针刺五脏俞穴调五脏神针法对失眠大鼠单胺类神经递质的影响

                    作者：胡金凤，王朝辉，齐燕英，邵丹

【摘要】  目的：观察针刺五脏俞穴对大鼠失眠单胺类神经递质的影响。方法:将Wistar大鼠40只随机分为4组。空白组：空白对照；模型组：腹腔注射PCPA;针刺组:腹腔注射PCPA后，连续5 d给予针刺，安定组：腹腔注射PCPA后，连续5 d给予安定灌胃治疗。分别观察大鼠脑内5?HT、5?HIAA、NE含量的变化。结果：模型组脑内5?HT、5?HIAA含量明显降低，与空白组比较有显著性差异(P＜0.05)。安定组脑内5?HT、5?HIAA含量均有明显升高，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)。针刺组脑内5?HT、5?HIAA含量有明显升高，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)。结论：针刺五脏俞穴对失眠大鼠单氨类神经递质紊乱的影响显著，针刺五脏俞是治疗失眠症的一种有效方法。

【关键词】  针刺；五脏俞穴；五脏神；失眠；单胺类神经递质；大鼠

　　笔者在导师东贵荣教授调五脏神治疗失眠症经验的基础上，采用“针刺五脏俞调五脏神针法”探讨针刺治疗失眠的作用机制［1?2］，为“调五脏神治疗失眠”学说提出实验依据。

　　1  材料与方法

　　1.1  实验动物 

　　健康Wistar大鼠，雄性，体重180～220 g，长春高新动物实验中心提供，为普通级动物，许可证号：SCKE?(吉)2003。常温下饲养1周。

　　1.2  造模方法 

　　采用对氯苯丙氨酸(PCPA)腹腔注射的方法，PCPA临用前按大鼠450  mg/kg用量，用弱碱性生理盐水配置成混悬液备用。除空白组外，其余3组腹腔注射PCPA混悬液,连续注射2 d，正常组不做任何处理，于第1次腹腔注射28～30  h后，大鼠出现昼夜节律消失，白天夜晚活动不停，表明模型复制成功。诱发成功者进行分组治疗和观察，然后用断头器处死大鼠，在枕骨大孔处迅速剪断延髓，去颅骨，完全暴露脑组织，取出脑组织，在冰平皿上分离出下丘脑后，在冰冷生理盐水中洗去血液，组织称重后，在冰浴条件下充分匀浆，离心(3 000 r/min,10 min)，取上清液待用。用酶联免疫法检测3种单胺类神经递质。

　　1.3  实验分组 

　　空白对照组，不作针灸治疗，每日空抓，与治疗组同时处死；模型组，造模成功后，不作任何处理，立即处死，反应针灸前的单胺类递质水平；安定组，为模型对照组，腹腔注射PCPA后，连续5  d给予安定灌胃治疗，观察造模后药物对单氨类递质水平的影响。针刺组,取肺俞(双)、心俞(双)、脾俞(双)、肾俞(双)，观察针刺对单氨类递质水平的影响按。

　　1.4  针刺方法 

　　参照华兴邦大鼠穴位图谱，于第三胸椎棘突下旁开7 mm取“肺俞(双)”，于第五胸椎棘突下旁开7 mm取“心俞(双)”，于第12胸椎棘突下旁开7 mm取“脾俞(双)”，于第2腰椎棘突下旁开7 mm取“肾俞(双)”。 　　常规消毒后，采用华佗牌不锈钢毫针0.35×20 mm,直刺6 mm，将Hj6805?1型经穴治疗仪，正极接肺俞的毫针，负极接肾俞的毫针进行疏密波(8/80Hz)转换，14次/min，电压强度从1 V随针刺时间和次数逐渐增加，保持局部轻微抖动为度，终强度为3 V电流为1 mA)。通电时间为10 min，留针20 min为1个针刺周期，连续重复5个针刺周期，共计2.5 h，出针后0.5 h处死大鼠。安定片，按成人催眠剂量10  mg/d，用大鼠给药剂量体表面积公式算出大鼠给药剂量为0.92 mg/kg。动物治疗时不作麻醉，以自行设计的鼠架固定下行针灸操作。

　　1.5  观察方法 

　　各对照组及针灸组的下丘脑内的5?HT、5?HIAA、NE的含量。酶联免疫法测定。

　　2  实验结果

　　2.1  针刺对失眠大鼠下丘脑内5?HT、5?HIAA含量的影响 

　　见表1。表1  针刺对失眠大鼠脑内5?HT、5?HIAA含量的影响(略)注：与模型组比较，★P＜0.05(下同)

　　2.2  针刺对失眠大鼠下丘脑内NE含量的影响 

　　见表2。 表2  针刺对失眠大鼠下丘脑内NE含量的影响(略)

　　3  小结
       
　　医学研究证明，睡眠过程受中枢神经递质的控制，与睡眠密切相关的中枢神经递质有5?HT，5?HIAA、NE［3?5］。本研究经“针刺五脏俞调五脏神”针法治疗5 d后，失眠大鼠下丘脑内降低的5?HT、5?HIAA含量明显升高，达到正常水平，升高的NE含量明显降低，提示“针刺五脏俞调五脏神”针法对失眠大鼠睡眠的作用是增加其脑内5?HT合成与代谢、降低OE含量，恢复5?HT通路与NE通路之间的相互平衡和制约，进而恢复正常的睡眠—觉醒节律，达到治疗失眠的目的［6?8］，其机理还有待于进一步研究。

【】
  　　［1］胡金凤.从五脏藏神的理论内涵探讨膀胱经五脏俞穴治疗失眠症的立法原则［J］.针灸,2006,26(1):69?71.

　　［2］江 帆.与睡眠相关的中枢单胺类递质［J］.国外医学精神病学分册,2001,1(28):56.

　　［3］Jouvet M.Sleep and serotonin:an unfinished story［J］.Neuropsychopharmacol,1999,21(2):24?27.

　　［4］Poters CM,et al.Neuroscience,1998,83(3):808?814.

　　［5］王 志.腹侧背盖核DA神经元调节睡眠——觉醒机制的探讨［J］.生报,1997,49(2):135?140.

　　［6］EI Mansari M,Sakai K,Jouvet M.Unitary charactetistic of presumptive cholinergic tegmental neurous during the sleep?waking cycle of freely moving rats［J］.Exp Brain,Res,1989,(76):519.

　　［7］库宝善,王淑英,姚海燕.诱导睡眠器的实验研究［J］.医学研究通讯,1998,7(27):24.

　　［8］北京医这院基础部针麻原理研究组生理组编.中枢神经递质概论［M］.北京:出版社,1997:245.