松花粉对砷中毒大鼠的防护作用

            作者：罗艳红，黄晓敏，韦文龙，龚厚文，陆兰芬，韦玉脉，韦耀东 

【摘要】  目的 通过研究松花粉对砷中毒大鼠的血砷含量、血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性的影响，来检测松花粉对砷中毒大鼠的防护作用。方法 将54只SD大鼠随机分为3组：即正常对照组、组、中毒对照组。正常对照组饮用蒸馏水；治疗组、中毒对照组均隔天注射NaAsO2（8mg/kg）进行砷染毒，治疗组在砷染毒第15天后开始用松花粉灌胃（6.25g/kg）。至第45天，分别测各组血清中坤含量及GSH-PX活性。结果 治疗组与正常对照组相比，两项指标差异均有显著性（P<0.05）。与中毒对照组比，两项指标差异有显著性（P<0.05）。结论 松花粉能降低血砷含量，能提高GSH-PX活性，它有排血砷，提高抗氧化能力作用。

【关键词】  松花粉；砷中毒；大鼠

　　砷（Arsenic，As）和砷化物有剧毒，在、农业和医药上用途很广，开采或应用过程均可导致一定程度的砷污染。水砷、燃煤砷含量高是地方性砷中毒的主要来源，而成为全世界共同的难题。
   
　　目前我国地方性砷中毒人群主要分布在１０个省（区）、３２个县（市），约２６７万人。因此，研究松花粉对砷中毒的防护具有深远的现实意义。松花粉是一种保健食品，其在保护心脑血管、抗疲劳、治疗皮肤病等方面已有报道［1，2］。笔者采用亚砷酸钠致使大鼠中毒，然后给大鼠灌服松花粉，以验证松花粉在排解血砷、保护机体方面的作用。

　　1  材料与方法

　　1.1  试剂  亚砷酸钠，分析纯，购自上海试剂总厂第四分厂；谷胱甘肽过氧化物酶试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

　　1.2  药品  国珍松花粉购自新时代公司。

　　1.3  动物分组  雌性SD大鼠54只（购于广西医科大学实验动物部），均为12周龄，体重160g左右，普通（清洁）级。将大鼠分为正常对照组、治疗组与中毒对照组3组，每组18只。

　　1.4  染毒和治疗  正常对照组，自行饮用蒸馏水；治疗组、中毒对照组用亚砷酸钠染毒，8mg/kg体重隔天腹腔注射［3］。15天后，治疗组的大鼠用国珍松花粉（6.25g/kg体重）持续灌胃治疗，至第45天处理各组动物。

　　1.5  喂养观察  每日用普通饲料喂养（动物室提供）。观察记录大鼠进食、活动、反应、粪便、皮毛、死亡情况等。

　　1.6  采样和检测方法及仪器  剪颈动脉取血制血清，测定血砷及血清谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione Peroxidase，GSH-PX）。GSH-PX测定，按试剂盒说明书操作。仪器：722型分光光度计，日本日立Z-7000型偏振塞曼原子吸收分光光度计。

　　1.7  统计方法  数据以±s表示，采用t检验。

　　2  结果

　　2.1  一般情况  亚砷酸钠腹腔注射的两组大鼠，2天后，毛开始脱落，腹部注射处变黑，1周开始溃烂，其中，未给松花粉的中毒组，溃烂程度大，有时见肠，至45天时，有死亡现象。

　　2.2  观察指标  血砷测定结果，正常对照组最低，治疗组稍高，中毒对照组最高。GSH-PX的测定结果也呈梯度变化，即正常对照组最高，治疗组其次，中毒对照组最低，见表1。

　　表1  3组大鼠血砷、GSH-PX的测定（略）

　　a：同正常对照组比较，t=3.24，P<0.05；与中毒对照组比较，t=6.58，P<0.05；b：同正常对照组比较，t=2.23，P<0.05；与中毒对照组比较，t=2.23，P<0.05

　　3  讨论
    　　
　　砷中毒小鼠表现出严重的全身症状。巯基（-SH）是许多酶的必需基团，此基团被毒物结合后引起蛋白质功能丧失，巯基蛋白和巯基酶是含有作为必需基团巯基（-SH）这类蛋白质（或酶）的总称，其分布广泛，遍及全身每个组织器官的细胞生物膜及膜内基质，体内糖代谢、脂代谢、蛋白质代谢等过程的许多酶都是巯基酶，因而受到不同程度的抑制而造成代谢障碍，因此砷作为巯基酶抑制剂可引起全身系统出现相应的症状及体征。但某些系统表现较为严重突出，如中毒后消化系统功能减退，食欲差，表皮组织毛发疏松、脱毛，皮肤角化，增厚，粗糙，活动减少，反应迟钝，甚至死亡［4］。本次实验结果示砷中毒后这些症状明显，正常对照组无此表现。而由结果可知，松花粉具有一定的防皮肤溃烂及抵抗砷中毒死亡的作用。
      
　　松花粉能使砷中毒的大鼠血砷降低，说明它有排解血砷的作用。这可能是松花粉促进砷从泌尿系统及消化系统排出，从而降低砷在大鼠体内积蓄。同时它使治疗组GSH-PX与正常对照组接近，说明它有保护酶处于还原状态的作用。因砷作用于巯基酶，使酶氧化，从而降低酶活性，易于使酶失活和使机体衰老。而GSH-PX催化以下反应：

　　H2O2+2GSHGSH-PX     2H2O+GSSH
   
　　GSH-PX活力越高，说明消除体内H2O2越多，保护酶不被自由基氧化，GSH-PX活力越低，说明消除体内H2O2越少，酶易被自由基氧化。
   
　　综上所述，国珍松花粉具有保护酶活性，延缓机体衰老，降低血砷的作用。其机理可能是：①稳定生物膜，减少自由基产生；②解除砷与巯基酶的结合，恢复酶的活性，维持细胞的正常代谢；③刺激机体产生GSH，增强机体清除自由基能力，从而提高机体的抗氧化性。本次实验结果可为临床上砷中毒的辅助治疗提供。

【参考】
  　　［1］ 腾艳华，张红.松花粉与人类健康［M］.北京：轻出版社，2004.

　　［2］ 赵霖.松花粉—人类的天然保健品［J］.家庭导报生活周刊，2005：12-06.

　　［3］ 韦耀东，陈婉兰，邓如平，等.亚急性砷中毒对大白鼠部分生化指标的影响［J］.右江民族医学院学报，2004，26（5）：630-632.

　　［4］ 梁淑英，张树球，周国荃，等.海尔福对砷中毒小鼠疗效的实验研究［J］.中国地方病防治杂志，2004，19（3）：149-150.