氟伐他汀与缬沙坦对糖尿病肾病患者CTGF表达的影响

                         作者：郭桥艳，罗曼宇，吴曼，罗萍

【摘要】  目的： 探讨糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy，DN）发病过程中结缔组织生长因子（Connective tissue growth factor, CTGF）的作用及氟伐他汀对CTGF表达的影响。方法： 38名糖尿病肾病患者(24 h尿白蛋白定量为150～500 mg)，随机分成缬沙坦组、氟伐他汀治疗组、氟伐他汀+缬沙坦治疗组，观察3个月，用ELISA方法24 h尿白蛋白定量（UAER）及血CTGF浓度，进行治疗组间及治疗前后比较。结果： 氟伐他汀降低血CTGF浓度及减轻24 h尿白蛋白增长趋势，氟伐他汀联合缬沙坦效果更明显。结论： 氟伐他汀具有肾脏保护作用，延缓糖尿病肾病病情进展。

【关键词】  糖尿病肾病； 结缔组织生长因子； 白蛋白尿； 羟甲基戊二酰基CoA还原酶抑制剂

　　［Abstract］Objective: To investigate the effects of connective tissue growth factor (CTGF) in pathogenesis of diabetic nephropathy (DN), and to observe curative effects and mechanism of fluvastatin on DN by influencing CTGF expression. Methods: Thirty?eight DN patients whose 24?hour urinary albumin (24h?UA) was between 150 and 500mg, were randomly divided into 3 groups: Valsartan treated group (group Val), fluvastatin treated group (group Flu), and fluvastatin+Valsartan treated group (group FV). Their 24h?UR excretion rates (UAER) and blood CTGF concentrations were determined by using ELISA before and after 3 months of the treatments, and the results were analyzed. Results: Fluvastatin reduced serum CTGF concentrations and 24h?UA excretion rates, and the curative effects were more obvious when combination of fluvastatin and valsartan was used. Conclusion: Fluvastatin has protective effect on kidney, and can delay DN development.

　　［Key words］ diabetic nephropathies; connective tissue growth factors; albuminuria; hydroxymethylglutary?CoA reductase inhibitors
   
　　糖尿病是一组由遗传和环境因素相互作用而引起的临床综合征，最终可引起全身各系统损害。糖尿病肾病（DN）是糖尿病最常见和最严重的微血管并发症之一，也是导致肾功能衰竭的重要病因。氟伐他汀是羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂，在临床上广泛用于降血脂治疗。近年研究证明，氟伐他汀具有不依赖降脂作用的其他生物学效应，但有关其对DN肾小球肥大和肾小球硬化方面的研究国内外报道甚少。选取2005年10月～2007年7月的临床DN患者，给予氟伐他汀药物干预，通过测定患者尿白蛋白定量及血CTGF的浓度，探讨该药对DN保护作用及机制。

　　1  材料与方法

　　1.1  研究对象 

　　选取临床确诊为DN、24 h尿白蛋白定量为150～500 mg的患者38例，随机分为：缬沙坦治疗组（A组，9例）、氟伐他汀组(B组，13例)、氟伐他汀+缬沙坦组（C组，16例）。

　　1.2  给药方式 

　　A组、B组、C组患者均给予糖尿病饮食、降糖等常规治疗。A组给予缬沙坦80 mg/d口服，B组患者给予氟伐他汀40 mg/d口服，C组给予缬沙坦80 mg/d及氟伐他汀40 mg/d口服。

　　1.3  检测项目

　　A组、B组、C组患者在给药前和给药后1个月、2个月、3个月时收集24 h尿液，并静脉采血，ELISA法检测24 h尿白蛋白定量及血CTGF浓度。酶标板设空白孔，依照次序分别加入100 μl的样本于空白微孔中（空白孔视为0号标准品）。加样后，将酶标板置于37 ℃温育30 min，洗板5×30 s，加入100 μl的酶标偶合溶液，37 ℃温育30 min，洗板5×30 s，依次加入底物A、B各50 μl，振摇混匀，37 ℃温育15 min，加入终止液50 μl，振摇混匀，450 nm处测OD，根据制备的标准曲线，计算样本含量。

　　1.5  统计学方法 

　　计量资料采用（x±s）表示，用SPSS 12.0软件进行分析，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05或P<0.01为差异有统计学意义。

　　1.4  治疗前后血CTGF水平 

　　A组、B组、C组治疗后与治疗前比较，血CTGF浓度明显降低（P<0.05），C组减少更明显(P＜0.01)，且C组较A组降低更显著(P<0.05)。但A组和B组血CTGF减少无显著性差异(P>0.05)。表2  各组患者治疗前后血CTGF水平（略）注：与同组治疗前比较，(1)P<0.05,(2)P<0.01;与A组比较，(3)P<0.05。

　　2.1  24 h尿白蛋白定量 

　　糖尿病到DN后，24 h尿白蛋白定量呈持续增长，A、B、C 3组均呈缓慢增长趋势。与A组比较，相同时点C组24 h尿白蛋白定量明显减轻（P<0.05）；A组和B组各时点无明显差异（P＞0.05），提示氟伐他汀能够延缓DN的发展。见表1。表1  各组患者24 h尿白蛋白定量（略）注：与A组同时段比较，（1）P<0.05。

　　3  讨论

    DN是糖尿病最常见和最严重的并发症之一，其早期的特征性病理改变为肾小球肥大，而CTGF与DN早期肾脏肥大密切相关[1]。糖尿病患者血糖升高，高血糖诱导的转化因子?β1（TGF?β1）和细胞外基质蛋白的增加是DN的发病机制之一[2]，而DN时多种因素可以通过MAPK通路增强TGF?β1及其下游的CTGF的表达[3]。研究发现，高糖也可诱导鼠近曲小管细胞产生CTGF，可明显刺激鼠肾脏成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的合成及纤维连接蛋白（FN）纤溶酶原激活物抑制剂基因的表达，此过程是TGF?β依赖性的[4]，最新研究发现，CTGF可诱导人近端肾小管细胞和肾皮质成纤维细胞分泌FN和Ⅳ胶原，此反应可被TGF?β中和性抗体或抗TGF?βⅡ型受体抗体所抑制；同时发现，和单独应用CTGF相比，TGF?β可明显上调两者细胞外基质（ECM）的合成，说明此作用也是TGF?β依赖性的[5]。体外研究发现，在肾间质细胞中，CTGF不仅诱导ECM合成，而且能介导TGF-β刺激的蛋白酶抑制剂的产生，从而导致ECM合成增加和降解减少[6]。因此，CTGF在DN发生、发展中具有重要作用。
    　　
　　他汀类药物(statins)是3?羟?3甲基戊二酰辅酶A(HMG?CoA)还原酶抑制剂，主要用于脂类代谢异常，它可以通过阻断细胞内甲羟戊酸代谢途径，使细胞胆固醇和多种非甾醇异戊二烯产物，如焦磷酸法呢酯(farnesyl pyrophosphate, FPP)、香叶基焦磷酸香叶酯(geranyl geranyl pyrophosphate, GGPP)的生成减少[7]。氟伐他汀是目前临床应用较多的他汀类降脂药，可通过减少TGF?β表达，从而减少CTGF的表达，达到肾脏保护作用[8]。Ikeuchi 等[9]研究发现,氟伐他汀显著降低肾组织CTGFmRNA表达和Ⅲ型胶原的合成,改善单侧输尿管梗阻引起的肾小管上皮细胞增生，这可能与他汀类药物调节细胞凋亡与增殖平衡、炎症因子的产生及信号转导等有关。
    　　
　　本研究中，DN患者在给予氟伐他汀治疗后，血CTGF的浓度明显降低，同时患者24 h尿白蛋白定量增长也明显降低，提示氟伐他汀可以通过下调CTGF浓度达到肾脏保护作用。血管紧张素转换酶抑制剂能减轻尿白蛋白定量、保护肾功能的作用已有大量临床研究证实，研究中给DN患者缬沙坦和氟伐他汀后，患者血CTGF及24 h尿白蛋白定量增长明显降低，与两类药物单独应用的效果更明显，提示联合用药效果更好。因此，阻断CTGF的合成与表达将为临床防治包括DN在内的肾纤维化提供新的治疗途径，从而延缓DN的病程进展。

【】
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