乳腺癌原代细胞培养及化疗药敏的研究

                 作者：赵秀芳 王金科 张晓丽 薄爱华

【摘要】  目的：通过对乳腺癌原代细胞培养，检测化疗药物对癌细胞的抑制率，探讨乳腺癌不同组织学类型、年龄及淋巴结转移情况对化疗药物的敏感性。方法：收集109例手术切除新鲜乳腺癌标本，进行原代细胞培养，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测癌细胞对三组抗癌药物的敏感性。结果：乳腺癌的敏感率由高到低依次为CAF（33.0%）、TA（31.2%）和CMF（26.6%）。无论年龄、组织学类型及是否有淋巴结转移各组间比较其敏感性均无显著差异（P＞0.05）。结论：1.MTT法对乳腺癌时选择化疗药物具有重要价值；2.乳腺癌细胞对CAF、TA、CMF敏感。

【关键词】  乳腺癌；MTT法；化疗药物；敏感率

    【ABSTRACT】  Objective： To investigate the chemosensititivity of three vinds chemotherapeutic drug groups on different the histologic types, age and lymph node metastasis status of breast carcinoma by the primary culture of breast cancer cell.Methods: Fresh samples from 109 patients with breast cancer were obtained during operation. The breast cancer cells were cultured in primary to test the 3 groups drugs sensitivity by MTT method.Results:The sensitivity rates of the breast cancer were (from high to low ) CAF(33.0%), TA(31.2%) and CMF(26.6%).There was no significant difference in sensitivity（P＞0.05） among the age groups, the histologic type groups and the lymph node metastasis groups.Conclusion:To choose chemotherapeutic drugs by MTT assay has important significance in treating breast cancer. The breast cancer cells are sensitive to CAF,TA and CMF, but no significance.

    【KEY WORDS】  Breast cancer;MTT method; Chemotherapy Drug; Sensitivity

    乳腺癌化疗是多学科综合治疗的重要方法之一，尤其是浸润性癌在手术前化疗能缩小原发灶，控制癌组织转移，降低复发率，术后化疗可以改善生活质量，提高生存率[1]，因此如何提高化疗的疗效及降低不良反应成为当前医学界关注的热点之一。我们采用MTT法检测了109例乳腺癌原代细胞对临床常用的三组联合化疗方案的敏感性，现报告如下。

    1  材料与方法

    1.1  一般资料  109例乳腺癌均为女性患者，选自我院2004.10～2005.12月临床术中切除送检新鲜癌组织，并均经病理形态学和免疫组织化学证实；术前均无使用抗癌药物史；年龄24～72岁，平均年龄49.5岁，其中＜40岁19人，41～50岁42人，＞51岁48人。病理组织学分类：浸润性导管癌79例，浸润性小叶癌17例，髓样癌13例。109例中伴有淋巴结转移64例，不伴淋巴结转移45例。

    1.2  抗癌药物及试剂  选择临床常用的三组联合化疗方案，分别为CAF：环鳞酰胺（CTX）+阿霉素（ADM）+5?氟尿嘧啶（5?FU）；CMF：环鳞酰胺（CTX）+氨甲喋呤（MTX）+5?氟尿嘧啶（5?FU）；TA：紫杉醇（T）+阿霉素（ADM）。四甲基偶氮唑盐（methylthiazoly tetrazclium MTT）为美国Sigma公司产品，用于鉴别乳腺浸润性导管癌和小叶癌的免疫组化试剂盒和DAB显色剂由北京中山生物技术公司提供。

    1.3  MTT法及判定标准  将新鲜乳腺癌组织在无菌条件下快速置于培养液并接种于96孔培养板中，分别加入三组化疗药物，另设对照组，培养48h后加入MTT试剂，4h后用酶标仪测各孔的光密度（Optical Density，OD）值。出对癌细胞的抑制率（inhibition rate，IR），公式：IR=（1- 加药孔OD值 对照孔OD值）×100%，评价标准：IR≥30%为敏感，IR≤30%为不敏感。

    1.4  本组资料经SPSS 13.0统计软件处理，采用χ2检验。