结肠损伤生存状况的动物实验研究
作者：刘广湘，李学锋，姜庆贺，王瑞秀，李继发，李家兴，杨景东，李丽，董伟
【摘要】 观察兔结肠损伤段肠管Ⅰ期切除吻合术和切除吻合加近端结肠造口术术后生存状况及指标变化，发现后者较为安全。
【关键词】 结肠损伤;肠管吻合术;造口术
近年来结肠损伤Ⅰ期切除吻合术的报道较多[1，2]，但多为病例回顾性分析，少见对临床病例随机分组用2种不同手术方式对比研究文献资料或2种术式对照的大样本动物实验报告。本研究旨在探讨人类左半结肠损伤的手术方式及其生存状况的实验研究，以指导临床创伤抢救工作。
材料及方法
1 结肠损伤腹腔感染动物模型制作 健康新西兰白兔50只，体重2.0～2.5kg。用氯氨酮(20mg/kg)肌肉注射麻醉，无菌操作下由中下腹正中线剖腹，切口长约4～6cm，进腹后轻缓找出盲肠，在盲肠中部用14号套管针头贯穿三处挤出肠内容物后放回腹腔，关腹。盲肠穿孔后动物予以统一摄食和饮水。于术后24小时随机分为实验、对照两组，每组25只。
2 结肠切除吻合术模型制作 对照组：入腹后探查到穿孔处肠段，将损伤肠段切除，注意保护肠管良好的血供，吻合术采用“0”线双层间断缝合，后壁10～12针，前壁12～14针，两侧端行半荷包缝合，术毕检查吻合口通畅无出血、无漏针，关闭肠系膜裂孔以防内疝。腹腔用0.4%替硝唑液约10ml保留腹腔，关闭腹腔。
3 结肠切除吻合加近端结肠造口术模型制作 实验组：损伤段肠管切除方法同对照组，完成肠吻合术后，距吻合口近端6～8cm处，选结肠系膜无血管区肠段提出腹壁外，将腹壁肌层用“4”线水平褥式缝合1针，结肠近、远端与腹膜腹壁肌层用“1”线各间断缝合3针，将结肠固定在腹壁上，防止肠管滑脱入腹腔，造成狭窄、梗阻或出血。术后用4号圆刀片切开结肠前壁，使粪便流出，碘伏纱布保护造瘘口防止感染。腹腔用0.4%替硝唑液约10ml保留腹腔内，关闭腹腔。
4 手术后方案 实验、对照两组术后所有动物禁食3天，均给予5%GNS 500ml+VitC 2.0g+VitB6 0.2g+10%KCl 5ml/ivdrip，0.4%替硝20ml/ivdrip连续3天，头孢噻肟钠50mg/kg/im Bid连续7天。术后观察指标：(1)一般情况：动物精神状态，活动状况，有无觅食行为;(2)呼吸：正常白兔呼吸30～60次/min，过快时预示体温升高;(3)腹部：有无肠胀气，有无大便及大便性状，造瘘口是否有大便排出及排出量多少;(4)切口：有无出血、感染或造瘘口梗阻;(5)采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法监测白兔血清中肿瘤坏死因子?α(TNF?α)、白细胞介素?8(IL?8)、酶谱、糖代谢的变化，准确记录动物死亡时间，进行尸体解剖，观察切口或造瘘口有无感染表现，剖腹查看腹腔感染情况、吻合口愈合情况或吻合口瘘;(6)切取死亡动物心、肝、肺、肾及吻合口上下端肠段，按动物编号送病检查。
计量资料以均值±标准差(±s)表示，作单因素方差分析，分类资料作χ2 检验数据用SPSS 14.0统计软件处理，P<0.05为差异有统计学意义。
5 实验结果 两组动物手术顺利，术后均能迅速蹲立位。对照组18例存活，7例因肠吻合口瘘于术后72～168小时死亡。实验组24例存活，1例因严重消耗于术后240小时死亡，无吻合口瘘发生。两组白兔血清中TNF?α、IL?8、血糖(Glu)、胰岛素(INS)、C肽、AMY、CK、CK?MB、AST、ALT检测值与术前对照、组间对照均无显著性差异，无明显统计学意义。
讨 论
盲肠是兔结肠重要组成部分，长约50～60cm，其病理生理、形态学特点、解剖学特点与人体左半结肠相近，但在功能上要比人类复杂的多，其细菌含量高，一旦损伤极易造成腹腔感染。因此，选择白兔盲肠制作模型更具代表性。
成功制作结肠损伤伴腹腔感染动物模型是本研究课题的关键条件。本组采用改良盲肠结扎针刺穿孔法(CLP)法Flammand[3]的方法制作结肠损伤伴腹腔感染动物模型，并于结肠损伤24小时后手术，开腹探查见腹腔内肠穿孔处肠壁肿胀明显，并可见肠内容物外溢及脓苔附着，证实结肠损伤伴腹腔感染动物模型制作成功。
报道TNF?α、IL?8对人类严重创伤后并发症的发生有预警作用[4]，本项研究对实验动物按实验标准要求每天抽血监测，连续10天，结果显示两组白兔血清中血糖(Glu)、胰岛素(INS)、TNF?α、IL?8、C肽、AMY、CK、CK?MB、AST、ALT检测值只有3例升高，与术前对照、组间对照均无显著性差异，无明显统计学意义。
本项研究表明结肠损伤段肠管切除吻合加结肠造口术安全可靠。由于结肠壁薄，血运较差，肠内容物流动性差，其细菌含量高，易胀气，损伤后周围污染重等原因，结肠破裂缝合后愈合能力差，容易导致吻合口瘘和腹腔感染。本项研究对照组7例吻合口瘘并腹腔严重感染死亡，尸体解剖切取心、肝、肺、肾病检查，病理证实吻合口瘘并脓肿形成，心、肝、肺、肾脏器有一定程度病理形态学改变及器官功能障碍。实验组1例于术后240小时死亡，死于严重消耗。对实验结果进行分析，P<0.05，对照组与实验组之间存在显著性差异，证明结肠损伤段肠管切除加近端结肠造口安全可靠。
【文献】
[1]廖金透,牛军民,刘潞庆.左半结肠损伤一期手术25例临床分析[J].浙江临床医学,2007,9(5)：625-626.
[2]王金录.结肠损伤的诊治体会[J].天津医科大学学报，2007,13(1):41-43.
[3]Flammand FJ,Sibbald WJ,Girotti MJ,et al.Pentoxifylline does not prevent microvascular injury in normotensive,septic rats[J].Crit Care Med,1995,23(1)：119.
[4]刘广湘，李丽，李学锋.多发伤患者血清促炎介质水平与创伤预后的相关性[J].中华创伤杂志,2008，24(2)：103-105.
