儿童末梢血中5种元素FAAS法测定
【关键词】 儿童末梢血中5种元素
目前，对于血中钙、镁、铜、铁、锌5种元素的测定，普遍采用的是抽静脉血并以火焰原子吸收光谱法(FAAS)测定。由于抽取静脉血不易被家长和儿童接受，为此，采用自动稳流脉冲进样技术，既在原子吸收光谱仪上连接一自动稳流脉冲进样器，以微量进样法代替传统连续进样法，火焰原子吸收光谱法(FAAS)测定儿童末梢血中钙、镁、铜、铁、锌5种元素，检测溶液由2 ml减少到0?2?ml，所需分析样品只需20?μl。该分析方法简便、快速，结果准确。现报告如下。
1 材料与方法
1?1 仪器与材料
WFX-110型原子吸收分光光度计(北京瑞利分析仪器公司)；WN-201型稳流脉冲微量进样器(北京瀚时制作所)；检测专用试剂(北京瀚时制作所)；硝酸(优级纯)。所需玻璃仪器均在10%HNO3浸泡24?h以上，以去离子水冲洗干净，晾干备用。
1?2 样品采集
经过消毒后，取儿童无名指指血20?μl加入装有专用检测试剂的2?ml塑料离心管中，盖上盖立即摇匀，待测。常温条件下，待测样品不需要放入冰箱保存；高温天气条件下，需隔天检测的样品，应放入冰箱冷藏保存。
1?3 仪器工作条件
灯电流(mA)：钙为3?0，镁为10?0，铜为4?0，铁为7?0，锌为4?0。分析方式均为峰高法，读数时间均为7?S，钙、镁燃气流速1?2?L/min，铜、铁、锌燃气流速1?0?L/min，助燃气流速均为5?9?L/min。
1?4 标准曲线
钙、镁、铜、铁、锌标准溶液(国家环保总局标准样品研究所)。制作标准系列时钙、镁、铁以1% HCl做为介质稀释，铜、锌以1%HNO3作为介质稀释。5种元素的检测值均在线性范围内，钙、镁、铜、铁、锌相关系数分别为：r=0?999?7；r=0?999?6；r=0?999?9；r=0?999?4；r=0?999?9。
1?5 脉冲进样方法
将WN-201型微量进样器连接到原子吸收光谱仪上，按常规火焰原子吸收法操作常规进行操作，延持时间为0，读数时间设为7?S，读数方式设定为“峰高”，将微量进样器上取样管插入到待测溶液中，按下微量进样器上的吸入键，吸到规定体积后，将取样管插入到微量进样器上的进样管口后，按下测定键，随即读数开始，得到被测样品浓度。
1?6 结果
按下式计算5种元素的浓度：C=(测定值-空白值)×V1V2C：被测定样品中元素浓度(mg/L)；V1：被测定用样品总体积(ml);V2：被测定样品体积(ml)。
2 结 果
2?1 准确度与精密度
2?1?1 加标回收实验
取血样分别加入钙、镁、铁300?μg/L铜、锌100?μg/L标准溶液进行测定，钙、镁、铜、铁、锌回收率分别为104?12%～109?03%，98?41%～101?2%,99?57%～106?79%,98?56%～101?94,100?12%～108?75%。
2?1?2 标准样品测定
对国家环保总局标准样品研究所提供的标准水样(GSBZ50019～GSBZ50020)及疾病预防控制中心环境卫生监测所提供的牛血清标准物质(GBW09131)进行测定，标准水样测定结果平均值：钙为2?41?mg/L，镁为0?107?mg/L,铜为19?48?μg/L,铁为1?98?mg/L,锌为8?7?μg/L，标准样给定值：钙为(2?52±0?14)mg/L,镁为(0?112±0?007)mg/L、铜为(21?3±2?9)μg/L、铁为(1?99±0?07)mg/L，锌为(9?94±1?76)μg/L。牛血清标准样测定结果平均值：钙为99?76?mg/L，镁为19?7?mg/L，铜为0?73?mg/L，铁为1?77?mg/L，锌为0?79?mg/L。牛血清标准样给定参考值：钙为(94±16)mg/L，镁为(20?6±1?2)mg/L，铜为(0?66±0?08)mg/L，铁为(1?57±0?22)mg/L，锌为(0?71±0?10)mg/L。
2?1?3 变异系数(CV)
随机抽取5份血样混匀，按分析方法对每一种元素均进行5次测定。每一种元素的变异系数，钙、镁、铜、铁、锌变异系数(CV)分别为2?37%，1?53% 1?17%，2?83%，2?57%。
2?2 采血量试验
在相同试验条件下，进行最适宜采血量试验，取20，40，60，80?μl血分别测定，每种元素测定5次，计算变异系数。从试验结果可以看出，采血量从20～80?μl均可满足分析要求，在实际工作中考虑到儿童和家长的接受能力，选用20?μl做为末梢血测定的采血量，见表1。表1采血量试验结果采血量(略)
2?3 方法比较
分别选用FAAS连续进样法与FAAS自动稳流脉冲进样法对3份静脉血进行测定并进行对比分析。对比结果表明，2种方法差异无统计学意义(Ca、Mg、Cu、Fe、Zn的Ｐ>0?5,F值分别为0?002，0?022，0?075，0?005，0?310)，见表2。表2 2种进样法测定静脉血结果对比(略)
2?4 样品保存时间
取6份血样于当天测定后，在冰箱冷藏室分别存放1,3,5,7,9?d后再对其进行测定，将测定结果进行对比分析，差异无统计学意义(P>0?5)。测定值范围：Ca为(102?78～103?98)mg/L,Mg为(61?30～61?81)mg/L、Cu为(1?09～1?17)mg/L，Fe为(842?74～843?79)mg/L,Zn为(10?87～10?95)mg/L。
2?5 实际应用
应用本法对276名3～12岁儿童进行末梢血中Ca、Mg、Cu、Fe、Zn测定。测定值范围Ca为(53?04～164?17)，Mg为(34?17～85?14)，Cu为(0?46～4?75)，Fe为(487?05～986?77)，Zn为(4?95～18?88)mg/L。
3 小结
儿童微量末梢血中Ca、Cu、Zn元素的检测，大多采用的是石墨原子吸收法和电感偶合等离子发射光谱(ICP-AES)法测定〔1-3〕，2种方法所用仪器均较火焰原子吸收法所用仪器昂贵。应用自动稳流脉冲进样技术，以火焰原子吸收分析法(FAAS)测定儿童末梢血中Ca、Mg、Cu、Fe、Zn 5种元素，只需在原子吸收分光度计上连接一个微量进样器即可满足分析要求，并将传统的连续进样变为稳流脉冲进样，所需检测溶液由2毫升减少到0?2?ml，方法简单，省时快速，结果准确。应用该方法对276名3～12岁儿童进行了儿童末梢血中Ca、Mg、Cu、Fe、Zn 5种元素的检测，收到了满意效果。由于所需样品量只需20?μl，这种方法在开展儿童营养与健康专题调查工作中，微量采血方法受到广大儿童家长的欢迎，同时也为基层单位开展营养调查与疾病监测提供简便易行的方法。
【参考】
〔1〕Chew L T,Bradley DA,Mohd AY,et al.Zinc,lead and copper in human teeth measured by induced coupled arpon plasma atlomic emission spectroscopy(ICP-AES)［J］.Appl Radita Isot,2000,53(45):633-638.
〔2〕朱启星，沈彤，李菁，等.石墨炉原子吸收光谱法测定儿童末梢血血铅含量［J］.中华预防医学杂志，2003，37(2):128-130.
〔3〕朱中平，沈彤，张海燕，等.儿童微量末梢血中钙、锌、铜ICP-AES同时测定［J］，中国公共卫生，2006,22(5):632-633.
