反复流产和不孕症与支原体和免疫因素的关系
【关键词】 抗精子抗体
Association of mycoplasma and immune factors with recurrent spontaneous abortion and sterility
【Abstract】 AIM: To elucidate the association of recurrent spontaneous abortion (RSA) with mycoplasma infection and anticardiolipin antibodies (ACA) , and the relationship of sterility to mycoplasma infection and antisperm antibodies (ASA). METHODS: Ureaplasma urealyticum (UU) and mycoplasma hominis (MH) from the cervical secretions were detected respectively by culture method in 338 women who had the history of recurrent spontaneous abortion three times or more and 248 sterile women, which were assigned as monitoring group, and 105 normal women, who did not have any miscarriage and delivered a live child as control group. Enzymelinked immunoassay (ELISA) was carried out to detect both isotypes of ACA and ASA , immunoglobulin M (IgM) and immunoglobulin G (IgG). The positivity rate of each index between 2 groups was compared. RESULTS: The positivity rates of UU and MH in monitoring group was significantly higher than that in control group (P<0.05). The positivity rate of ACAIgM and ASAIgM in the monitoring group was significantly higher than that in the control group (P<0.05). For RSA patients, the positivity rate of ACAIgM, ACAIgG andACAIgM+ACAIgG in UU or MH positive group was significantly higher than that in UU and MH in negative group (P<0.05). For sterile women, the positivity rate of ASAIgM, ASAIgG in UU or MH positive group was significantly higher than that UU and MH in negative group (P<0.05). CONCLUSION: It is suggested that UU or MH infection is closely correlated with RSA and infertility; RSA is correlated with ACA; sterility is correlated with ASA; both ACA and ASA are correlated with UU or MH infection.
【Keywords】 abortion, spontaneous (RSA) ; infertility, female; ureaplasma urealyticum(UU); mycoplasma hominis(MH) ; antibodies, anticardiolipin (ACA) ; antisperm antibodies (ASA)
【摘要】 目的： 探讨反复自发性流产（RSA）与支原体感染和抗心磷脂抗体（ACA）之间的关系及不孕症与支原体感染和抗精子抗体（ASA）之间的关系. 方法： 采用培养法分别对338例RSA患者（观察组）和248例不孕症患者（观察组）进行解脲支原体（UU）和人型支原体（MH）检测；采用ELISA法分别检测血清ACAIgM和ACAIgG（RSA观察组）以及ASAIgM和ASAIgG（不孕症观察组）.同时分别选择105例正常妇女作为对照组. 比较观察组和对照组各项指标阳性检出率. 结果： RSA患者和不孕症患者支原体感染阳性率均高于对照组(P<0.05)；RSA患者血清ACAIgM阳性检出率明显高于对照组(P<0.05)；不孕症观察组ASAIgM阳性检出率均显著高于对照组(P<0.05)；RSA患者中，支原体感染阳性组ACAIgM, ACAIgG以及ACAIgM+ACAIgG阳性率均明显高于支原体感染阴性组(P<0.05)；不孕症患者中，支原体感染阳性组ASAIgM和ASAIgGA阳性率均明显高于支原体感染阴性组（P<0.05）. 结论： 支原体感染是RSA和不孕症的原因之一；自身免疫性抗体与RSA和不孕症有一定关系；ACA和ASA均与支原体感染有相关性.
【关键词】 流产，自发性；不孕，女（雌）性；尿素支原体，尿素分解；支原体人型；抗体，抗心脂；抗精子抗体
0引言
近年来认为支原体感染和免疫因素可能是妊娠早期反复自发性流产（RSA）的原因之一.解脲支原体（UU）和人型支原体（MH）是引起生殖道感染最常见的两种支原体，虽然受支原体感染的患者症状有时不易察觉，但是支原体感染在女性不仅可引起RSA，而且能引起不孕.抗心磷脂抗体（ACA）和抗精子抗体（ASA）是最常见的自身免疫性抗体，可能与反复自发性流产和不孕症有关［1,2］.为阐明RSA和不孕症与支原体感染和自身免疫性抗体之间的关系，同时为临床诊断和提供可靠依据，我们对338例RSA患者和248例不孕症患者进行了相关检查.
1对象和方法
1.1对象200109/200301，在我院遗传优生门诊和妇产科门诊就诊的反复自发性流产患者338例，不孕症患者248例.年龄为22~41（平均28.2±0.5）岁.另分别选择105例已分娩一健康孩子的妇女作正常对照.
1.2方法
1.2.1支原体检测观察组和对照组常规暴露宫颈，无菌棉球拭净宫颈阴道分泌物，用无菌棉拭子插入宫颈管内2 cm，停留约15 s，旋转一周后取出，分别接种于UU，MH液体培养基中.将液体培养基置37℃恒温箱中孵育24~48 h观察结果，培养基由黄色变成红色为支原体阳性.培养基由第四军医大学组织胚胎学教研室提供.
1.2.2ACA和ASA检测抽取各组静脉血2 mL，分离血清后置-20℃待检.采用ELISA法检测ACA和ASA. ACAIgM和ACAIgG以及ASAIgM和ASAIgG试剂盒由华美生物工程公司提供.实验程序及结果判定均严格按照说明书由专人操作完成.
统计学处理：采用χ2检验.
2结果
2.1RSA患者和不孕症患者UU, MH检测结果RSA患者宫颈分泌物中UU，MH的阳性检出率均高于对照组，两者相比较，有显著性差异（P<0.05). UU+MH阳性检出率与对照组相比，无显著性差异.不孕症妇女UU, MH阳性检出率均高于对照组，两者相比，有显著性差异(P<0.01);UU+MH阳性检出率与对照组相比无显著性差异（Tab 1）.
表1RSA患者和不孕症患者支原体检测结果 (略)
2.2RSA患者ACA检测结果RSA患者ACAIgM阳性检出率明显高于对照组,P<0.01; ACAIgG和ACAIgM+ACAIgG阳性检出率与对照组相比均没有显著性差异（Tab 2）.
表2RSA患者 ACA检测结果 (略)
2.3RSA患者支原体感染与ACA之间的关系RSA患者支原体阳性组ACAIgM, ACAIgG和ACAIgM+ACAIgG阳性检出率明显高于支原体阴性组,两者相比较，有显著性差异（P<0.05, Tab 3）.
表3RSA患者支原体感染与抗心磷脂抗体之间的关系 (略)
2.4不孕症患者ASA检测结果不孕症患者ASAIgM阳性检出率明显高于对照组,两者相比较，差异非常显著（P<0.01）；ASAIgG和ASAIgM+ASAIgG阳性检出率与对照组相比，均没有显著性差异（Tab 4）.
表4不孕症患者ASA检测结果 (略)
2.5不孕症患者支原体感染与ASA之间的关系不孕症患者支原体阳性组ASAIgM, ASAIgG阳性检出率明显高于支原体阴性组，两者相比较，差异非常显著（P<0.01, Tab 5）.
3讨论
3.1RSA与UU, MH以及ACA的关系UU, MH是生殖道感染的常见病原体，因为可以通过性生活传播，近年来不但有增高趋势，而且低龄化［3］. 本研究结果表明，RSA患者UU和MH的阳性检出率（17.2%, 12.7%）均高于对照组，提示宫内感染是流产的直接原因，应引起高度重视.因为UU和MH均有极强的吸附能力，既可以寄生于女性上下生殖道，亦可吸附在精子表面并随精子进入女性体内，可引起炎症反应及炎性细胞浸润，产生大量的肿瘤坏死因子α（TNFα）和白细胞介素6（IL6）以及一氧化氮（NO），抑制蜕膜血管的形成，造成胚胎死亡［4,5］. ACA是一种自身免疫性抗体，可与内皮细胞、血小板膜上一种或多种带负电荷的磷脂发生反应，引起血小板聚集形成血栓，或与血管内皮磷脂部分相结合，损伤血管内皮，导致局部血管内血栓形成，使胚胎血供受阻，影响胚胎发育，造成不良妊娠后果流产［6］. 本研究结果显示，妊娠早期RSA患者ACA IgM阳性率（21.0%）明显高于对照组（8.6%）, 说明检测ACA对妊娠早期RSA患者有意义. 在RSA患者中，支原体阳性组ACAIgM, ACAIgG以及ACAIgM+ACAIgG阳性率均明显高于对照组，两者有非常显著性差异.说明ACA与支原体感染有关. 这可能是由于支原体感染后，破坏生殖道黏膜环境刺激机体产生自身免疫性抗体.
表5不孕症患者支原体感染与ASA检测结果 (略)
3.2不孕症与UU, MH以及ASA的关系女性感染支原体可导致生殖道炎症，使黏膜细胞坏死，输卵管纤毛运动停滞，引起不孕，而女性宫腔内的支原体可吸附于精子头部和体部，影响精子的运动机能，干扰精子和卵子的接触，影响受精.当生殖道黏膜损伤、月经期及子宫内膜炎时，可导致女性产生ASA. ASA是机体产生的与精子表面抗原特异性结合的抗体，是影响女性不孕的重要原因之一. 它抑制精子穿透宫颈黏液，干扰精子获能、顶体反应，减少精子存活率而影响受精.本研究中，不孕症患者ASA阳性率（28.6%）均高于对照组（10.5%），两者相比，有显著性差异（P<0.01）.研究结果提示免疫性因素在不孕中的作用［7］. 在引起ASA产生的诸多原因中，支原体感染是重要的原因之一. 本文中，不孕症患者中支原体阳性者，其ASAIgM, ASAIgG 阳性率均显著高于支原体阴性患者（P<0.05），说明支原体感染与ASA有关.
总之，对RSA患者和不孕症患者，应常规检查UU, MH. 由于UU, MH存在差异性导致对某些抗生素的敏感性不同，所以弄清患者是哪种支原体感染，对支原体的防治有重要意义. 支原体感染属于性传播性疾病，一旦发现患者支原体检查阳性，不仅应对患者进行积极，同时对其配偶也应治疗.对RSA患者和不孕症患者应分别常规检测ACA和ASA；对于ACA或ASA阳性患者，进行中西医结合治疗，可取得显著效果［8,9］.
【】
［1］ Rai RS.Antiphospholipid syndrome and recurrent miscarriage ［J］. J Postgrad Med, 2002; 48（1）:3-4.
［2］ Backos M, Rai R, Regan L. Antiphospholipid antibodies and infertility ［J］. Hum Fertil（Camb）, 2002;5（1）：30-34.
［3］ Uukula A, Kohl PK. Genital mycoplasmas，including Mycoplasma genitalium，as sexually transmitted agents ［J］. Int J STD AIDS, 2002；13（2）：79-85.
［4］ Razin S， Yogev D， Naot Y. Molecular biology and pathogenicty of mycoplasma ［J］. Microbiol Mol Bio Rev, 1998；62（4）：1094-1098.
［5］Crous DT， English BK， Livingston L. Gynetial mycoplasmas stimulate tumor necrosis factoralpha and inducibile nitric oxide synthase production from a murine macrophage cell line ［J］. Pediatr Res， 1998；44（5）：785-790.
［6］Keswani SC， Chauhan N. Antiphospholipid syndrome ［J］. J R Soc Med， 2002；95（7）：336-342.
［7］Kutteh WH. Autoimmune factors in assisted reproduction ［J］. Minerva Ginecol， 2002；54（3）：217-224.
［8］Shu J， Miao P， Wang RJ. Clinical observation on effect of Chinese herbal medicine plus chorionic gonadotropin and progesterone in treating anticardiolipin antibodypositive early recurrent spontaneous abortion ［J］. Zhongguo Zhongxiyi Jiehe Zazhi (Chin J Integ Med)，2002；22（6）：414-416.
［9］Gera E, Amit A, Lerner GL et al. Prednisone and aspirin improve pregnancy rate in patients with reproductive failure and autoimmune antibodies: A prospective study ［J］. Am J Reprod Immunol, 2000;43(1):36-40.
