两种梅毒螺旋体检测方法的对比分析
【摘要】 目的：探讨在采供血机构的血液梅毒螺旋体检测中，用抗?TP ELISA法替代非特异性的TRUST法的可行性。方法：用抗?TP ELISA法和TRUST法同时检测60 677份血标本，并对两种方法的检测结果进行对比分析。结果：抗?TP ELISA试剂检出阳性率明显高于ELISA法，同时抗?TP ELISA法阴性(TRUST法检测阳性)经TPPA法鉴定有阳性结果。结论：虽然抗?TP ELISA法的特异性和灵敏度明显高于TRUST法，尚不能完全取代TRUST法，但两种方法可相互补充。
【关键词】 无偿献血；梅毒螺旋体；反应素；抗?TP
梅毒螺旋体(T.pallidum,TP)属于密螺旋体属苍白螺旋体的苍白亚种，是引起人类梅毒的病原体。人是梅毒的惟一传染源，可经输血引起输血后梅毒。血液中的TP的检测以前大多采用TRUST法或RPR法，检测血液中TP非特异性抗体(反应素)，其特异性和灵敏度相对较差，难以满足采供血机构筛选献血者的需要。抗?TP ELISA法检测血液中TP特异性抗体，其特异性和灵敏度大幅度提高。笔者对本站2003年8月至2006年8月采用抗?TP ELISA和TRUST的血液梅毒筛选结果进行对比分析。
1 材料与方法
1.1 样本
无偿献血者血标本60 677份；室内质控品：2 NCU/ml梅毒抗体特异质控血清(卫生部临床检验中心，批号：0302，0308，0401，0408，0501，0505，0507，0510，0601，0606)；2 NCU/ml梅毒初筛质控血清(卫生部临床检验中心，批号：0304，0307，0310，0402，0408，0412，0503，0507，0511，0602，0605)。
1.2 试剂
抗?TP ELISA试剂盒(北京金豪制药有限公司，批号：20030516，20030912，20031220，20040408，20040819，20041122，20050123，20050422，20050718，20050904，20051029，20060119)；抗?TP ELISA试剂盒(英科新创厦门科技有限公司，批号：2006037502，2006057504)；TPPA试剂盒(日本富士公司，批号：VA40402，VA50307，VA51207，VA60402)。TRUST试剂盒(兰州生物制品研究所，20030201，20030802，20040201，20040802，20050201，20050802，20060201)。
1.3 仪器
TECAN RSP200全自动加样分析系统(瑞士TECAN公司)；FAME24/20全自动酶标免疫分析系统(美国哈美顿公司)；KJ?201BS型振荡仪(姜堰市康健医疗器具有限公司)；TECAN酶标仪(瑞士TECAN公司)；TECAN洗板机(瑞士TECAN公司)；anthos孵育振荡器(奥斯邦公司)。
1.4 方法
均严格按试剂盒内说明书操作。
2 结果
2.1 两种方法检测结果的比较
见表1。表1 ELISA法和TRUST法检测结果(略)
从表1两种方法检测为阳性的638份样本中，TRUST法检出160份，占25%(160/638)；ELISA法检出625份，占98%(625/638)；抗?TP ELISA法阳性检出率明显高于TRUST法。
2.2 TRUST法阳性经抗?
TP ELISA法检测阴性的13份样本再用TPPA法确认 抗?TP ELISA法检测的13份阴性标本经TPPA法鉴定后有5份阳性结果，见表2。表2 13份血标本TPPA法确认结果(略)
3 讨论
血清中反应素在初期梅毒病灶1周~2周时出现，阳性率为53%~83%，二期梅毒的阳性率可达100%，晚期梅毒的阳性率达58%~85%，胎传梅毒的阳性率为80%~100%。一些病原如风疹、水痘、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等可能造成TRUST法的假阳性结果［1］。梅毒特异性抗体由特异性抗原诱发产生，在梅毒潜伏期即产生。一期梅毒时增高，主要是IgM型；二期梅毒时达高峰，有IgG型、IgM型；三期梅毒略降低，主要是IgG型，对于早期梅毒，有TP检查，反应素血清反应及特异性梅毒血清反应检查。而晚期梅毒，TP转阴，反应素反应也常减退或转阴，只有特异性血清反应［2］。抗?TP ELISA试剂还具有价廉、保存时间久等优点，是目前梅毒血清学诊断试验的首选方法。
虽然抗?TP ELISA法明显优于TRUST法，从表2可看出，TRUST法阳性(ELISA法阴性)13份标本中，经TPPA法确认有5份阳性标本。抗?TP ELISA法目前尚不能完全取代TRUST法，TRUST法试剂价廉、操作方便快捷，本文试验结果显示TRUST法的使用在一定程度上可防范抗?TP ELISA法产生的阳性标本漏检问题。作为采供血机构，保证血液质量和安全输血是首要任务。检测中使用抗?TP ELISA法和TRUST法对梅毒进行筛查和检测，两种方法均阴性，可以最大限度防止梅毒阳性血漏检。
TRUST法原理有别于ELISA法，但笔者认为对血液同时采用ELISA法和TRUST法两种检测试剂进行梅毒的筛选，可以相互补充且有效，更能确保临床用血的安全。
【】
［1］张卓然.临床微生物学和微生物检验［M］.人民卫生出版社，2004：287.
［2］郑怀竞.免疫学检验室间质评与室内质控［M］.北京医科大学协和医科大学联合出版，1997：138?147.
