针吸细胞学诊断脊索瘤的探讨

                  作者：邱丹，黄毅，刘建英，钟丽萍

【关键词】  脆性组氨酸三联体基因；人表皮生长因子受体2；肿瘤;肺

    在多种恶性肿瘤中常有脆性组氨酸三联体（fragile histidine traid,FHIT）基因的改变。人类表皮生长因子受体基因（erbB基因）家族是编码人体表皮生长因子受体（human epidermal?growth?factor receptor,HER）的癌基因。erbB2基因是编码HER2的癌基因，报道HER2参与恶性肿瘤的发生、过程。我们探讨了FHIT基因及HER2在非小细胞肺癌(NSCLC)的表达意义与临床病理特征的关系。

    1  资料与方法

    1.1  研究对象  我院经肺穿刺、纤维支气管镜活检的肺癌标本38例，胸外科手术切除的肺癌标本12例。经病理确诊，鳞癌27例、腺癌18例、腺鳞癌及大细胞癌5例。其中男32例，女18例，年龄35～78岁，中位年龄53.3岁。对照组为手术切除的正常肺组织共21例。

    1.2  方法  免疫组化Envision法。石蜡切片，厚4 μm，常规脱蜡至少，严格按试剂盒操作，苏木素复染、脱水、透明、封片。免疫组化染色结果判定标准如下：FHIT基因表达产物（FHIT蛋白）定位于细胞质，阳性呈棕黄色颗粒，散在分布,弱到强染色。每张切片在光镜下随机选取高倍视野计数500个细胞，按染色强度和阳性细胞百分率计分,（-）:无染色或阳性细胞≤10%为阴性;（+）：阳性细胞＞10%为阳性。HER2定质于细胞膜和细胞浆。（-）：所有细胞均未出现棕黄色；（±）:≤25%的细胞出现棕黄色；（+）：＞25%的细胞出现棕黄色；（++）：＞50%的细胞出现棕黄色；（+++）：＞75%的细胞出现棕黄色。肺癌组织HER2染色与癌旁非癌上皮组织染色HER2相差≥（++），则为过度表达。

    2  结果

    50例非小细胞肺癌中，经免疫组化检测FHIT蛋白有35例阴性，表达率为30.0%，与正常肺组织80.95%比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。非小细胞肺癌组织中的FHIT蛋白表达率鳞癌为18.5%、腺癌为44.40%，差异有统计学意义（P＜0.05）。有淋巴结转移组FHIT蛋白表达率15.79%；无淋巴结转移组FHIT蛋白的表在率为38.71%，两者差异有统计学意义（P＜0.05）。在肺癌TNM分期中，Ⅰ、Ⅱ期21.88%与Ⅲ、Ⅳ期44.44% FHIT蛋白表达率比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。50例肺癌中非小细胞肺癌组织中，HER2的过度表达率为56.0%，HER2的过度表达与肺癌的病理类型不相关（P＞0.05）；而HER2的过度表达与肺癌淋巴结转移及TNM的分期相关，HER2的过度表达率在有淋巴结转移组与无淋巴结转移组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。HER2的过度表达率随TNM的分期增加而增加。肺癌组织中FHIT基因表达与HER2的过度表达存在负相关关系(r=-0.38，P＜0.05)。

    3  结论

    FHIT基因定位于3p14.2，跨越脆性位点FRA3B，总长＞500Kb，cDNA只有1kb左右，其含10个外显子。FHIT基因失活方式主要为基因缺失[1]，基因突变，小片段DNA的插入[2]，与CPG区域的甲基化，基因的失活导致蛋白表达下调。本研究结果表明：在肺癌组织中存在FHIT基因表达显著下降。鳞癌中FHIT基因的表达率低于腺癌，其差异有统计学意义，FHIT基因是烟草中致癌物作用的靶点，而鳞癌中FHIT基因表达下降高于腺癌，可能跟吸烟与肺鳞癌关系更为密切有关。erbB基因是在研究禽成红细胞增生病毒（avian erythroblastosis virus,AEV）的过程中发现的癌基因，erbB1、erbB2是其中两个主要成员之一，erbB2基因的编码HER2的癌基因，HER2与配体结合后，通过自动磷酸化参与细胞的信号传递，信号在细胞内通过蛋白激酶级联传递，最终调节细胞的生长及分裂。本研究结果表明，肺癌中存在的HER2过度表达，而HER2的过度表达与肺癌的病理类型不相关。有淋巴结转移肺癌组织FHIT基因表达低于未发现淋巴结转移肺癌组织，这提示FHIT基因在肺癌进展中可能起一定作用，与肺癌侵袭转移癌的发生有关，TNM临床分期早的Ⅰ、Ⅱ期比Ⅲ、Ⅳ期FHIT基因表达率低,说明在肺癌中FHIT基因的失表达早期发挥作用，多数学者推测在肺癌发生的多步过程中，FHIT基因改变早于p53基因的突变［3］。因而免疫组化分析肺穿刺、纤维支气管镜活检的肺癌活组织中     

    FHIT蛋白的表达情况，可能作为肺癌早期筛查的指标之一。HER2的过度表达与肺癌淋巴结转移相关及肺癌TNM分期相关，说明HER2在维持晚期肺癌细胞的生长上起重要作用［4］，可以设想，人为干预HER2的过度表达是晚期肺癌的有效方法。FHIT基因对细胞增殖起负调控作用，而HER2对细胞增殖起正调控作用，两者存在负相关关系。总之，在肺癌的发生、浸润、转移病变阶段中存在FHIT基因的表达下调和的HER2过度表达，两者存在负相关关系。

【】
  ［1］ 李立，安倩，冯晓莉,等.肺癌组织3号染色体短臂上抑癌基因异常改变的初步分析［J］，中华医学杂志，2001，81（7）：399?401.

［２］ Roz L,Gramegna M,Ishii H,et al.Restoration of fragile histidine triad (FHIT) expression induces apoptosis and suppresses tumorigenicity in lung and cervical cancer cell lines［J］.Proc Natl Acad Sci USA,2002,99(6):3615?3620.

［3］ Geradts J,Fong KM,Zimmerman PV,et al.loss of Fhit expression in non?small?cell lung cancer：Correlation with molecular genetic abnormalities and clinicopathological features［J］.Br J cancer,2000,82(6):1191?1197.

［4］ 邓在春，葛棣，张郭华，等.人类表皮生长因子受体家族在肺癌中的表达研究［J］.中华结核和呼吸杂志，2002，25（4）：207?209.