血液储存时间温度对FⅧ:C活性的影响
【关键词】 ,,温度
摘 要:目的:观察血液储存时间、温度对FⅧ:C活性的影响,为制备FⅧ:C活性符合质量标准的新鲜冰冻血浆及冷沉淀提供依据。方法:采用生物梅里埃公司生产的COAG-A-MATE MTX全自动血凝仪测定30份血液分别于不同温度,不同时间制备的FFP的FⅧ:C活性水平。结果:血液采集后不同储存温度,不同储存时间所制备的FFP中FⅧ:C活性水平有显著性差异(P<0.05)。结论:FFP中FⅧ:C活性水平与储存温度、时间相关,全血采集后4℃冰箱保存,于6h内分离、-50℃速冻而成的FFP其FⅧ:C活性水平符合新鲜冰冻血浆质量要求。
关键词: 温度; 时间; FFP; FⅧ:C活性
Effects of Time and Temperature of Blood Storage on Activity of the FⅧ-C
LIU Ren-qiang, QIN Yan-lan
(Dongguan Blood Center, Guangdong Dongguan 523930, China)
Abstract: Objective: To explore the effects of storage time and temperature of blood on function of the FⅧ-C, to offer references on making fresh frozen plasma. Method: Detected 30 fresh frozen samples in different temperature and different time to observe the activity of the FⅧ-C by automatic COAG-A-MATE MTX. Result:The activity of the FⅧ-C in fresh frozen plasma was different in different time and different temperature after blood collecting (P<0.05) . Conclusion: The activity of the FⅧ-C is relative to the storage time and temperature of blood. It is normal if plasma was fast frozen in -50℃ in 6h after blood collection which was stored in 4℃.
Key words: Temperature; Time; Fresh frozen plasma; Activity of FⅧ-C
新鲜冰冻血浆(FFP)是目前临床常用的一种血液成分,在和预防出血性疾病、大量输血所致的凝血功能障碍及治疗性血浆置换等方面起非常重要的作用[1],然而,由于凝血因子,特别是 FⅧ:C的不稳定性[2],在血站的血液采集、分离过程及血库保存,融化后不能及时输注等方面都会影响其生物活性,尤其是实施无偿献血后,血液从采集到成分制备,FFP冻成往往超过6h~12h,FⅧ:C活性水平较难达到标准,是部分血站质控面临的新问题。笔者通过两种试剂检测FⅧ:C活性结果比较及血液在不同温度下储存、不同时间制备的FFP对FⅧ:C活性的影响,为如何提高FFP中FⅧ:C活性水平提供参考。
1 材料与方法
1.1 实验仪器与试剂:生物梅里埃公司生产的COAG-A-MATE MTX全自动血凝仪,生物梅里埃公司生产的Ⅷ因子试剂:缺Ⅷ因子血浆,批号113030;APTT,批号113088;0.025CaCl2,批号 113007;Owren’s Veronal Buffer,批号 113105。FⅧ:C 检测试剂盒 医学院输血研究所,批号20050701。正常参比血浆的凝血因五FⅧ促凝活性单位为(0.91±0.09)IU/ml,由中国科学院输血研究所提供。
1.2 样本及方法:随机抽取新鲜采集的CPD抗凝全血30份,留样分成8管,各4管分别放在4℃、22℃不同温度条件下保存,分别于0 h、6h、12h、24h应用生物梅里埃公司生产的COAG-A-MATE MTX全自动血凝仪测定其FⅧ:C活性。用两种不同试剂测定正常参比血浆凝血因子FⅧ:C活性10次,进行结果比较。
1.3 凝血因子FⅧ:C活性测定方法:严格按照生物梅里埃公司生产的COAG-A-MATE MTX全自动血凝仪操作说明和试剂要求进行。
1.4 统计学方法:采用配对t检验。
2 结果
2.1 30份血液保存在不同温度、不同时间条件下检测FⅧ:C活性结果见表1。
表1 不同温度、不同保存时间条件下检测FⅧ:C活性结果比较(略)
统计分析:FⅧ:C活性在血液采集后的0h、6h、12h、24h保存在4℃与22℃都有显著性差异(P<0.05),在同一温度下不同时间其结果也有显著性差异(P<0.05)。
2.2 两种试剂测定正常参比血浆FⅧ:C结果比较见表2。
表2 两种检测测定正常参比血浆FⅧ:C结果比较(略)
两种试剂检测FⅧ:C活性其结果无显著性差异(P>0.05)
3 讨论
FFP是从单一正常献血者用ACD或CPD抗凝剂采集全血,要求在4℃离心将血浆分出,并在6h内冻结而成。血浆中不稳定的凝血因子之一FⅧ:C,随着保存时间延长其活性逐渐降低,本次检测结果表明6h后FⅧ:C活性已经降低, 12h~24h后其FⅧ:C活性衰减了50%左右,与全血采集在4℃保存12、24h后较抽血即刻比较无显著性差异的报道[3]不同,而与有关FFP 4℃保存12h后FⅧ:C活性衰减50%[4]基本一致。本次实验观察了不同温度条件下保存的FⅧ其活性的影响,结果表明温度对FⅧ:C活性有极大的影响,这与22℃保存的血液制备浓缩血小板后,制备的FFP中FⅧ:C活性无影响结论不同。据了解实际工作中所制备的FFP其FⅧ:C活性较难完全达到国家规定的≥0.7IU/ml的要求,这与血液采集后保存温度、时间有关,因为大部分血站实施街头无偿献血后,血液从采集到血浆分离冻成超过6h~12h,并且血液采集分散,车载冰箱门打开频繁,温度变化大,对FⅧ:C活性产生较大影响。对此问题,建议用单位集体组织的无偿献血的血液制备FFP及冷淀沉,22℃保存制备血小板的血浆与4℃保存超过6h的血液作为普通血浆,临床上根据不同的病人需要补充相适的血液成分,提高临床输注效果。
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[1] 田兆嵩,主编.临床输血学[M].北京:人民卫生出版社,2002.43-45.
[2] 王振义,李家增, 阮长耿,主编.血栓与止血基础理论与临床[M].上海:上海技术出版社,1987.61-66.
[3] 胡丽华,曹奎杰,陈汉华,等.库存全血凝血因子Ⅷ改变的研究[J].临床血液学杂志,2000,13(1):21-24.
[4] 杨江存,李芒会,于青,等.新鲜冰冻血浆融化后不同放置时间凝血因子的变化[J].输血杂志2005,18(3):211-212.