原发性肝癌患者血清p16和DAPK基因启动子甲基化的研究

【摘要】  目的 研究原发性肝癌患者血清p16和DAPK基因启动子甲基化的改变状况及其临床意义。方法 运用甲基化特异性PCR技术，检测64例PLC患者血清p16基因和DAPK基因启动子甲基化，并分析与临床病理资料的关系。结果 PLC患者血清p16基因和DAPK基因甲基化检出率分别为76.6％（49/64）和40.6％（26/64），而正常对照组和良性肝部疾病组血清未检出p16基因和DAPK基因甲基化；p16基因和DAPK基因甲基化检出率与HBsAg、分期及转移状态无明显关系，而与AFP有关联。结论 p16基因和DAPK基因启动子异常甲基化参与了PLC的发生过程，并可作为PLC早期辅助诊断的分子标志物之一。

【关键词】  原发性肝癌 p16基因 DAPK基因 血清 DNA甲基化

　　0  引言
   
　　p16基因是一个重要的肿瘤抑制基因[1]，参与细胞周期的调控，控制细胞生长和分化。死亡相关蛋白激酶（death?associated protein kinase,DAPK）基因是一种钙调蛋白调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是凋亡的正性调节因子之一[2，3], 现已发现在多种肿瘤组织存在p16和DAPK基因启动子的甲基化，提示这些基因的甲基化可能与肿瘤的发生发展有关。本文运用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测原发性肝癌（PLC）患者血清循环核酸中DAPK基因、p16基因甲基化的状况，并探讨检测血清DAPK基因、p16基因甲基化的临床意义。

　　1  资料与方法

　　1.1  研究对象  64例PLC患者均为住院病例，其中男性44例，女性20例，年龄38～82岁，中位年龄64岁。所有病例均有组织病和/或细胞学诊断依据。按1997年UICC标准分期，Ⅰ期5例，Ⅱ期23例，Ⅲ期21例，Ⅳ期15例(其中25例接受手术)。HBsAg阳性的36例，阴性为28例；AFP>400ug/L的30例，31μg/L】
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