两种测定糖化血红蛋白的方法学比较
【关键词】 糖化血红蛋白
［关键词］ 糖化血红蛋白
糖化血红蛋白A1C(HbAlC)能够客观的反应近2个月内平均血糖水平的指标［1］，现已在临床上诸多方面得以应用。在测定HbAlC的诸多方法中，如：层析法、比色法、电泳法、免疫法等，离子交换高效液相层析法(HPLC法)已获得FDA认证，是公认的金标准检测法。但是由于仪器、操作要求高而不能被广泛使用；胶乳凝集免疫法由于操作简便，反应时间短，试剂易购买等优点可以推广应用，但准确性难以确认。所以本文对胶乳凝集法测定HbAlC进行方法学评价，并将测定结果与HPLC法测定结果比较，为临床医师及检验师在分析不同方法测定HbAlC的结果时提供。
1 资料与方法
1．1 标本来源
由北京九强公司提供已经HPLC法准确测定的样本，HbAlC的浓度分别为4．0％、6．0％、8．0％、10．0％、12．0％、14．0％、16．0％、18．0％、20．0％。
1．2 试剂仪器与方法
胶乳凝集法HbAlC检测试剂盒(批号03960)，由北京九强公司提供。HATACHl7080全自动生化分析仪(日立公司生产)。8．9 mmol／L甘油三酯(TG)、8．1 mmol／L胆固醇(TC)、124 mol／L胆红素(TBIL)定值血清(上海丰汇公司提供)。参数和方法均按照试剂盒说明书进行。
2 结果
2．1 线性实验
将1．1中全部样本用胶乳凝集法测定后制成曲线图。结果见图1。
2．2 精密度实验
取浓度4．5％、8．0％、14．2％的样本重复测定15次得批内精密度；每日上下午各测一次，连续测定10 d，得批间精密度。结果见表1。表1 胶乳凝集法测定HbAlC批内批间精密度浓度(略)
2．3 干扰实验
取HbAlC的浓度14．2％的样本200 μl，共取4份，分别加入40 μl的蒸馏水、8．9 mmol／LTG、8．1 mmol／LTC、124 mol／L TBIL定值血清，用以检测以上因素对测定结果的影响。结果见表2。表2 胶乳凝集法测定HbAlC的干扰实验（略）
3 讨论
3．1 线性实验
胶乳凝集法的线性范围是3.2%~14.2%，与报道［2］的2.3%~15.5%基本一致，而与离子交换高效液相层析法测定HbA1C的3.0%~18%有一定差别。
胶乳凝集法在测定高浓度HbAlC的样本时与HPLC法相比结果偏低，而且有下降趋势，这可能与抗体浓度不能达到相关高度有关。所以用胶乳凝集法在测定高浓度HbAlC的样本时应进行稀释后再分析。
3.2 精密度实验
胶乳凝集法在批内、批间的平均CV分别为2．2％、2．3％，均<5．0％，与文献报道［3］的HPLC法与胶乳凝集法在批内、批间的平均CV0．84％、2．4％、2．1％、2．4％基本相符，符合实验要求。
3．3 对比实验
HPLC法设定为X，胶乳凝集法设定为Y，回归方程为Y=1．05X0．68(r=0．93,P<0．01)，X与Y的t检验结果为txy=2．1>t0．05=1．98,P<0．01，二者差异有显著性，胶乳凝集法结果偏低。这种结果在实验中应给以关注。
文献：
［1］康格非.临床生物化学和生物化学检验［M］.北京：人民卫生出版社，1999，1：165169.
［2］郑彤.胶乳凝集法测定糖化血红蛋白［J］.上海医学检验杂志，2001，16：231241.
［3］苏作军．糖化血红蛋白不同测定法的评价［J］.检验医学，514517．
