急性冠脉综合征患者血清hs?CRP和sCD40L临床特点

【摘要】  目的 观察急性冠状动脉综合征(ACS)患者血清超敏C反应蛋白(hs?CRP) 和可溶性CD40配体(sCD40L)的变化及临床意义。方法 采用夹心法酶联免疫吸附测定分析(ELISA)及微粒子增强透射免疫分析法分别测定对照组、稳定型心绞痛(SAP)组、ACS组的血清sCD40L和hs?CRP水平，并观察经皮冠状动脉介入(PCI)术对其的影响。结果 ①ACS组血清hs?CRP 及sCD40L水平均高于SAP 及对照组(P<0.01)，SAP组与对照组无统计学差异(P>0.05);②相关分析显示血清sCD40L水平与hs?CRP呈正相关(r=0.787，P<0.001);③SAP和ACS组PCI术后血清hs?CRP、sCD40L水平均较术前显著升高(P<0.01)。结论ACS组患者血清hs?CRP、sCD40L水平显著增高，提示冠心病的不稳定状态，可能有助于临床识别和预测ACS。

【关键词】  急性冠状动脉综合征;超敏C反应蛋白;可溶性CD40配体;炎症

　　ABSTRACT：Objective To observe the clinical significance of serum high?sensitive C?reactive protein(hs?CRP)and soluble CD40 ligand(sCD40L)levels in patients with acute coronary syndrome(ACS).Methods 49 patients with ACS, 27 patients with SAP,and 15 controls entered this study.The serum levels of sCD40L and hs?CRP were measured by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)and particle?enhanced immunonephelomerty respectively.Results ① The serum levels of hs?CRP and sCD40L were higher in ACS group than those of SAP group and control group (P<0.01), while no significant difference was found between SAP group and control group(P>0.05).② The serum level of hs?CRP was significantly correlated with that of sCD40L(R=0.787，P<0.001).③ In both ACS group and SAP group, the levels of hs?CRP and sCD40L after percutaneous transluminal coronary intervention(PCI) were elevated significantly compared with those before PCI (P<0.01).Conclusion Significant increase of serum hs?CRP and sCD40L levels suggestes the unstable condition of coronary heart disease, and might be considered suitable markers for identifying and predicting ACS.

　　KEY WORDS：Acute coronary syndrome(ACS);hs?CRP; soluble CD40 ligand(sCD40L); inflammation

　　炎症反应导致冠状动脉内皮损伤、促使不稳定斑块形成并破裂、引起血栓形成是急性冠状动脉综合征(ACS)发生的重要机制[1]。细胞因子在冠状动脉急性病变的病理过程中起重要促进作用，其中CD40信号转导途经是一种重要调节机制[2]。近年的体内外研究[3]发现 CD40 和CD40配体(CD40L )在动脉粥样斑块中的多种细胞表达、 且 CD40 和 CD40L信号途径介导的一系列生物学效应如分泌细胞因子、黏附分子、基质金属蛋白酶和组织因子等可能参与 ACS 的发生和。超敏 C 反应蛋白 (high?sensitivity C?reactive protein，hs?CRP) 被认为是与动脉粥样硬化关系最密切的炎症标志物之一[2,4]。现阶段研究不仅已证实 hs?CRP在动脉粥样硬化中的存在，而且已证实其参与动脉粥样硬化的致炎过程。hs?CRP在心血管病中的预测价值已在最近的大型meta分析中得到证实[5~7]，而可溶性CD40配体(sCD40L)是否具有预测性价值尚待更深入研究。本研究观察不同类型冠心病患者血清sCD40L与hs?CRP水平变化，进一步探讨其临床意义。

　　1 材料与方法

　　1.1 研究对象

　　76例来自西南心血管内科2006年11月至2007年4月住院并经冠状动脉造影(CAG)确诊的冠心病患者，其中ACS组49例(其中42例行PCI术)、SAP组27例(25例行PCI术)。对照组15例来自体检自愿者。所有入选患者均详细记录病史、常规体检并行心电图、血常规、肝肾功、血脂、血糖等检查，均无统计学差异。

　　冠心病诊断以WHO标准为依据。有下列任一情况者未入选：①各种感染性疾病、自身免疫性疾病、心肌病、心肌炎、肿瘤、严重肝肾功能障碍、创伤、手术等。②院外已用阿司匹林、他汀类、氯吡格雷、血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂等药物者。③既往有PCI史。

　　1.2 标本采集和处理

　　对照组一次性抽取肘静脉血5ml;所有入选的冠心病患者均于入院后、服药前抽取静脉血一次，所有行PCI67例患者于PCI术后8、24h再两次抽取静脉血。所有静脉血标本均保存于抗凝管中，室温放置30min标本凝固后，离心3000rpm×10min，提取上清液Eppendorf管保存于-20℃冰箱中备用。

　　1.3 标本检测

　　sCD40L的检测采用夹心法酶联免疫吸附测定分析(enzyme?linked immunosorbent assay ，ELISA)，sCD40L酶联免疫试剂盒由武汉博士德生物工程公司提供，按照试剂盒说明严格操作，Multiskan EX标准酶标仪测定OD.值，用Curve Expert 1.3软件得出标准曲线方程，代入OD.值，求样品浓度。

　　hs?CRP的检测采用微粒子增强透射免疫分析法。hs?CRP 试剂盒、标准液、质控液均由芬兰 Orion 公司提供，严格按照试剂盒说明操作在OlympusAU 2700 全自动生化分析仪上完成检测。

　　1.4 统计学分析

　　数据以±s表示，采用SPSS10.0 统计学软件，多组间均数比较采用方差分析和LSD检验，两组间均数比较采用配对资料的t 检验。相关分析采用pearson相关分析。

　　2 结 果

　　2.1 血清hs?CRP、sCD40L水平组间比较

　　各组血清hs?CRP、sCD40L水平(PCI术前值)见表1。可见ACS组血清hs?CRP水平高于SAP 组及对照组(P<0.01);SAP组与对照组比较无统计学差异。血清sCD40L水平变化类似于血清hs?CRP的变化：在ACS组显著增高(P<0.01)，SAP组与对照组无统计学差异。表1 各组血清hs?CRP、sCD40L水平比较将血清sCD40L浓度和hs?CRP浓度进行线性分析(图1)，结果两者呈正相关(r=0.787，P<0.001)。

　　67例(SAP组25例，ACS组42例)行PCI患者手术前后血清hs?CRP及sCD40L浓度变化见表2、3。两组患者术后8h、24h血清hs?CRP、sCD40L水平均较术前显著升高(P<0.01)，术后24h与术后8h比较，无统计学差异。表2 SAP组PCI术前后血清hs?CRP及sCD40L浓度变化表3 ACS组PCI术前后血清hs?CRP及sCD40L浓度变化

　　3 讨 论

　　ACS是冠状动脉粥样硬化斑块状态突然发生改变，如斑块破裂、血栓形成等，导致冠状动脉血流受阻程度急剧加重引起的临床综合征，是临床上冠心病患者死亡和预后不良的重要原因。

　　大量前瞻性研究表明，在健康人群、已确诊为心血管疾病者和进行PCI者中，hs?CRP 水平可预测短期和长期预后，有助于识别可能发生心血管事件的高危患者[8]。Ridker等[9]发现，hs?CRP在AMI患者中显著升高,对心血管事件有很强的预测作用。本研究也发现，ACS患者血清hs?CRP水平显著升高，而SAP组与对照组比较无差异，进一步证实hs?CRP高表达预示冠脉病变不稳定，对ACS有预测意义。

　　CD40?CD40L 在细胞免疫和体液免疫中是一条重要的细胞信号转导途径，多种细胞因子可以促进人内皮细胞、单核细胞表达CD40、CD40L。而易损斑块中存在活化的T 淋巴细胞，后者产生细胞因子INF和TNF 等，激活巨噬细胞、内皮细胞和平滑肌细胞高表达CD40L。CD40L与CD40作用，促进炎症介质释放，促使组织因子表达，激活凝血瀑布而促进血栓形成。CD40L的水解产物sCD40L也有类似的促炎症作用与促血栓形成作用。在动物实验[10]中，应用CD40L 的特异性抗体可显著减缓斑块的形成、稳定粥样斑块，因此，CD40? CD40L在 ACS 的发生和斑块不稳定过程中起着重要作用。本研究发现，ACS组血清sCD40L水平显著升高，提示sCD40L在易损斑块形成、ACS发生的机制中具有重要作用。同时，血清sCD40L浓度与hs?CRP浓度高度正相关，提示两者联合可能预测ACS及斑块稳定与否。

　　Yan等[11]对PCI患者术后进行6个月随访研究发现，发生再狭窄的患者术前血小板CD40?CD40L共表达及血清sCD40L水平均高于未发生再狭窄的患者(均P<0.01)。本研究发现，接受PCI的患者术后8h、24h血清hs?CRP、sCD40L水平较术前显著升高，术后24h与术后8h比较无统计学差异，推测PCI患者术后血清hs?CRP、sCD40L浓度升高与支架植入或球囊扩张过程中粥样斑块释放局部的炎症因子有关。术前术后hs?CRP、sCD40L高表达是否对远期预后有预测意义，其机制是什么，局部的活动性炎症状态是否在再狭窄的发生机制中起作用，尚需更长随访时间、更深入的研究。

【】
  　　[1]Ross R.Atherosclerosis?an inflammatory disease[J].N Engl J Med,1999,340(2):115

　　[2]Sibel Guldiken,Muzaffer Demir,Ender Arikan,et al.The levels of circulating markers of atherosclerosis and inflammation in subjects with different degrees of body mass index: Soluble CD40 ligand and high?sensitivity C?reactive protein[J].Thrombosis Research,2007,119: 79

　　[3]Hoong SL,Muzahir HT,Kiat TT,et al.Is soluble CD40 ligand a mediator of angiogenesis in patients with coronary artery disease[J].Thrombosis Research,2008,122:307

　　[4]Orzewski J,Torzewski M,Bowyer DE,et al.C?reactive protein frequently colocalizes with the terminal complement complex in the intima of early atherosclerotic lesions of human coronary arteries[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,1998,18(9): 1386

　　[5]Ernst E,Resch KL.Fibrinogen as a cardiovascular risk factor: a meta?analysis and review of the literature[J].Ann Intern Med,1993,118(12):956

　　[6]Danesh J,Collins R,Appleby P,et al.Association of fibrinogen,C?reactive protein,albumin,or leukocyte count with coronary heart disease: meta?analyses of prospective studies[J].JAMA,1998,279(18):1477

　　[7]Danesh J,Wheeler JG,Hirschfield GM,et al.C?reactive protein and other circulating markers of inflammation in the prediction of coronary heart disease[J].N Engl J Med,2004,350(14):1387

　　[8]Naghavi M,Libby P,Falk E,et al.From vulnerable plaque to vulnerable patient: a call for new definitions and risk assessment strategies: Part II[J].Circulation,2003,108(15):1772

　　[9]Ridker PM,Hennekens CH,Buring JE,et al.C?reactive protein and other markers of inflammation in the prediction of cardiovascular disease in women[J].N Engl J Med,2000,342(12):836

　　[10]Schonbeck U,Sukhoba GK,Shimizu K,et al.Inhibition of CD40 signaling limits evolution of established atherosclerosis in mice[J].Proc Natl Acad Sci USA,2000,97(13):7458

　　[11]Yan JC,Ding S,Liang Y,et al.Relationship between upregulation of CD40 system and restenosis in patients after percutaneous coronary intervention[J].Acta Pharmacol Sin,2007,28(3):339