甲磺酸帕珠沙星凝胶的制备与质量控制

                    作者：陈建华 李金伟  何西奎  谭屹

【摘要】  　　目的：制备甲磺酸帕珠沙星凝胶，建立质量控制方法。方法：以卡波姆934为基质制备凝胶，采用高效液相色谱法测定甲磺酸帕珠沙星含量，并考察其稳定性。结果：甲磺酸帕珠沙星线性范围为20.0～80.0μg·mL-1（r=0.9999），平均回收率为98.1%，RSD=1.77%（n=6 ），凝胶稳定性良好。结论：该处方设计合理，质量控制方法准确可靠，制剂稳定性好。

【关键词】  甲磺酸帕珠沙星 凝胶剂 制备 质量控制

　　甲磺酸帕珠沙星是由日本研究开发的新型氟唆诺酮类抗菌药，为帕珠沙星的甲磺酸盐，具有抗菌谱广、抗菌活性高、副作用小及耐受性好等特点［1，2］。其通过抑制细菌DNA拓扑异构酶Ⅰ和Ⅳ的活性，抑制细菌DNA的合成，导致细菌死亡临床用于革兰阳性菌及阴性菌引起的呼吸道感染、泌尿生殖系统感染、皮肤软组织感染及外科感染［3］。目前国内市场上只有注射剂,我们根据临床需要研制了甲磺酸帕珠沙星凝胶。

　　1  仪器和试药 
    
　　Agilent 1100 series 高效液相色谱仪，7312-1型电动搅拌机（北京普析通用仪器有限公司），PHB-1型便携式酸度计（TriTrust 公司）；甲磺酸帕珠沙星原料（浙江司太立制药有限公司，批号：20061106），甲磺酸帕珠沙星对照品（含量99.9%，江苏亚邦医药有限公司提供），卡波姆934(英国Googrich公司)；其它辅料均为药用规格。乙腈、甲醇为色谱纯，磷酸氢二钾、三乙胺、甲磺酸为分析纯，水为纯化水。

　　2  处方与制备

　　2.1  处方
    
　　甲磺酸帕珠沙星3.0g，卡波姆1.0g，丙二醇20 ml，三乙醇胺2.0g，月桂氮卓酮0.5g，司盘852g，注射用水加至1000ml。

　　2.2  制备
    
　　将甲磺酸帕珠沙星溶于纯化水，将卡波姆、丙二醇、月桂氮卓酮、司盘85和纯化水混合均匀，边搅拌边加入三乙醇胺，使成凝胶基质。在搅拌下将甲磺酸帕珠沙星溶液加入基质，混合均匀，加水至全量，搅拌均匀，即得。

　　3  质量控制

　　3.1  性状
    
　　本品为微黄色半固体物质。

　　3.2  鉴别

　　3.2.1  本品显有机氟化物的鉴别反应［4］。

　　3.2.2  取本品含量测定项下溶液，在335与249nm波长处有最大吸收。

　　3.3  检查
    
　　取本品1 g，加注射用水20 ml稀释后测PH值应在5.0～7.0之间。其它检查应符合《药典》（2000年版二部附录）“凝胶剂”项下的有关规定。

　　3.4  含量测定

　　3.4.1  色谱条件  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-［10%甲磺酸溶液-1.0mol·L-1 磷酸氢二钾溶液-水（10：7：153）（用三乙胺调节pH值至3.0）］（30：170）为流动相，流速2.0ml·min-1，温度20～25℃，进样量为20μl，测定波长范围200～500nm，检测波长为249nm（按照分光光度法在200～500nm的波长范围内扫描, 结果表明: 本品在 249、335nm 波长处有最大吸收, 因在249nm 处吸收系数相对较大, 故选249 nm为检测波长）。

　　3.4.2  溶液的制备   ①对照品溶液: 取干燥至恒重的甲磺酸帕珠沙星对照品，用流动相制成每1ml中含约40μg的溶液，作为对照品溶液。② 供试品溶液及空白溶液：精密量取甲磺酸帕珠沙星凝胶适量用流动相制成每1ml中含约40μg的溶液，作为供试品溶液。同法制备不含甲磺酸帕珠沙星的空白溶液。

　　3.4.3  标准曲线   精密取干燥至恒重的甲磺酸帕珠沙星对照品适量，用流动相稀释至20.0、30.0、40.0、50.0、80.0μg·mL-1，分别量取20μl注入色谱仪记录色谱图，以浓度C为横坐标，峰面积X为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程X=50691C-5707，r=0.9999，结果显示本品在20.0～80.0μg·mL-1浓度范围内，线性关系良好。

　　3.4.4  回收率试验   精密称取甲磺酸帕珠沙星对照品适量(30.5mg,29.3mg,39.7mg, 41.1mg,50.6mg,51.3 mg) ,置50ml容量瓶中，按处方比例加入空白全辅料,加流动相溶解、定容, 摇匀后吸取5ml置于100ml容量瓶中,加流动相溶解、定容。精密量取续滤液20μl进样，测定含量，得平均回收率为98.1%，RSD=1.77%（n=6）,见表1。

　　表1  回收率实验结果（略）

　　3.4.5  重现性试验  按样品含量测定方法，测定同一批样品，结果含量平均值为97.8%，RSD=2.15%（n=5）。

　　3.4.6  样品含量测定  精密称取甲磺酸帕珠沙星凝胶1g置于100ml容量瓶中，加流动相溶解、定容,摇匀，精密量取续滤液20μl注入色谱仪测定含量，经测定批号为061013，061021，061116  三批样品，含量分别为标示量的98.5%、97.4%、100.1%。

　　3.5  稳定性实验
    
　　取样品10g，装入离心试管中，离心（2500r/min）15 min，结果未见凝胶分层。
    
　　取包装完整的样品，分别置于55℃干燥箱中6h和-15℃24h，结果未见凝胶分层。
    
　　将包装完整的样品置于室温下12个月，考察其颜色及pH值和含量，结果颜色和pH值均无变化，含量在合格范围内。

　　4  讨论
    
　　甲磺酸帕珠沙星具有抗菌谱广,抗菌活性强的特点, 不仅对肠杆菌属、克雷伯菌、变形杆菌属、嗜血杆菌属、沙门菌属、志贺菌属、不动杆菌属及假单胞菌属等革兰阴性菌具有良好的体外抗菌活性 , 对葡萄球菌属、溶血性链球菌、肠球菌等革兰阳性菌也具有较强的抗菌作用, 对厌氧菌、支原体亦有较好的抗菌活性［5，6］。
    
　　我们采用水溶性基质有利于药物快速释放，并能吸收患处渗出的组织液，适用于湿润糜烂创面，而且易于途布，皮肤耦合效果好。制剂工艺中为了避免产生气泡，搅拌速度要慢且要向一个方向旋转，同时加司盘85作为消泡剂。采用高效液相色谱法测定含量，有效消除了基质的干扰，方法可靠，结果准确，回收率好。临床应用表明该制剂杀菌作用强，疗效好，副作用小，而且所用辅料少，工艺简单，适用于制剂。

【】
  　　1 Akio Nacal,Yasuhito Kawamura and Takuya kodama.Thirteen-week intravenous repeated dose toxicity study of T-3762,A novel parenteral quinolone antimicrobial anent,and four-week recobvery test in cynomologus monkeys.The Japanese journal of antibiotics,1998,11:681.

　　2 Yasuhit Kawamura, Nobuko kito， et al. Three months intravenous repeated dose toxicity study of T-3762 in rats.The Japanese journal of antibiotics,1998,12:623.

　　3 杨信怡，游雪甫.注射用帕珠沙星的药理研究和临床应用.国外医药:抗生素分册，2003，24：80～86.

　　4 国家药典委员会.中华人民共和国药典. 二部．北京：化学出版社，2005，附录58.

　　5 Yoshikazu Fukuoka， et al. In vivo antibacterial activitiesof Pazufloxacin, a new quinolonederivative J . Antimicrobial agents and chemotherapy, 1993 , 5: 384～392.

　　6 H. Kobayashi. Interim Resultsfroma Multcentre ClinicaTrial of T-3761 in Japan J. Drugs,1995,49(Suypl 2):470～471.