抑癌基因PTEN在宫颈癌变过程中的表达及意义

                 作者：舒宽勇，熊树华，王晨，肖仲清，李隆玉，于小红 

【摘要】  ［目的］ 探讨PTEN在宫颈癌变中的作用。［方法］ 应用免疫组织化学技术（SP法）检测抑癌基因PTEN在32例正常子宫颈上皮、158例宫颈上皮内瘤变及64例宫颈浸润癌组织中的表达。［结果］ 32例正常宫颈组织中，PTEN阳性表达率为93.8%，56例CINⅠ、102例CINⅡ和CINⅢ及64例宫颈浸润癌，其PTEN阳性表达率分别为75%、58.8%和40.6%。在从正常宫颈上皮到上皮内瘤变、宫颈癌的癌变过程中，其组织中PTEN的表达呈进行性降低（Ｐ<0.05）。［结论］ PTEN表达降低是宫颈癌变过程中的早期事件，也是宫颈组织恶变的信号。检测PTEN有助于了解宫颈癌变的生物学行为。

【关键词】  基因

    xpression of PTEN in Carcinogenesis Process of Cervical Cancer and its Significance

      Abstract: ［Purpose］ To explore the role of PTEN in carcinogenesis process of the cervical cancer. ［Methods］ The expression of PTEN in 32 cases with normal epithelium, 158 cases with cervical intraepithelial neoplasia(CIN) and 64 cases with cervical carcinomas was detected by immunohistochemical S-P technique with anti-PTEN antibody. ［Results］ The positive rate of PTEN expression in 32 cases with normal cervical epithelium, 56 cases with CINⅠ, 102 cases with CINⅡ and Ⅲ, and 64 cases with cervical carcinoma was 93.8%, 75.0%, 58.8% and 40.6%, respectively. PTEN expression reduced progressively in carcinogenesis process from normal cervical epithelium to cervical intraepithelial neoplasia to cervical carcinoma. ［Conclusion］ Reduced expression of PTEN is an early event in cervical carcinogenesis, and maybe the signal of cervical malignant change. The detection of PTEN expression is helpful for understanding the biological behavior of cervical carcinogenesis.

    Key words: PTEN; genes; cervical intraepithelial neoplasia; cervical neoplasms

    PTEN（phosphatase and tensin homology deletion on chromosome ten）基因也称MMAC1基因，是近年来发现的一种肿瘤抑制基因，是迄今发现的第一个具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因，在维持细胞的增殖、分裂、迁移和凋亡等方面具有重要作用。本实验应用免疫组织化学方法，探讨宫颈癌变过程中PTEN的表达及其意义。

    1   材料与方法

    1.1   研究对象

    选择2005年2月~2006年6月在我院肿瘤科住院手术的宫颈鳞状上皮内瘤变（cervical intraepithelial neolasia，CIN）Ⅰ~Ⅲ级158例，术前未经放疗和/或化疗的FIGO分期Ⅰb~Ⅱa期宫颈浸润癌64例作为研究组。宫颈鳞状上皮内瘤变患者中属CINⅠ 56例，CINⅡ~Ⅲ 102例。患者年龄25岁~56岁，平均37.8岁。产次1~5次，平均2.58次。另选取30例经阴道镜检查确定无病变的正常宫颈组织作为对照。

    1.2   方   法

    所有标本均用10%中性福尔马林液固定，石蜡包埋，制成5μm切片，采用链霉菌抗生物素蛋白—过氧化氢连接（SP）免疫组织化学方法，微波修复抗原，鼠抗人单克隆抗体及SP免疫组化试剂盒均购自福州迈新生物技术公司。实验用PBS代替一抗作为阴性对照。

    1.3   判断标准

    细胞浆内出现淡黄色至棕黄色颗粒者为PTEN阳性细胞。根据染色强度和阳性细胞数量而将阳性表达分为3级：（1）弱阳性（+），即阳性细胞比例<10%或显色颗粒呈现为淡黄色；（2）强阳性（+++），即阳性细胞比例>60%，多数细胞胞浆呈棕黄色；（3）中度阳性（++），即阳性细胞比例及显色强度介于弱阳性与强阳性之间；（4）阴性即染色强度与背景无明显差别。

    1.4   统计学方法

    采用χ2检验作统计学处理。

    2   结   果

    PTEN蛋白定位于细胞浆，阳性细胞呈弥漫性或局限性分布。PTEN蛋白在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中的表达情况见表1。PTEN蛋白表达在宫颈癌变过程中呈递减性改变，即正常宫颈组织阳性表达率高于CINⅠ（P＜0.05），CINⅠ的表达率高于CINⅡ/Ⅲ（P＜0.05），而后者又高于宫颈癌组织（P＜0.05）。

    3   讨   论

    PTEN是1997年发现的一种新的抑癌基因，定位于人类染色体10q23.3上，含9个外显子。其编码蛋白质即蛋白酪氨酸磷酸酶，定位于细胞浆，具有磷酸酶活性，在细胞生长、发育、细胞信号传导和细胞凋亡等过程中起着重要作用[1，2]。当PTEN基因缺失、突变或表达失常时，就失去了对细胞生长、粘连、转移和浸润的调控，导致多种肿瘤的发生。我们应用免疫组织化学SP法检测了正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变组织和宫颈癌组织中PTEN蛋白的表达，发现正常子宫颈组织的阳性表达率达93.8%，轻度宫颈上皮内瘤变组织的阳性表达率为75%，而中、重度宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织的阳性表达率则分别降至58.8%和40.6%，随病变程度的加重而呈现出递减的趋势，表明PTEN表达降低与宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的发生、发展有关，是宫颈癌发生、发展的早期事件，可能是宫颈组织恶变的一个信号。

    宫颈癌的发生与发展是逐步的、阶段性的过程。由正常宫颈发展至宫颈癌的进程中，必然经过一系列前期病变——宫颈上皮内瘤变。研究表明[3~5]，CINⅠ、Ⅱ是一组不稳定的边界病变，近80%的CINⅠ保持稳定或消退，而CINⅡ、Ⅲ的逆转率则逐渐降低，进展率逐渐增高。该趋势与我们观察到的PTEN阴性表达率基本一致，提示PTEN的表达与宫颈上皮内瘤变的自然结局有关。PTEN检测可能作为判断宫颈上皮内瘤变预后的指标之一，值得进一步研究。

    报道[6，7]，PTEN蛋白的表达与宫颈癌的细胞病理分级、临床分期、淋巴结转移有关，即随着细胞分化程度的降低，临床分期的增加和肿瘤的转移，其表达降低。王祥珍等[8]研究表明，PTEN的表达情况甚至与宫颈癌的3年和5年生存率有关。因此，PTEN蛋白的检测不仅有助于了解宫颈癌发生、发展的分子生物学机制，还可能应用于临床判断宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的预后。

【文献】
  [1] Tamura M, Gu J, Kakino T, et al. Tumor suppressor PTEN inhibition of cell invasion, migration, and growth:differential involvement of focal adhension kinase and p130Cas[J]. Cancer Res, 1999, 59(2):442-449.

[2] Gu J,Tamura M, Yamada KM. Tumor suppressor PTEN inhibits integrin and growth factor-medated mitogen-activated protein (MAP) kinase signaling pathways[J]. J Cell Biol, 1998, 143(5):1375-1383.

[3] Bos AB, van Ballegooijen M, van Oortmarssen GJ, et al. Non-progression of cervical intraepithelial neoplasia estimated from population screening data[J]. Br J Cancer, 1997, 75(1):124-130.

[4] Cox JT. The development of cervical cancer and its precursors: what is the role of human papillomavirus infection?[J]. Curr Opin Obstet Gynecol, 2006,18 (Suppl 1):s5-s13.

[5] Ventolini G, Samlowski R. Natural history of cervical intraepithelial neoplasia I in primigravida[J]. J Low Genit Tract Dis, 2003, 7(1):29-31.

[6] Hirama Y,Sawada S,Nagata K,et al.Mutation of PTEN gene in advanced cervical cancer correlated with tumor progression and poor outcome after radiotherapy[J]. Int J Oncol, 2001, 18(2):493-498.

[7] 孔德玲, 王桂芳. 抑癌基因PTEN在宫颈癌中的表达及意义[J]. 中西医结合杂志, 2005,14（17）:2240-2241.

[8] 王祥珍, 李英勇, 曹军. 抑癌基因PTEN在宫颈癌组织中的表达及其意义[J]. 宁夏医学杂志, 2003, 25（10）:579-581.