轮叶党参降血脂保健饮料中总黄酮的含量测定
作者:许松姬,韩春姬,许妍姬
【摘要】 [目的] 建立降血脂保健饮料中总黄酮的测定方法. [方法] 采用分光光度法,以芦丁为对照品,在波长为510nm处测定总黄酮含量. [结果] 芦丁在16.5~82.5μg之间线性关系良好,平均回收率为98.9%,RSD为2.29%. [结论] 采用分光光度法测定轮叶党参降血脂保健饮料中总黄酮的含量简便易行,重复性好.
【关键词】 党参属;黄酮;分光光度法
轮叶党参(Codonopsis Lanceolata Benth.et Hook.F.)又名羊乳、四叶参、山胡萝卜、山海螺及白蟒肉等,是桔梗科植物羊乳的根,多分布于东北、华南、西南地区及朝鲜、日本、俄罗斯等国家,在民间常将它作为山野菜食用,含有丰富的多糖、皂苷、黄酮及多种维生素及微量元素.据报道,轮叶党参水取提液具有明显的调理血脂蛋白作用,可预防血脂升高 [1] .轮叶党参降血脂保健饮料是以轮叶党 参为主药配以枸杞子及山楂等药食兼用药材制成的 保健饮料,有明显的降血脂作用,并存在明显的量效关系 [2] .本文以总黄酮为指标采用分光光度仪测定了轮叶党参降血脂保健饮料中主要成分总黄酮的含量,旨在为控制质量提供理论依据.
1 仪器与试剂
1.1 仪器 722分光光度仪为上海精密仪器有限公司产品,HH-4型恒温水浴锅为中国深圳国华仪器厂产品,TG328型分析天平为上海天平仪器厂产品,电热鼓风干燥箱为金坛市恒丰仪器厂产品.
1.2 试剂 芦丁对照品为中国药品生物制品检定所产品.
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的配制 精密称取105℃干燥至恒质量的芦丁标准品16.5mg,加甲醇溶解并定容至100mL,配制成165mg/L的芦丁标准溶液.
2.2 供试品溶液的制备 准确吸取样品5.0mL,加700mL/L乙醇定容至50mL,直接测定.
2.3 标准曲线的绘制 准确吸取芦丁标准溶液0,0.10,0.20,0.30,0.40,0.50mL,相当于芦丁0,16.5,33.0,49.5,66.0,82.5μg,移入10mL刻度比色管中,加入300mL/L乙醇溶液至5mL,各加50g/L亚硝酸钠溶液0.3mL,振摇后放置5min,加入100g/L硝酸铝溶液0.3mL,摇匀后放置6min,加1.0mol/L氢氧化钠溶液2mL,用300mL/L乙醇定容至刻度,以零管为空白,摇匀后在波长为510nm处测定光吸收值(A值),以质量浓度(X)为横坐标,A值(Y)为纵坐标,绘制芦丁含量(μg)与A值的标准曲线.0,16.5,33.0,49.5,66.0,82.5μg芦丁标准溶液A值分别为0.000,0.110,0.163,0.334,0.498,0.634.利用SPSS11.5统计软件相关系数R值和线性方程,Y=0.024+0.001X, R=0.999.
2.4 精密度试验 精密量取5份同一批样品供试品溶液4.0mL,测定其A值,结果见平均值为0.4634,RSD为0.47%,表明精密度较高.
2.5 稳定性试验 每10min测定1次测定后的供试品溶液,连续3次,测得供试品溶液平均值(A值)为0.471,RSD为1.25%,结果表明样品供试品溶液在30min内稳定性良好.
2.6 重现性试验 按拟定的含量测定方法,取同一批样品供试品溶液测得平均值(A值)为0.462,RSD为0.12%,结果表明本方法重现性良好.
2.7 回收率试验 精密吸取5份已知含量的同一批样品(1.097g/L)2.0mL,分别加入芦丁对照品溶 液(0.165g/L)0.5,1.0,1.5,2.0,2.5mL.按上述样 品回收供试品溶液测得A值,并回收率.结果表明,回收率符合要求,见表1. 回收率=测得量(mg)-样品含量(mg) 对照品含量(mg) ×100%表1 回收率试验结果
2.8 样品含量测定 取5份样品各4.0mL,按照2.3项下方法测定含量,结果见本品含量为1.097 g/L,RSD为0.42%.
3 讨论
在黄酮类化合物的测定中,如果加入铝盐使黄酮类化合物与铝离子形成稳定的配合物,在中性偏酸性条件下(醋酸钠缓冲溶液)波长为410~420nm处有最大吸收,而在碱性溶液中(稀氢氧化钠溶液)波长为510nm处有最大吸收 [3] .本实验选择碱性溶液即在510nm处测定了轮叶党参降血脂保健饮料中的总黄酮含量,此法简便易行,重复性好 [4] .本品在配制时已处理过多糖和色素,因此测定总黄酮时可不再处理聚酰胺树脂脱脂,稀释后直接测定并不影响结果.
【】
[1] 韩春姬,李莲姬,朴永泉,等.轮叶党参对大鼠血脂的影 响[J]. 预防医学文献信息 ,1999,5(1):3.
[2] 崔香淑,韩春姬,戈延茹,等.复方轮叶党参口服液对血脂的影响及其量效关系[J]. 临床康复, 2004,8(33):7454.
[3] 丁明玉,赵纪萍.贯叶金丝桃提取物中总黄酮的测定方法[J]. 分析试验, 2001,20(6):45.
[4] 王光亚. 保健食品功效成分检测方法 [M].北京:中国轻工出版社,2002.29.