流式尿沉渣全自动分析仪原理及其临床应用价值探讨

【关键词】  SYSMEX,UF-100流式尿沉渣分析仪；尿液检查；干化学法

　　［摘要］ 目的：探讨UF-100流式尿沉渣全自动分析仪的临床应用价值。方法：随机收集了我院住院和门诊患者标本360例，同时用UF-100、联机尿干化学分析仪AUTION MINI AM-4290型、以及显微镜进行检查。结果：RBC检出率：UF-100为20.00％，干化学法为20.00%，常规显微镜检查为15.8％；WBC检出率：UF-400为18.3％，干化学法为6.7％，常规显微镜检查为23.3％。结论：UF-100和干化学法结合起来进行初筛，泌尿道感染的快速可靠的过筛方法。

　　［关键词］ SYSMEX UF-100流式尿沉渣分析仪；尿液检查；干化学法

　　尿液分析是临床最为常用且信息最为丰富的实验项目之一。而尿液中有形成分的检查是诊断肾脏疾病及尿道疾病的主要方法之一，并为临床提供诊断及鉴别的依据，现今多数实验室中，其分析程序多为试纸条呈阳性时结合尿沉渣显微镜检查所构成，而试纸条呈阴性的样本则视为正常。然而由于试纸条的固有误差，如药物或碱性尿时对蛋白质的影响，高浓度蛋白尿对白细胞脂酶的抑制等，试纸条阳性样本镜检结果说明其尚不能完全“胜任”鉴别异常样本。尿沉渣显微镜检查虽然被认为是识别有形成分的“金标准”，但该方法需离心等需时间长，精确度差，计数域较小，技术人员水平差异加之日益增加的工作量，劳动强度大等缺陷，都将影响结果的准确性和无法满足临床的需要。我们2003年底引进一台SYSMEX UF-100尿液有形成分流式细胞仪，该仪器专为临床实验室的尿液分析而设计，仪器通过对前向散射光(FSC)、荧光(FL)和电阻抗(IMP)的直接检测，可以自动地计数5种成分。能对正常和异常的标本进行筛选，指导尿液分析异常的患者做进一步的检查，UF-100的高度自动化保证了分析仪的独立操作，使整个工作流程更有效率，并且极大地降低了工作人员潜在的生物危害暴露，精确计数及分类，具有快速、简便、精确度好，多参数等优点，随机收集了我院住院和门诊患者标本360份，同时用UF-100，联机尿液干化学分析仪，以及显微镜进行检查，分析其多个参数指标，探讨UF-100的临床应用价值。

　　1　资料与方法

　　1.1　资料

　　1.1.1　一般资料　　

　　随机收集住院和门诊患者尿液标本360份。

　　1.1．2　UF-100尿沉渣分析仪，联机尿干化学分析仪，普通光学显微镜。

　　1.2　实验方法

　　1.2．1　用清洁一次性尿杯，收集患者尿液，充分混匀后分2管，1管用UF-100检测；吸样800 μl，自动稀释4倍以溶解其结晶，以后将尿沉渣中的DNA和细胞膜用两种荧光染色后激光照射。在鞘流的作用下，单个细胞，管形等有形成分通过激光检测部时，即产生前散射光和荧光的脉冲强度和宽度共4个信号，结合电阻抗参数，仪器自动分析出红细胞、白细胞、上皮细胞、管形和细菌的定量参数。同时，还分析出小园上皮细胞，酵母样细胞，病理管形、结晶和精子的定性参数。结果以直方图，散射图，每微升细胞数以及XX/HPF表示。

　　1.2.2　第2管尿液约10 ml，首先用做干化学分析，检测其比密，pH、WBC、隐血(RBC)、亚硝酸盐、蛋白质、葡萄糖、酮体、尿胆原、胆红素。

　　1.2．3　然后用离心机1 500 r/min，离心5 min，离心后倒出上清尿液，沉渣残留量0．2 ml，摇匀，涂片，在高倍镜下观察20个视野以上，取其平均数，以XX/HPF报告，管形在低倍镜下观察10个视野以上，取其平均数以XX/LPF报告。所用显微镜下检测由同一个人完成。

　　2　结果

　　2.1　值　　

　　UT-100结果：男性RBC0-12/μl，WBC<12/μl女性RBC 0-24/μl，WBC<26/μl，显微镜结果：WBC<5/HPF，RBC 0/HPF-偶见/HPF≥3/HPF为镜下血尿，管型0/HPF-1/LPF，超出此范围视为阳性。

　　2.2　将同一标本，用三种方法检测，顺序分组，见表1。

　　2.3　关于RBC　　

　　UF-100与显微镜和干化学法的比较见表2。UF-100与显微镜不同者，其中4例示标本中有大量草酸钙结晶和其他结晶，6例有酵母菌，4例有精子，这些对UF-100检测RBC干扰作用。还有干化学法检测阳性,UF-100可将已溶解的RBC(影RBC)出现在RBC直方图上前向散射光线较低的区域检测出来。显微镜检验不能识别溶解RBC，造成某种程度的假阴性。UF-100+尿干化学法可大大提高RBC检测的精确性。

　　2.4　关于WBC　　

　　UF-100与显微镜检测及干化学相符合者，24例三种检测都为阳性，而显微镜和UF-100阳性高于干化学，干化学检验WBC是试带膜块中含有吲哚酚酯，在尿中中性粒细胞酯酶的作用下游离出吲哚酚，与重氮盐反应而产生紫色。那么尿中以淋巴细胞居多时，可呈假阴性。在NIT阴性的样本中，细菌差别较大，范围为4~9 600，而UF-100细菌数与WBC计数相关性是，白细胞阳性，细菌数都在1000以上的相关性较好。

　　2.5　关于管形　　

　　UF-100能够识别透明管形和病理管形，显微镜镜检显示6份样本存在颗粒型，UF-100检测有48份存在管形，其中6份有病理管形，和显微镜的颗粒管形是相符的，在假阳性标本中，尿中WBC、RBC计数以及结晶比较多，这会影响管型测定，还有黏液丝。

　　2.6　关于上皮细胞(SEC)　　

　　UF-100检测有20例阳性，显微镜检测有21例阳性。关于精子UF-100检测6例，显微镜检测是酵母菌和草酸钙结晶，不是精子，而显微镜检出12例有精子，UF-100未检出。

　　3　讨论

　　在本文中，我们比较了UF-100、干化学法、以及显微镜检查对尿液标本检测，从表1可见，UF-100具有较高的灵敏度和准确度，同时我们对同一标本三种不同的检测方法所得结果进行了比较，见表2，大多数标本三种检测结果一致，在不相符标本中，UF-100对WBC、RBC管形有较高的检出率，过去通常把显微镜检测作为尿沉渣检测的金标准，但显微镜检测有它无法克服的误差，如离心过程中红细胞丢失，破坏、变形、不同操作人员之间的误差，以及不能检测已溶解的红细胞，可能造成诊断中的假阴性。干化学只能检测Hb，但易受氧化性物质的干扰。故而，通过实践证明，UF-100所获得的WBC和RBC计数结果是可靠的，很大程度上能够成功替代手工法对于脓尿和血尿的检测。检测WBC时，UF-100、显微镜与干化学相差甚远。干化学法检测WBC是通过试纸带上的吲哚酚酯与粒细胞浆中的酯酶结合产生颜色变化而测定，淋巴细胞浆中无此成分，固干化学法不能检测淋巴细胞。尿液亚硝酸盐(NIT)测定是诊断尿路感染的指标之一，但亚硝酸盐只对革兰氏阴性杆菌有效，干扰因素较多，本文中，用干化学法检测NIT阳性的2例标本中，UF-100检测细菌数39 441、75 413．7 μl。UF-100对管型的测定不及WBC和RBC那样有效，UF-100的假阳性太多，这有可能是UF-100把其他有形成分当作是管型。UF-100和干化学应用的策略，初筛作用，技术与的使临床尿液常规检查将得以重新定义，尿沉渣分析和干化学试纸条结合起来进行初筛。每份样品进行两种检测，用试纸条分析蛋白、糖、酮体、PH、隐血、胆红素、比密等理化指标，而尿沉渣仪检测WBC、RBC、细菌等有形成分，固其对于尿液有形成分具有较精确的自动化定量计数。对于初筛后的阳性标本，目前仍需镜检。尿试带法的确证试验，因干化学法可造成一定的假阳性和假阴性，因此也属过筛试验。原则上阳性结果应以传统手工法复核，这是质量保证的重要环节，通过复核可发现许多药物或其他干扰。这样联合操作，将极大降低人工显微镜复查的比率，尿流式沉渣分析仪是目前技术含量最高(组化染色，激光分析)，速度最快(100样品/h)，精密度最好，不受主观因素影响的尿沉渣定量方法。UF-100仪器对筛选大量标本的门诊特别实用。表1　各种方法对各种成分阴、阳性比较