溶血对干化学和湿化学法测定血清胆红素的影响

【关键词】  干化学

　　［摘要］ 目的：了解干化学法和湿化学法测定无溶血及溶血时测定总胆红素和结合胆红素的差异。方法：分别采用干化学法和湿化学法测定无溶血及溶血血清总胆红素和结合胆红素。结果：无溶血时,两种方法测定总胆红素差异无显著性，结合胆红素测定差异有显著性；溶血时，除干化学法结合胆红素测定与无溶血时差异无显著性外，其他测定与无溶血时差异均有显著性。结论：干化学法和湿化学法测定结合胆红素不可等同。溶血时干化学法测定结合胆红素更为可信。

　　［关键词］ 干化学；总胆红素；结合胆红素；直接胆红素；溶血

　　Infection To Dry Chemistry Method And Conventional Wet Chemistry Method For Serum Bilirubin By Hemolysis

　　GONG Liying， MA Qinghong

　　(Liaoning Province People's Hospital， Shenyang, Liaoning 110015， China)

　　Abstract：Object To compare the serum bilirubin results obtained by conventional wet chemistry method and dry chemistry method,when the serum hemolysis and not hemolysis.Methods Two method examine conjugated bilirubin and direct bilirubin.Results There was no significant difference between the two methods for total bilirubin analyzation,yet significant difference between conjugated bilirubin.Significant difference results of total bilirubin and conjugated bilirubin between hemolysis and not hemolysis by conventional wet chemistry method,yet no significant difference for conjugated bilirubin by dry chemistry method.Conclusion The conjugated bilirubin results obtained by dry chemistry method was believable than by conventional wet method.

　　Key words：Conventional wet chemistry；Dry chemistry；Conjugated bilirubin；Direct bilirubin；Hemolysis

　　长期以来，人们将人体血清胆红素描述为“总胆红素”，“直接胆红素(亦称结合胆红素)”和“间接胆红素(亦称未结合胆红素)”［1］。而干化学法则将胆红素分为“总胆红素”、“结合胆红素”、“未结合胆红素”和“δ胆红素”，并认为，总胆红素=结合胆红素-未结合胆红素+δ胆红素，直接胆红素=总胆红素未结合胆红素=结合胆红素+δ胆红素［2］。为了解溶血对胆红素测定的影响，我们测定不同血红蛋白浓度标本的总胆红素、结合胆红素，并进行方法学比较，现报告如下。

　　1  材料与方法

　　1.1  实验材料

　　1.1.1  仪器

　　1.1.1.1  湿化学方法  日本OLYMPUS AU-1000全自动生化分析仪。

　　1.1.1.2  干化学方法  美国VITROS 250全自动生化分析仪。

　　1.1.2  试剂

　　1.1.2.1  湿化学方法  日本OLYMPUS配套试剂。

　　1.1.2.2  干化学方法  美国VITROS配套试剂。

　　1.2  实验方法  用两种方法分别测定30份不同浓度正常血清的总胆红素和结合胆红素各2次，取平均值，见图1、图2。

　　取1份无溶血混合血清。各分成4份，其中3份加入不同浓度的血红蛋白液(Hb)，造成人工溶血现象，并将对照组加入同体积生理盐水，用两种方法测定各管中的总胆红素和结合胆红素(重复测定3次取平均值)。采用t检验比较溶血对两种方法的影响。

　　2  结果

　　干化学与湿化学测定胆红素正常组结果比较见表1、表2。干、湿化学测定总胆红素结果差异无显著性(P＞0.05)，γ=0.992。直线回归方程Y=1.01X+0.06。而两种方法测定结合胆红素差异有显著性(P＜0.01)。

　　溶血时，干化学法测定结合胆红素与无溶血时差异无显著性(P＞0.05)，总胆红素测定与无溶血时差异有显著性(P＜0.01)；溶血时，湿化学法测定结合胆红素、总胆红素与无溶血时差异均有显著性(P均＜0.01)。

　　表1  不同浓度Hb对干、湿化学法测定TBIL的影响方法(略)

　　注：与Hb浓度为0比较，*P＜0.0１；ΔP＜0.0１

　　表2  不同浓度Hb对干、湿化学法测定Bc的影响方法(略)

　　注：与Hb浓度为0比较，*P＞0.05；ΔP＜0.01

　　图1  干、湿化学法TBIL测定相关图(略)

　　图2  干、湿化学结合胆红素测定相关图(略)

　　3  讨论

　　由本实验可知，干、湿化学两种方法测定TBIL差异无显著性，与黄恩芳［3］得出的结论相同，两者结果差异无显著性(P＞0.05)。

　　在干化学法中认为TBIL=Bc+Bu+δB。Bc与DB不同，DB包含约67%～75%的双葡萄糖醛酸胆红素和约85%的δB［4］。然而，湿化学中认为DB=Bc。由本实验可知，湿化学中的DB与干化学中的Bc是不同的两个概念，其测定结果也差异有显著性，二者不可混为一谈。

　　溶血对两种方法TBIL测定均有影响，正干扰明显。而干化学测Bc则不受溶血(Hb<12 g/L)影响(P＞0.05)，湿化学正干扰明显(P＜0.01)。建议临床溶血标本测定Bc时采用干化学法。

　　：

　　［1］  Lott J A.New concepts in serum bilirubin measurement［J］.Laboratory Management,1987，4:4148.

　　［2］  VITROS干片方法学手册.

　　［3］  黄恩芳，张文，高玲，等.陕西医学检验［J］，2001，2(16)：1214.

　　［4］  Cox C J，Valdiserri RO，Zerhe T，et al.Ektachem bilirubin fractions in an adult outpatient population［J］.Laboratory Medicine，1987，18(3)：159161.