IL-6在子宫内膜异位症患者血清及腹腔液中的变化

【摘要】  目的 检测子宫内膜异位症（EM） 患者与正常妇女血清及腹腔液中IL-6的水平, 探讨其与子宫内膜异位症发病的关系。方法 子宫内膜异位症患者52例作为研究组（选择的是子宫内膜异位症病人，非正常妇女），正常妇女45例作为对照组, 采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术 （Sandwich ELISA） 检测两组妇女血清及腹腔液中IL-6水平。结果 血清IL-6水平两组分别为: EM组207±76pg/ml,正常妇女组148±56pg/ml, 两组间比较差异有非常显著性（P<0.01） 。腹腔液IL-6水平两组分别为:EM组292±98pg/ml, 正常妇女组164±65pg/ml, 两组间比较差异亦有非常显著性（P<0.01） 。相关性分析发现: EMT组血清与腹腔液IL-6呈正相关（r=0.471,P=0.002）, 正常妇女组血清与腹腔液IL-6无明显相关性。结论 EMT患者血清与腹腔液IL-6水平较对照组均显著增高,IL-6可能是EM发生的关键因子之一。

【关键词】  子宫内膜异位症 IL-6（白介素－6） 血清 腹腔液

    【Abstract】  Objective  To investigate  the levels of （IL-6） in serum and peritonaeal fluid of to endometriosis （ EM） patients and healthy women and approach the relation of IL-6 and EM.Methods  Levels of IL-6 in serum and peritonaeal fluid in abdominal cavity fluid were determined detected by a solid quantitative sandwich enzyme immunoassay technique （ Sandwich（Sandwich ELISA） both in EM group and in control groupss, and. The  relationship of IL-6 levels in serum and in abdominal cavity peritonaeal fluid fluid were analyzed1Resultsanalyzed.Results  Serum concentrations of IL-6 were increased （P<0.01） in EM group （ 207±76） pg/ml than that of in control group s（148±56） pg/ml.Concentrations of MCP - 1 in peritonaealabdominal cavity fluid were increased（P<0.01） in EM group （292±98） pg/ml than that in controls control group （164±65） pg/ml 1ml. In EM group, nonparametric correlations analysis demonstrated that concentrations of serum IL-6 were positively correlated with those in peritonaealabdominal cavity fluid （r=0.471,P=0.002） , but such a correlation did not be found in controls.Conclusion  Serum levels of IL-6 in EM increase significantly and higher concentrations of MCP - 1 may be partly responsible for EM in a specialway specialway.

    【Key words】  Eendometriosis;IL-6;Serumserum;peritoneal fluid Abdominal cavity fluid

    子宫内膜异位症（EMT） 是妇产科常见病, 在育龄妇女中占3%～10%。在行输卵管结扎术的妇女中, 无症状的EMs 占1%～7%。原发性不孕妇女中EMs 占9%～50%。研究表明EMT 发病率有种族差异, 非洲妇女低于东亚妇女。许多研究者认为EMT的发生与免疫系统的改变有关, 细胞免疫和体液免疫的改变都与该病的密切相关。本文主要从免疫角度阐述EMs 的发生机制, IL-6作为一种特定的免疫物质在EMT发生中所起的作用日渐浮出水面。本文收集了EMT患者和无内分泌疾病的对照组妇女共97例的血清和腹腔液标本, 通过分别测定其IL-6水平来初步了解它和EMT的关系。

　　1  资料与方法

    1.1  诊断标准  子宫内膜异位症诊断标准以第7版高等学校妇产教材为诊断依据：具有活性的子宫内膜组织（腺体和间质）出现在子宫内膜以外部位时称子宫内膜异位症（endometriosis，EMT）。

    1.2  研究对象分组  EMT组52例［按美国生育协会（AFS） 修正标准分期均为Ⅰ、Ⅱ期患者］，均为2006年6月～2007年1月在广州市花都区人民妇产科就诊并经腹手术确诊的ENT患者,年龄35.6±9.1岁；对照组45例,系同期就诊的因子宫肌瘤而手术的患者, 排除内分泌疾病, 年龄36.9 ±10.1岁。两组研究对象年龄相比差异无显著性（P>0.05） 。

    1.3  方法  （1）标本采集:术者在开腹后首先观察、记录盆腔情况,然后应用无菌吸管及无菌注射器抽取两组研究对象肘静脉血及腹腔液各3ml。2000 r/min离心15min, 取上层血清置-70℃冰箱待测IL-6;（2）检测方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术（Sandwich  ELISA） 检测激素水平,IL-6试剂盒购自英国BIOSOURCE公司, 敏感度5pg/ml,批间变异系数7.4%, 批内变异系数3.6%;显色终止后用Awareness公司生产StatFax-2100 型自动生化分析仪于波长450nm或492nm处读取吸光值, 检测操作步骤均严格按照说明书要求进行, 质控显示良好。

    1.4  统计学处理  所得数据以±s表示,使用SPSS 11.0统计软件包进行独立样本t检验,Spearman相关性分析, 以P<0.05为差异有显著性。

　　2  结果

    2.1  EMT组与对照组血清及腹腔液IL-6水平比较  血清IL-6水平两组分别为: EM组207±76pg/ml, 正常妇女组148±56pg/ml, 两组间比较差异有非常显著性（P＝0.002） 。腹腔液IL-6水平两组分别为: EM组292±98pg/ml, 正常妇女组164±65pg/ml, 两组间比较差异亦有非常显著性（P< 0.01） 。EM组血清及腹腔液中IL-6水平均明显升高。两组间比较差异亦有非常显著性（P<0.01）。表1  EM组与对照组血清及腹腔液IL-6水平比较 注：与对照组比较，#P<0.01，＃＃P>0.01

    2.2  EMT组与对照组血清及腹腔液中IL-6水平的相关性  两组数据进行Spearman相关性分析发现, EMT组血清与腹腔液IL-6呈正相关（r=0.471,P=0.002） , 正常妇女组血清与腹腔液IL-6无明显相关性（r=0.197,P=0.272） 。EM组血清与腹腔液IL-6的相关性见图1。

    图1  EM组血清与腹腔液IL-6相关性

    3  讨论

    IL-6的生物学特征：IL-6是一种参与免疫应答调节、造血及炎症等多功能细胞因子。多种细胞在感染和损伤时均可产生IL-6,包括单核细胞、淋巴细胞或纤维细胞、内皮细胞等。IL-6 可以刺激B细胞活化、促进T 细胞分化、诱导急性期蛋白的合成、调节其他细胞因子的分泌, 同时也是各种人类细胞的生长调节剂。IL-6 对于增殖期的子宫内膜的生长无影响, 但是可以抑制分泌期内膜基质细胞的增殖。IL-6 对同一患者的在位内膜细胞和异位内膜细胞抑制性调节不同, 对异位内膜的基质细胞没有影响。

    近年来,免疫功能异常及腹腔液内环境的改变在EMT发病过程中的作用越来越受到研究者的关注。EM患者腹腔液中含有较高的促炎细胞因子, 趋化因子及炎细胞浸润, 其中巨噬细胞的数量和活性以及IL-6浓度和活性的增加很为明显［1］。IL-6对EMT的可能影响：血清中 IL-6 水平是随着月经周期波动的, 且与雌激素水平呈反比,在雌激素浓度较高的增殖期内膜降低, 而在雌激素水平较低的分泌期内膜水平是升高的,而腹腔液中IL-6 水平与EMT 严重程度亦密切相关［2］。在重度EMs 中IL-6 水平升高而IL-6 可溶性受体水平下降。因此, 异位内膜细胞可以抵抗IL-6所介导的生长抑制。EMT 患者异位内膜细胞分泌的IL-6 显著高于在位内膜细胞, 正常在位内膜细胞分泌的IL-6 水平最低。

    本研究证实IL-6在EMT患者循环血及腹腔液中均明显升高, 而EM患者血清与腹腔液中IL-6还存在正相关性。与最近的报道因EM而不孕的患者结果部分相似［3］,Pizzo报道IL-6在EM发病的早期升高最为明显而到病情严重时其水平反而并不很高［4］，报道支持这样一个推理（相关研究表明）: EM患者异位内膜的存活依赖IL-6的促血管生成作用, 而这可能又与EM患者高IL-6分泌的特异体质有关, 同时也说明EM是一种炎症免疫应答, IL-6 是其重要的参与物质［5］。IL-6与EM的明确关系使我们相信: IL-6有望成为EM诊断的新指标, 降低血清MCP - 1水平可能对EM的有效, 相关药物如MCP-1拮抗剂的研制有其可行性。对IL-6受体及其微调作用的研究是我们今后将要进行的工作。

【】
  1 Yih S, Katabuchi H, Araki M，et al. Expression of monocyte chem.Oattractam protein-1 in peritoneal endometriotic cells. Virchows Arch,2001,438:70-77.

2 Piva M, Horowitz GM, Sharpe-Timms KL. Interleukin-6 differentially stimulates haptoglobin production by peritoneal and endometriotic cells in vitro: a model for endometrial-peritoneal interaction inendometriosis. J Clin Endocrinol Metab,2001,86（6）:2553-2561.

3 Gmyrek GB, Sozanski R, Jerzak M，et al.Evaluation ofmonocyte chemo 2 tactic p rotein - I levels in peripheral blood of infertile women with endo2 metriosis.Eur J Obstet Gynecol Rep rod Biol, 2005,11:（Epub aheadof print）.

4 Pizzo A, Salmeri FM, Ardita FV,et al.Behaviour of cytokine levels in serum and peritoneal fluid ofwomen with endometriosis.Gynecol Obstet Invest,2002,54:82-87.

5 Inagaki J, Kondo A, Lopez LR, et al. Anti-laminin-1 autoantibodies,pregnancy loss and endometriosis. Clin Dev Immunol,2004,11（3-4）:261-266.