷伯菌230株（15.9%）、鲍曼不动杆菌201株（13.9%）、阴沟肠杆菌131株（9.1%）。其中，泌尿系统感染主要是大肠埃希菌，呼吸系统主要病原菌是铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和阴沟肠杆菌。另外，1 448株革兰阴性杆菌对12种抗生素的耐药率比较，见表1。
表1 1 448株G-杆菌对12种抗生素的耐药率比较（略）
2.2 产ESBLs 的检出率与耐药率 试验菌株数为624株，共有192株ESBLs阳性（30.8%）。其中大肠埃希菌394株，阳性150株（38.1%）；肺炎克雷伯菌230株，阳性42株（18.3%）。产ESBLs与非产ESBLs菌株对12种常用抗生素的体外抗菌活性，见表2。
表2 12种抗生素在产ESBLs与非产ESBLs菌株的耐药率比较（略）
3 讨论
本文结果显示，我院革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌分布与上海地区报道一致［2］。在12种抗生素中，抗菌活性最好的是亚胺培南、头孢哌酮/ 舒巴坦、头孢吡肟，耐药率在10%左右。其次是头孢三代（ 头孢噻肟、头孢他啶），耐药率在20%左右。氨基糖苷类（尤其是阿米卡星）的耐药率较低，因而对于重症感染患者可以采用与上述药物联合［3］。肠杆菌科细菌中主要是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，其中产ESBLs株分别是38.1%、18.3%。本文显示，产ESBLs株对各种抗生素的耐药率明显高于非产ESBLs株，说明产酶菌株有可能多重耐药。按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)2002年规定，产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌药敏结果，应该是青霉素类、头孢菌素类、氨曲南等药物均为耐药，即使体外试验敏感，临床治疗无效。因此，治疗产ESBLs株应选用耐药率低的亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、氨基糖苷类和喹诺酮类可根据药敏结果合理选用。对于非产ESBLs的肠杆菌科细菌引起的感染，可首选头孢二代、三代的抗生素进行治疗。在非发酵菌中，铜绿假单胞菌是引起感染的主要机会致病菌，耐药率最低的是亚胺培南为2.6%。哌啦西林、头孢他啶的耐药率也较低，分别为22.1%、9.5%，联合阿米卡星治疗是目前比较合理的方法。另外，不动杆菌的分离率也较高，达13.9%，研究表明有逐年上升的趋势［4］，应引起临床的高度重视。治疗应至少选用头孢三代、四代的抗生素。嗜麦芽窄食单胞菌也是一种非发酵的G-杆菌，多见于长期接受广谱抗生素治疗、免疫力受损的患者，特别是建立人工气道、接受通气治疗的危重监护患者。由于嗜麦芽窄食单胞菌外膜的低渗透性，是造成多种抗生素天然耐药的原因之一［5］。此外，该菌产生青霉素酶、头孢菌素酶和含锌离子的金属酶，导致多种β?内酰胺类抗生素耐药，包括对ESBLs抑制剂敏感性低和水解亚胺培南。药敏结果显示，治疗该菌的感染应选用头孢吡肟、头孢哌酮/ 舒巴坦、左旋氧氟沙星，其敏感率在50%以上［6］。
【】
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