刺五加对他克林所致小鼠急性肝组织损伤的保护作用

【摘要】  探讨刺五加对他克林所致小鼠急性肝组织损伤的保护作用. ［方法］ 灌胃给予35mg/kg他克林制作小鼠急性肝组织损伤模型，每日分别灌胃给予小鼠不同剂量的刺五加总皂苷及粗多糖，连续4d，观察小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）及肿瘤坏死因子（TNF-α）活性的变化. ［结果］ 不同剂量的刺五加总皂苷及粗多糖均可降低急性肝组织损伤小鼠血清AST，ALT，ALP，TNF-α活性，与水飞蓟素比较无显著性差别. ［结论］ 刺五加对他克林所致小鼠急性肝组织损伤有一定的保护作用.

【关键词】  刺五加属;他克林;水飞蓟素;肝疾病;小鼠

　刺五加作为药物已广泛应用于临床，具有固本强壮之功效.近年来，国内外学者在刺五加的化学成分、药理作用及临床应用等方面进行了较为深入的研究，但关于刺五加对肝组织损伤保护作用的报道较少见.本文观察了刺五加对他克林所致小鼠急性肝组织损伤的保护作用，旨在为刺五加的应用提供更多的依据.
    
　　1 材料
   
　　1.1 实验动物  取昆明种小鼠，由延边大学医学部实验动物科提供，体重为20～22g，均为雄性.25℃恒温环境饲养，饲以标准饲料.
    
　　1.2 药品与试剂  水飞蓟素购自药品生物制品检定所，批号为050603;刺五加购自吉林省延吉市新药大药房，由延边大学药学院生药学教研部刘永镇教授鉴定为正品;他克林（tacrine）为美国Sigma公司产品;天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、血清碱性磷酸酶（ALP）及肿瘤坏死因子（TNF-α）试剂盒均购自南京建成生物工程研究所.
    
　　1.3 仪器  SP-4430型全自动生物化学分析仪为日本Arkray公司产品;BS224型天平为北京赛多利斯仪器系统有限公司产品;95308型全自动离心机为美国Sigma公司产品.
     
　　2 方法
   
　　2.1 刺五加粗多糖及总皂苷的制备  取刺五加生药材适量，加入蒸馏水，于80℃条件下提取，高浓度乙醇沉淀，沉淀物洗净得刺五加粗多糖;取刺五加生药材适量，经950mL/L乙醇提取，蒸干，加水溶解，饱和正丁醇萃取，挥干乙醇得刺五加总皂苷 ［1］ .
    
　　2.2 分组及肝组织损伤模型制作  将小鼠按体重分为9个组，即空白对照组、模型对照组、水飞蓟素对照组、刺五加总皂苷大、中、小剂量组及刺五加粗多糖大、中、小剂量组，每组各为10只.刺五加总皂苷及粗多糖大、中、小剂量组给药剂量分别为25，15，5mg/L.每日分别灌胃给予各给药组小鼠20mL/kg相应药物，连续4d;而空白对照组及模型对照组小鼠则每日灌胃给予等体积生理盐水.末次给药前禁食16h，末次给药1h后除空白对照组小鼠外均灌胃给予35mg/L他克林溶液20mL/kg，24h后脱颈椎处死 ［2］ .
    
　　2.3 小鼠血清的制备  取小鼠颈动脉血，静置15min，以2000r/min离心15min，取血清，置于-20℃条件下冷冻保存，备用.
    
　　2.4 生物化学指标的检测  应用全自动生物化学分析仪测定各组小鼠血清中AST，ALT，ALP，TNF-α的活性 ［3］ . 2.5 统计学处理  所有实验数据均以均数±标准偏差（x±SD）表示，用SPSS11.0统计软件进行方差分析，组间差异比较采用t检验.

    
　　3 结果
   
　　3.1 刺五加总皂苷对急性肝组织损伤小鼠血清ALT，AST，ALP，TNF-α活性的影响  由Table1可见，灌胃给予他克林后，模型对照组小鼠AST，ALT，ALP，TNF-α活性均明显升高，与空白对照组比较有显著性差异（P<0.05，P<0.01），提示模型制作成功.刺五加总皂苷大、中、小剂量组小鼠血清AST活性均较模型对照组显著下降，相比较均有显著性差异（P<0.05，P<0.01）.
    
　　3.2 刺五加粗多糖对急性肝组织损伤小鼠血清ALT，AST，ALP，TNF-α的影响  由Table1可见，刺五加粗多糖大、中、小剂量组小鼠血清AST活性较模型对照组均下降，且刺五加粗多糖大、中剂量组小鼠ALT，ALP活性较模型组明显下降，相比较均有显著性差异（P<0.05，P<0.01）.
    
　　Table1 Effects of total saponin（T-sap）and acanthopanax santicosus polysaccharide（略）
    
　　4 讨论
    
　　他克林可加速细胞能量的消耗，引发线粒体功能障碍，从而抑制肝细胞线粒体DNA合成，引发肝细胞核糖体及内质网功能障碍，降低肝细胞蛋白质水平，诱发肝细胞坏死 ［4］ .本实验结果表明，刺五加总皂苷及粗多糖大、中、小剂量组小鼠血清AST，ALT，ALP，TNF-α活性均低于模型对照组，且大剂量组降低效果最为明显，提示刺五加总皂苷及粗多糖均具有较好的保护肝组织作用，并呈现明显的剂量依赖性. 

 

【】
  ［1］ 曲中原，金哲雄，高文昊，等.刺五加总皂苷提取工艺的研究［J］. 哈尔滨商业大学学报 ，2005，21（1）:14.

　　［2］ 冯有辉，何康，邹丽宜，等.人参须对四氯化碳致小鼠肝纤维化的保护作用［J］. 临床药与学 ，2004，9（9）:1019.

　　［3］ 吴希美，周汉良.小柴胡冲剂对对乙酰氨基酚肝组织损伤的保护作用及机理研究［J］. 中药药理与临床 ，1997，13（6）:8.

　　［4］ 崔长旭，柳明洙，李天洙，等.龙胆草水提取物对大鼠急性肝组织损伤的保护作用［J］. 延边大学医学学报， 2005，28（1）:20.