蒿甲醚对BALB/c小鼠CT-26结直肠癌抑瘤作用
作者：伍治平 高成伟 王熙才 吴永贵 朱启顺 胡炜
【摘要】 ［目的］ 探讨蒿甲醚（Artemether）对BALB/c小鼠CT-26 结直肠癌的抑瘤作用。［方法］ BALB/c小鼠皮下接种CT-26 结直肠癌细胞（2×106）48只，雌雄各半；随机分为6组，每组8只，分别为低剂量（33.3mg/kg）、中剂量（50mg/kg）、高剂量（66.6mg/kg）和中剂量（50mg/kg）+铁剂(1.5mg/kg)组，阳性对照组为顺铂（5mg/kg），空白对照组为等体积生理盐水。除顺铂为腹腔注射外，其余组均为灌胃给药法。［结果］ 口服蒿甲醚低、中、高剂量和中剂量+铁剂对BALB/c小鼠CT-26结直肠癌的抑瘤率分别为：42.3%、51.4%、52.0%、53.5%。［结论］ 在一定剂量范围内，口服蒿甲醚对小鼠CT-26结直肠癌有明显的抑制作用；蒿甲醚与铁剂合用具有一定的协同作用。
Anti-tumor Effect of Artemether in CT-26 Colorectal Cancer Bearing BALB/c Mice
Abstract: ［Purpose］ To explore the anti-tumor effect of Artemether in CT-26 colorectal cancer bearing BALB/c mice. ［Methods］ Forty-eight BALB/c mice (24 male and 24 female) subcutaneous planted with CT-26 colorectal cancer cell (2×106) were randomly divided into 6 groups(8 mice in each): low dose group, 33.3mg/kg; middle dose group,50mg/kg; high dose group, 66.6mg/kg; Artemether 50mg/kg plus ferralia 1.5mg/kg; positive control group, DDP 5mg/kg; and blank control group, same volume of normal saline. All were administrated, excepted DDP intraperitoneally. ［Results］ Inhibitive rates of Artemether by oral at dosages of low, middle and high were 42.3%, 51.4% and 52.0%, respectively. ［Conclusion］ Artemether is provided with anti-tumor effect to CT-26 colorectal cancer bearing mice at certain range of dosage. Combination of ferralia with Artemether plays an synergisticly inhibitive role.
Key words: Artemether; BALB/c mice; colorectal cancer; CT-26 colorectal cancer cell line; ferralia; inhibitive effect
近年研究发现，青蒿素及其衍生物有明确的抗肿瘤作用，可选择性地杀伤肿瘤细胞而对正常组织细胞的毒性较小，与传统化疗药物不存在交叉耐药。Efferth等[1]选择55种癌细胞株研究青蒿素的衍生物青蒿琥酯的抗癌活性时发现，其对白血病细胞和结肠癌显示出最强的抗癌活性。但迄今有关蒿甲醚体内抗小鼠CT?鄄26结直肠癌的研究尚未见报道，为探讨其抗肿瘤作用机制，我们进行了蒿甲醚抗小鼠CT?鄄26结直肠癌的实验研究。
1 材料与方法
1.1 材 料
药物：蒿甲醚片(昆明制药集团股份有限公司，批号:05106702)；复方硫酸亚铁颗粒（河南福森药业有限公司，批号：050802）；顺铂注射液（江苏豪森药业股份有限公司，批号：050903）。
实验动物：BALB/c小鼠，6~8周龄，体重17g~20g（昆明医学院实验动物科，批准文号：SCXK滇P0005?鄄0008）。
瘤株：BALB/c小鼠CT?鄄26结直肠癌细胞株，购自美国ATCC公司，保存于液氮。
1.2 方 法
1.2.1 小鼠模型建立
复苏结肠癌细胞株CT?鄄26，用含10%标准小牛血清（院生物工程研究所 灏洋生物）的RPMI 1640（GIBCO）全培养基常规传代培养。将对数生长期的细胞调整为适宜浓度1×107个/ml，接种于小鼠右前肢皮下，每只小鼠接种0.2ml。
1.2.2 动物分组及给药
将48只结肠癌皮下接种小鼠随机分成6组：对照组（生理盐水每天0.4ml/20g），顺铂组(每天5mg/kg)、低剂量组（蒿甲醚片每天33.3mg/kg）、中剂量组（蒿甲醚片每天50.0mg/kg）、高剂量组（蒿甲醚片每天66.6mg/kg）、中剂量加铁剂组（蒿甲醚片50.0mg+硫酸亚铁1.5mg/kg）。均在接种5d后，顺铂采用腹腔注射5d后停药，其余采用灌胃给药法持续给药8d（见表1），停药24h处死动物。剥离肿瘤，称重，抑瘤率。肿瘤组织做病理。
抑瘤率=（1-给药组平均瘤重）/对照组平均瘤重×100%
1.3 数据分析及统计
用Microsoft Excel 各组的平均瘤重、体重，用SPSS11.0统计软件对各组瘤重进行单因素方差分析，判断差异有无显著性。
2 结 果
口服蒿甲醚低剂量、中剂量、高剂量和中剂量+铁剂对BALB/c小鼠CT?鄄26结直肠癌的抑瘤率分别为：42.3%、51.4%、52.0%、53.5%，见表2。
3 讨 论
研究发现，青蒿素及其衍生物的抗肿瘤机制与其抗疟机制有许多共同之处。目前认为青蒿素及其衍生物抗癌效应的始发机制，与肿瘤细胞铁代谢旺盛的特点有关[2]。所有增殖态的细胞都需要摄入铁，铁摄入越多，其增殖就愈快。 因此，肿瘤细胞将比正常细胞吸收更多的铁离子，在有转铁蛋白存在的情况下或给硫酸亚铁，青蒿素分子内的过氧化基团与亚铁原子起反应产生自由基或亲中间产物，攻击细胞膜或细胞内其他膜性结构，或直接氧化损伤蛋白质分子或生命大分子（这些蛋白质对肿瘤细胞的过度增殖起关键作用），导致细胞死亡。这样可选择性杀伤癌细胞而对正常细胞损伤较小[3]。
本研究也显示蒿甲醚与铁剂合用具有协同抑瘤作用,增加抑瘤率，其增加抑瘤率可能与上述的杀瘤机制有关。在一定剂量范围内，口服蒿甲醚对小鼠CT?鄄26结直肠癌有明显的抑制作用。我们认为，蒿甲醚在体内经转化代谢所产生的氧自由基可能是它的主要抗癌功效之一。口服药物往往作用时间长，经消化道作用吸收分解，再经肝脏转化后，产生出更多的活性自由基和相关代谢产物及其相应的酶类，对结直肠癌细胞生长的产生抑制作用。
在实验过程中我们发现，蒿甲醚组小鼠（除高剂量组尾部有少量出血点外）体态特征无明显变化，但是顺铂组小鼠体重明显减轻，普遍瘦弱，还有4例未能完成研究，表明蒿甲醚与顺铂相比，具有较小的毒副作用，同时抑瘤率顺铂较高。
综上所述， 在一定的剂量下范围内，蒿甲醚对小鼠CT?鄄26结直肠癌有明显的抑制作用，其抑瘤作用无明显的量—效关系；具有较小的毒副作用，与铁剂合用具有一定的协同作用，增加抑瘤率。
【】
[1] Efferth A, Dunstan H, Sauerbrey A, et al. The anti?鄄malarial artesunate is also active against cancer [J]. Int J Oncol, 2001, 18(4):767-771.
[2] 董海鹰, 宋维华. 青蒿素对体外培养的Hela细胞生长的影响[J]. 哈尔滨医科大学学报, 2002, 36 (6):423-427.
[3] 陈绍芳, 徐亦益, 刘祥麟, 等. 青蒿琥酯对小鼠HepS肝癌的抑瘤作用[J]. 肿瘤, 2004, 13(6):375-377.
