脂糖舒对糖尿病大鼠凝血功能指标异常的改善作用

【摘要】  目的 探讨脂糖舒对糖尿病大鼠凝血功能异常的改善作用。方法 腹腔注射链脲霉素制作糖尿病大鼠模型。用不同剂量脂糖舒（0.5g/kg和1.0g/kg）灌胃，连续8周，并取健康大鼠作正常对照。测定各组大鼠血清葡萄糖（Glu）含量和凝血功能指标[凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT）、活化部分促凝血酶原激酶时间（APTT）和纤维蛋白原（Fbg）含量]。结果 模型组大鼠血清Glu和Fbg含量较正常组明显升高， TT、PT和APTT明显缩短，P＜0.01；而脂糖舒高剂量组（1.0g/kg）大鼠血清Glu和Fbg含量较模型组明显降低，TT、PT和APTT显著延长，P＜0.05或P＜0.01。结论 高剂量脂糖舒对糖尿病大鼠凝血功能异常有明显的改善作用。

【关键词】  脂糖舒 糖尿病 凝血功能 大鼠

    ABSTRACT:Objective To observe the Protective effects of Zhi Tang Shu (ZTS) on blood coagulation disorder in diabetic rats. Methods  The diabetic model of rats was established by abdominal injection of Streptozotocin（50mg/kg）.Then,the different doses of ZTS(ZTS?1 group 0.5g/kg and ZTS?2 group 1.0g/kg) were respectively administrated intragastrically for 8 weeks,and healthy rats were used as the control.At end of 8th week,the contents of Glucose(Glu) and fibrinogen(Fbg) in serum and thrombin time(TT),thromboplastin time(PT) and the nactivated partial thromboplastin time(APTT) in serum were detected.Results Compared with norrnal control group,the contents of Glu and Fbg were obviously increased but the indexes of TT,PT and APTT were remarkably decreased in diabetic model group(P<0.05 or P<0.01).Compared with midel group,the high dose(1.0g/kg)of ZTS could obviously prolong the time of TT,PT and APTT and decrease the contents of Glu and Fbg in serum of diabetic rats(P<0.05 or P<0.01).Conclusion  The high dose(1.0g/kg)of ZTS has obvious Protective effects on blood coagulation disorder in diabetic rats.

    KEY WORDS：Zhi Tang Shu;Diabetes;Blood coagulation;Rat

    以往实验证明[1,2]，本院研制的纯中药复方脂糖舒具有抑制糖尿病大鼠蛋白非酶糖基化、清除自由基和抗脂质过氧化等作用。本文探讨脂糖舒对糖尿病大鼠凝血功能指标异常的改善作用，旨在为脂糖舒防治糖尿病的高凝趋向提供实验依据。

    1  材料与方法

    1.1  药品与试剂

    脂糖舒由山药、山茱萸、女贞子和西洋参等十几味中药组成，方中药材均购自武汉市九通大药房司门口店，经湖北中医学院药学系詹亚华教授鉴定为合格正品，按[3]法制成相当原生药0.5g/ml和1.0g/ml的浓缩口服液，冰箱4℃保存。链脲霉素（streptozotocin）系美国Sigma公司产品，临用前用预先高压灭菌的0.1mol/L、pH 4.5的柠檬酸缓冲液配成2%溶液。试剂盒：葡萄糖（Glu）测试盒由南京建成生物工程研究所提供，批号070316; PT、TT、APTT、Fbg试剂盒由美国太平洋公司提供，批号分别为354?602X、011?501X、308?506X和601?504X。尿糖试纸：广州珠江生化制药有限公司，批号20070202。

    1.2  主要仪器

    美国400cplus半自动血凝仪,北京赛科希德科技有限公司生产。

    1.3  动物

    Wistar♂大鼠，体质量220±20g，清洁级，由湖北省医学院实验动物中心提供，许可证号：SCXK（鄂）2003?0005。

    1.4  实验方法

    45只大鼠随机分为正常组（8只）和造模组（37只）。正常组大鼠不作任何处理。造模组大鼠按文献[4]法一次性腹腔注射链脲霉素（50mg/kg）制作糖尿病大鼠模型，72h后用尿糖试纸测尿糖阳性（++～+++）、采鼠尾血测血糖>16mmol/L者为实验对象，再随机分成糖尿病对照组（模型组）、脂糖舒1组和脂糖舒2组，每组10只，余者弃之，分别用等容量的生理盐水和脂糖舒（1组0.5g/kg，2组1.0g/kg）灌胃，1次/d，连续8周。各组大鼠自由饮水和摄食，饲料来源与动物来源相同。于第8周末，给药后禁食16h。剪各组存活大鼠尾尖取血，枸橼酸钠抗凝，制备血清，按试剂盒说明书方法测定血清Glu和Fbg含量及TT、PT和APTT 3项凝血功能指标。

    1.5  统计学处理

    实验数据以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。

    2  结  果

    2.1  一般情况

    正常组大鼠动作自如，反应灵敏，毛发光泽；模型组大鼠消瘦，皮毛枯燥，倦怠，多饮，多食，多尿。高剂量脂糖舒组大鼠上述症状明显轻于模型组，稍差于正常组。

    2.2  各组大鼠血糖和凝血功能指标比较

    糖尿病模型组大鼠的血清Glu和Fbg含量明显升高，PT、TT和APTT显著缩短，与正常组比较，P＜0.05或P＜0.01。应用脂糖舒后，其大剂量组的血糖和Fbg含量明显降低，PT、TT和APTT显著延长，与模型组比较，P＜0.05或P＜0.01，接近正常组水平。（表1） 表1  各组大鼠血糖和凝血功能指标的比较 与正常组比较，*P<0.05、**P<0.01；与模型组比较，△P<0.05、△△P<0.01；与脂糖舒1组比较，#P<0.01

    3  讨  论

    报道[5～10]，糖尿病及其并发症患者和糖尿病模型大鼠的凝血功能均发生异常变化，表现为Fbg含量明显升高，PT、TT和APTT显著缩短。表明糖尿病及其并发症患者和糖尿病模型大鼠在血糖异常升高的同时伴有凝血功能显著增强，血液趋向高凝状态。这种高凝状态使血流阻力增大，血栓易于形成，从而引起机体心、脑、肾等重要脏器及周围组织缺血缺氧和代谢紊乱，导致糖尿病血管并发症的发生和。其机制可能为：糖尿病长期的高血糖状态，使红细胞膜蛋白、血红蛋白和血浆蛋白非酶糖基化增强，糖基化终产物（AGEs）和自由基增多及脂质过氧化亦增强，进而使红细胞彼此发生交联使血液粘度升高、血流阻力增大、血液呈高粘状态，导致凝血因子激活。TT反映凝血因子Ⅰ的活力；PT反映外源性凝血系统激活的凝血指标，主要反映凝血因子Ⅷ、Ⅸ及因子Ⅰ等多个凝血因子水平的一个凝血功能指标；APTT缩短提示凝血过程中的各阶段凝血因子均被激活；Fbg增高提示凝血酶被激活。同时，纤维蛋白原附在红细胞表面时能使表面电荷遮蔽负电荷能力降低，静电斥力减少，红细胞间聚集力增加，亦使红细胞相互聚合成串状，导致全血粘度明显升高。以上作用相辅相成，导致微循环血流不畅，诱导微血栓形成和组织缺血缺氧。因此，调节凝血机制与抗凝血机制的动态平衡可成为阻止或延缓糖尿病血管并发症发生和发展的重要方法之一。本实验结果显示：糖尿病模型组大鼠的血糖明显升高和凝血功能指标异常，表现为血清Glu和Fbg含量明显升高、PT、TT、APTT显著缩短。这些结果与文献报道相一致，表明具有凝血功能异常的大鼠糖尿病模型制作成功。应用脂糖舒后其大剂量组大鼠血糖和凝血功能的各项指标与模型组比较均有显著性差异，P<0.05或P<0.01，且接近正常组水平，表明大剂量脂糖舒对糖尿病大鼠凝血功能异常有明显的改善作用。其作用机制可能与该方抑制蛋白非酶糖基化、清除自由基和抗脂质过氧化等效应有关，但详细机制有待于进一步探讨。本实验亦可为脂糖舒防治糖尿病血管并发症提供实验依据。

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