一氧化氮对不同妊娠期子宫平滑肌的作用

关键词： 一氧化氮 宫缩 妊娠 

　　NO是80年代发现的一种血管内皮衍生舒张因子(endothelium-derived relaxing factor，EDRF)，由左旋精氨酸(L-arginine)与O2在一氧化氮合酶(niric oxide synthase，NOS)作用下生成，对血管平滑肌有重要调节作用，从而影响血管张力、血流及血压[1]。目前认为，NO与子宫平滑肌活动密切相关，尤其对妊娠子宫，NO水平的变化通过影响环鸟苷酸（cGMP）作用于子宫平滑肌，从而影响宫缩。
　　 子宫内的NOS活性
　　NOS是NO合成的限速酶，其活性与NO水平直接相关。NOS包括诱导型NOS（iNOS）、内皮型NOS（eNOS）、神经元型NOS（nNOS）3种异构体。免疫组化染色定位已证实许多受孕动物及人的子宫肌层、宫颈、胎盘组织存在不同NOS活性，利用RT-PCR技术进一步对NOS的不同异构类型进行了分析。孕鼠子宫内NOS活性表现为：子宫平滑肌层主要为iNOS，其次为eNOS，同时孕中期子宫肌层NOS活性最高，以后开始下降，至足月临产前iNOS下降80％，eNOS下降50％；宫颈组织存在NOS的3种异构体，孕期以iNOS为主，全孕期iNOS稳定，且较肌层iNOS活性低，临产前迅速增加达高峰，产后逐渐下降，eNOS和nNOS活性较iNOS低，且整个孕期及分娩前后变化不明显，这种不同孕期NOS活性的差异与子宫活动即宫缩发动和宫颈容受有关[2～4]。孕妇子宫与胎盘组织NOS存在着差异，其中绒毛NOS活性高于子宫肌层，而胎盘组织NOS活性以胎盘绒毛干及其分支最高，绒毛板次之，胎盘基底部NOS活性最低，且绒毛基及绒毛上皮中为iNOS活性，蜕膜组织为eNOS活性[5,6]。同时从不同孕期比较，孕妇孕晚期子宫肌层和蜕膜组织NOS活性较孕中期分别下降60％、50％，分娩期其NOS活性更低，孕鼠和孕兔的动物实验也支持这一观点。说明不同孕期子宫组织及胎盘组织NOS活性存在不同差异。因上述研究均为离体条件下实验所得，与孕妇体内条件不尽相同，NOS活性的测定会受一定影响，所以孕妇体内的变化有待进一步证实[7,8]。
　　 NO与宫缩抑制
　　NO可对宫缩产生抑制作用，而不同妊娠期宫缩可以直接影响妊娠的结局，所以NO在不同妊娠期对宫缩的抑制作用也与不同的妊娠结局有关。有人研究了各不同妊娠时期有自发宫缩（A类）和相应孕期无自发宫缩（B类）两类孕妇晨尿NO-cGMP水平，发现相同孕期的B类中的尿NO-cGMP水平均显著高于A类，NO-cGMP水平升高与宫静息状态有关，说明NO有抑制宫缩的作用[9]。Buhimschi等[10]认为左旋氮硝基精氨酸甲酯和左旋氮硝基精氨酸（L-NAME和LNA，均为NOS抑制剂）可使孕妇（孕31～40周）离体的子宫平滑肌收缩强度分别增加37％、25％，而二乙胺/一氧化氮(diethylene-triamine/nitric oxdie，DEA/NO，NO供体)可使宫缩抑制。左旋精氨酸（L-arginine）也能有效抑制孕妇孕中期宫缩，使妊娠得以继续[11]。同时不同孕期NO水平的高低也表明NO与宫缩抑制直接相关：孕中期NO水平较高，使子宫松驰，从而有助于维持子宫静息状态；而孕晚期尤其分娩时，NO水平显著下降，宫缩抑制作用减弱与宫缩发动有关[12]。Segal等[13]用硝酸苷油（Nitroglycerin，TNG，一种NO供体）作用于有自发宫缩和诱发持续宫缩的两组孕鼠离体子宫平滑肌，结果在TNG10μmol时，两组宫缩均能有效被抑制。对相同条件下粘附有胎盘组织和未粘附胎盘的两类平滑肌，在TNG作用下，前者较后者宫缩抑制达50％，而未粘附胎盘组织的子宫平滑肌，则宫缩抑制不明显，说明NO对子宫平滑肌有明显松驰作用，从而有效抑制宫缩，且胎盘组织可提高其敏感性。体内NO通过胎儿—胎盘单位发挥作用，与体外实验条件下比，更能有效增强NO抑制宫缩的作用[14]。
　　 NO下宫缩抑制的剂量依赖性
　　近年来，不少作者在研究和提出NO抑宫缩的同时，进一步研究发现宫缩抑制程度与NO剂量之间存在着相关性。有人报道孕妇离体子宫平滑肌松驰程度与DEA/NO浓度呈剂量依赖性正相关。作者观察了DEA/NO从0.1μmol～0.1mmol的变化中其宫缩抑制情况，结果发现随DEA/NO浓度增加，宫缩抑制时间延长[10]。硝普钠(Sodium nitropusside，SNP，NO供体)10μmol～1mmol作用于相同预收缩的孕鼠离体子宫平滑肌，结果表明随SNP浓度增加，宫缩强度及频率均下降，说明SNP能抑制宫缩，且其抑制程度与SNP呈剂量依赖性正相在[]16]。将孕中、晚期鼠离体子宫平滑肌置于含39mmol·L-1KCI的孵育液中孵育，使平滑肌处于相同预收缩状态，分别用L-arginine0.3～3μmol，1～3mmol作用于孕中、晚期子宫滑肌，结果表明无论孕中期与孕晚期，子宫平滑肌紧张度均随L-arginine浓度增加而下降，宫缩抑制时间也随L-arginine浓度增加而延长，说明L-arginine浓度与宫缩抑制程度及持续时间成正相关[16]。
　　 子宫平滑肌对NO的敏感性
　　Yallampalli等[16]观察了妊娠中期（Ⅰ组）、足月临产（Ⅱ组）和突发早产（Ⅲ组）3组孕鼠离体子宫平滑肌自发收缩状态下对8-Bromo-cGMP（可模拟NO-cGMP作用）的反应，发现8-Bromo-cGMP对上述3组子宫平滑肌产生松驰的平均有效剂量分别为2.1±0.5×10-6mol、0.91±0.1×10-4mol、0.46±0.08×10-4mol，说明Ⅰ组子宫平滑肌对8-Bromo-cGMP最敏感，Ⅲ组次之，Ⅱ组敏感性最低，也有人观察DEA/NO分别对育龄妇女、孕31～40周及分娩期孕妇离体子宫平滑肌的作用DEA/NO使各自发收缩状态下平滑肌松驰的平均有效剂量分别为20.8±4.4μmol、1.5±0.4μmol、21.7±7.4μmol，表明孕31～40周的子宫平滑肌对DEA/NO敏感性最高，约为育龄妇及分娩期孕妇的14倍，分娩期子宫平滑肌对DEA/NO的敏感性最低[10]。0.3mmol dEA/NO和10mmol NO能有效松驰鼠孕中期的自发宫缩，对其孕晚期自发宫缩则无作用，说明孕中期子宫平滑肌较孕晚期敏感。由此可见，不同孕期子宫平滑肌对NO的敏感性不同，以孕中期敏感性最高，孕晚期相对降低，分娩期降至最低水平[14,7]。
　　 NO与早产
　　妊娠满28周至37周终止者称为早产，其临床表现为宫缩们宫颈管消失。有人报道NO供体可有效抑制宫缩，从而抑制早产，反民增加NO对早产效果显著[11]。也有人观察了孕鼠中期注射抗孕酮（Onaprit-stone）和皮下埋植L-NAME后再注射同剂量Onapristone两组之间的早产情况，发现单独用Onapristone者发生早产不明显，而同时用L-NAME与Onapristone者则使孕鼠早产率显著增加，且早产发生时间提前，说明NO与孕激素相互作用对维持妊娠、预防早产非常重要，而早产发生可能与两者同时下降有关[17]。最近Dong等[18]的研究也支持这一观点，并提出早产时孕鼠血清eNOS活性无变化，iNOS活性则显著降低，且iNOS下降与孕激素下降呈平行趋势。对有羊膜炎的早产，有人同提出新的观点，作者对早产孕妇进行B超下穿刺抽取羊水，同时作羊水细菌学培养与NOS活性测定，发现有羊膜炎感染者，羊水iNOS活性增加；且有羊膜感染孕妇其羊水NO水平是非感染者的2倍。因羊水成分与胎儿代谢密切相关，目前认为这一现象对探导索异常妊娠和IUGR、足月低体重儿及异常分娩发动机制如早产等具有重要的价值，也是目前正在研究的重要课题[19,20]。
　　综上所述，不同妊娠期NO水平不同变化，并对不同妊娠的子宫活动产生相应作用。目前，国外在该领域研究较多，但基本处于实验阶段，极少应用于临床。如何利用NO对宫缩的作用，预防和/或治疗早产、控制产程，提高围产医学质量，是当前该领域有待进一步探的新课题。
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　　3 Ali M et al.Hum Reprod,1997;3(11):995-1003
　　4 Riemer RK et al.Am J Physiol,1997;272(6ptl):1008-1015
　　5 Ransy B.Obstet Gynecol,1996;87(21):249-253
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　　8 Norman JE et al.J Reprod Fertil,1977;110(2):249-254
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　　17 yallamplli C et al.Am J Obstet Gynecol,1996;175(1):207-212
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