蛇床子素对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用

【摘要】  目的  本文研究天然香豆素化合物蛇床子素对多种瘤谱的抗肿瘤活性；并通过对胸腺、脾等多项指标综合考察蛇床子素的高抑瘤活性和低毒性特征。方法  选择小鼠宫颈癌（U14）、肉瘤（S180）、肝癌（H22 ）3种瘤株分别接种于昆明种小鼠，给予灌服蛇床子素。结果  3种瘤谱使用蛇床子素均有明显的抑瘤效果，最佳抑瘤率分别为U14  60.0％、 S180  68.2％，H22  62.1％，并且蛇床子素对小鼠的肝、脾指数和胸腺指数几乎无影响；而阳性对照药顺铂组对小鼠的肝、脾指数、胸腺指数有着明显的损伤。结论  蛇床子素有可能研制成为一种低毒、高效的抗肿瘤新药。
   
    【关键词】  蛇床子素；宫颈癌U14；肉瘤S180；肝癌H22；抗肿瘤
    
        
    【Abstract】  Objective  This paper carries on anti-tumor activities research of the natural coumarin compound osthole to many tumors; and overall tested high-activity and low toxicity traits of osthole by the items of thymus gland，spleen，etc.  Methods  The mice cervical cancer （U14），sarcoma （S180） and liver cancer （H22） were selected and implanted in Kun Ming mice，and osthole was administered by P.O. way.  Results  Osthole has obvious anti-tumor activities to the three tumors，inhibitory rates were U14 60.0％，S180 68.2％，H22 62.1％，respectively，and osthole has hardly any influence to the liver，spleen index and thymus index; Nevertheless，the positive control drug cis-platinum has obvious damage to liver，spleen index and thymus index.  Conclusion  Osthole may be made into an anti-tumor new drug with high-activity and lower toxicity.
   
    【Key words】  osthole; cervical cancer U14; sarcoma S180; liver cancer H22; anti-tumor
   
       蛇床子素（osthole）是从伞形科植物蛇床子Cnidium monnieri Cuss 的干燥成熟果实［1］中提取精制的一种天然香豆素类成分。化学名为7－甲氧基－8－异戊烯基香豆素。在蛇床子总香豆素（TCCM）中蛇床子素含量最高，约占TCCM的60％［2］。近年来报道表明，蛇床子素能不同程度地抑制肺腺癌和肺鳞癌的生长［3］，蛇床子水提液能较明显地抑制昆明种小鼠S180肉瘤的生长［4］，Gawron等研究了一些香豆素类对癌细胞（Hela-S3）生长的抑制作用［5］等。为进一步考察蛇床子素对多种瘤谱的抑瘤活性，笔者进行了蛇床子素对小鼠体内3种瘤株抑瘤活性的研究和对肝、脾、胸腺等器官损伤情况的考察，观察其给药剂量下对机体带来的影响和可能产生的毒副作用，以揭示其在临床肿瘤中潜在的应用前景。
   
    1  材料与方法
   
    1．1  材料
   
    1.1.1  动物与分组  所用实验动物为昆明种小鼠，购于医学院实验动物研究所，动物许可证号为SCXK京2004－0001；也购于中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心，动物许可证号为SCXK－（军）2002－001。雌雄各半，体重均为20～22 g，随机分组，U14、 S180每组12只，H22每组15只。实验设空白对照组、阳性对照药组（环磷酰胺或顺铂）和蛇床子素0.84～3.30mg/kg 剂量组。
   
    1.1.2  药物与肿瘤  蛇床子素由本所药物室从中药蛇床子中提取分离的，经波谱鉴定确证了结构，HPLC检测纯度为99.6％。小鼠宫颈癌U14、肉瘤S180、肝癌H223种瘤株由天津医药科学研究所提供。
   
    1.1.3  主要仪器  光学显微镜（OLYMPUS、日本），精密天平（梅特勒－托利多集团、上海）。
   
    1. 2  方法  见［6～8］
   
    1.2.1  接种方法  取健康昆明种小鼠195只，体重为20～22g，雌雄各半，在无菌条件下，用生长6～7天的传代腹水癌小鼠数只，脱臼处死后酒精消毒腹部，取出生长较好的腹水癌按1：2的比例稀释，接种在小鼠的右上肢腋下，每只接种0.2 ml［6］。将接种液稀释后按白细胞计数方法计数［7，8］。U14计数为（3.2～5.7）×107个 /ml，S180计数为（3.7～6.0）×107个 /ml，H22计数为（4.1～6.8）×107  个/ml。
   
    1.2.2  给药剂量与方法  空白对照组每只ip给生理盐水0.3ml/d，U14阳性对照组环磷酰胺剂量为30mg/kg，每只ip给药0.3ml/d，连续10天给药，蛇床子素3个剂量组为0.84mg/kg、1.67mg/kg、3.30mg/kg，po 给药每只0.3 ml/d，连续给药10天；S180、H22阳性对照组顺铂剂量为4mg/kg，每间隔1天每只ip给药0.2ml/d，给药3次，蛇床子素3个剂量组为1.10mg/kg、1.67mg/kg、2.50mg/kg，每只po给药0.3ml/d，连续给药10天。
   
    1.2.3  观察指标  给药后第11天称体重脱臼处死小鼠，取出肿瘤、肝、脾及胸腺称重，抑瘤率、脾指数和胸腺指数，统计体重增长和肝重。
   
    抑瘤率％＝（1－实验组平均瘤重/对照组平均瘤重）×100%
   
    1.3  统计学方法  数据以“x±s”表示，组间比较采用t检验。
   
    2  结果
   
    2.1  宫颈癌U14  蛇床子素在剂量为0.84～3.30 mg/kg之间对U14荷瘤鼠有抑瘤效果，小剂量组0.84 mg/kg效果最佳，抑瘤率为60.0%与空白对照组差异有显著性（P<0.01），详见表1。

表1  蛇床子素对U14肿瘤的抑瘤率及对小鼠体重的影响  （x±s）
Table 1  Inhibitory rate of osthole on U14 sarcoma & influence on body weight of mice

Notes： Compared with control group，*P<0.01