垂直喉部分切除术后喉狭窄瘢痕组织中细胞外基质的变化及意义
【摘要】 研究喉狭窄瘢痕组织的病理变化， 了解细胞外基质的变化及意义。【方法】 垂直喉部分切除术后２ ～ ３月出现瘢痕性喉狭窄１０例喉瘢痕组织、非狭窄１６例喉瘢痕组织为实验组及１０例声带组织为对照组，分别进行Ｇｏｍｏｒｉ?蒺ｓ醛品红法染色、Ｖａｎ Ｇｉｅｓｏｎ（Ｖ．Ｇ）染色、苦味酸-天狼猩红染色及免疫组化染色，并在ＫＯＮＴＲＯＮ ＩＢＡＳ ２．５全自动图像分析系统下观察和阳性面积。【结果】 喉狭窄瘢痕组织中，细胞外基质排列紊乱。与非狭窄喉瘢痕组织、声带组织比较，喉狭窄瘢痕组织中，胶原纤维含量（０．５１２ ± ０．０５２）、Ⅰ型胶原纤维含量（０．３７６ ± ０．０１５）及纤维连接蛋白表达量（０．４７２ ± ０．０３３）明显增多，Ⅰ／Ⅲ型胶原纤维比值（３．３２ ± ０．２７）明显增大，差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。与声带组织比较，喉狭窄瘢痕组织中，弹力纤维含量（０．２１３ ± ０．０２１）明显减少，差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 喉狭窄瘢痕组织中，胶原纤维和纤维连接蛋白等细胞外基质大量沉积。胶原纤维及弹力纤维含量、形态、排列改变，Ⅰ、Ⅲ型胶原数量和比例变化，可能与喉狭窄喉腔弹性差，喉瘢痕僵硬有关。纤维连接蛋白高表达可能与喉狭窄的瘢痕组织过度增生有关。
【关键词】 垂直喉部分切除术 喉狭窄 瘢痕 病
Ａｂｓｔｒａｃｔ： 【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】 Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ ｉｎ ｔｈｅ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｔｅｎｏｓｉｓ ｓｃａｒ ｂｙ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｔｅｎｏｓｉｓ ｓｃａｒ． 【Ｍｅｔｈｏｄｓ】 Ａｔ ２ ｔｏ ３ ｍｏｎｔｈｓ ａｆｔｅｒ ｖｅｒｔｉｃａｌ ｐａｒｔｉａｌ ｌａｒｙｎｇｅｃｔｏｍｙ， ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｔｅｎｏｓｉｓ ｓｃａｒ ｏｃｃｕｒｒｅｄ． Ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｔｅｎｏｓｉｓ ｇｒｏｕｐ ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ １０ ｈｕｍａｎ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ ｏｆ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｃａｒ ａｎｄ １６ ｈｕｍａｎ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ ｏｆ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｃａｒ ｗｉｔｈ ｎｏｎ-ｓｔｅｎｏｓｉｓ， ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ １０ ｃａｓｅｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｖｏｃａｌ ｆｏｌｄｓ． Ｃｏｌｌａｇｅｎ ｆｉｂｅｒｓ ａｎｄ ｅｌａｓｔｉｃ ｆｉｂｅｒｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ Ｇｏｍｒｏｒｉ?蒺ｓ ａｌｄｅｈｙｄｅ-ｆｕｃｈｓｉｎ ａｎｄ Ｖａｎ Ｇｉｅｓｏｎ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｔｉｓｓｕｅ ｓｅｃｔｉｏｎｓ． Ｔｙｐｅｓ Ⅰ ａｎｄ Ⅲ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｉｎ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗｅｒｅ ａｓｓｅｓｓｅｄ ｂｙ ｐｉｃｒｉｃ-ｓｉｒｉｕｓ ｒｅｄ ｐｏｌａｒｉｍｅｔｒｙ ｓｔａｉｎｉｎｇ． Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｆｎ ｗａｓ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｓｔａｉｎｉｎｇ． Ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ ｗｉｔｈ ＫＯＮＴＲＯＮ ＩＢＡＳ ２．５ ａｕｔｏｍａｔｉｃ ｉｍａｇｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｙｓｔｅｍ． 【Ｒｅｓｕｌｔｓ】 Ｉｎ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｔｅｎｏｓｉｓ ｓｃａｒ ｔｉｓｓｕｅｓ， ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ ｗａｓ ａｒｒａｎｇｅｄ ｄｉｓｏｒｄｅｒｌｙ． Ｔｈｅ ｄｅｎｓｉｔｙ ｏｆ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｆｉｂｅｒｓ （０．５１２ ± ０．０５２）， ｔｙｐｅⅠｃｏｌｌａｇｅｎ ｆｉｂｅｒｓ （０．３７６ ± ０．０１５） ａｎｄ Ｆｎ （０．４７２ ± ０．０３３） ｉｎ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｔｅｎｏｓｉｓ ｓｃａｒ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈａｔ ｉｎ ｎｏｎ-ｓｔｅｎｏｓｉｓ ｔｉｓｓｕｅｓ ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｖｏｃａｌ ｆｏｌｄｓ ｔｉｓｓｕｅｓ； ｔｈｅ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ ｔｙｐｅⅠａｎｄ Ⅲ ｃｏｌｌａｇｅｎ （３．３２ ± ０．２７） ｉｎ ｔｈｅ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｔｅｎｏｓｉｓ ｓｃａｒ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ （Ｐ﹤０．０５）． Ｔｈｅ ｄｅｎｓｉｔｙ ｏｆ ｅｌａｓｔｉｃ ｆｉｂｅｒｓ （０．２１３ ±０．０２１） ｉｎ ｔｈｅ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｔｅｎｏｓｉｓ ｓｃａｒ ｔｉｓｓｕｅｓ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ （Ｐ﹤０．０５）． 【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ】 Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｏｖｅｒ ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ ｉｎ ｔｈｅ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｔｅｎｏｓｉｓ ｔｉｓｓｕｅ． Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｃｏｎｔｅｎｔｓ， ｓｈａｐｅ， ｒａｎｇｅ ｉｎ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｆｉｂｅｒｓ ａｎｄ ｅｌａｓｔｉｃ ｆｉｂｅｒｓ， ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｑｕａｎｔｉｔｙ ａｎｄ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｉｎ ｔｙｐｅⅠ， Ⅲ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｆｉｂｅｒｓ ｍａｙ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｌａｒｙｎｘ ｃａｖｉｔｙ ｅｌａｓｔｉｃｉｔｙ ｗｅａｋｅｎｉｎｇ ａｎｄ ｌａｒｙｎｘ ｓｃａｒ ａｎｋｙｌｏｓｉｓ ｏｆ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｔｅｎｏｓｉｓ． Ａｎｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｆｎ ｍａｙ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ ｏｆ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｅｎｏｉｓｉｓ ｓｃａｒ ｔｉｓｓｕｅｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｖｅｒｔｉｃａｌ ｐａｒｔｉｃａｌ ｌａｒｙｎｇｅｃｔｏｍｙ； ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｓｔｅｎｏｓｉｓ； ｓｃａｒ／ｐａｔｈｏｌｏｇｙ； ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｍａｔｒｉｘ
手术创伤引起喉内瘢痕过度增生，导致喉狭窄是喉外科手术常见的并发症，虽然发病率不高，但临床处理较困难。对其发生原因，多数学者认为与喉肿瘤范围广、喉支架大块缺损、喉腔组织大范围损伤而又修复不良有关。但临床上亦发现有部分喉癌患者喉支架缺损不大，术后可拔除气管套管但一段时间后又出现喉狭窄，可能与喉内瘢痕肉芽组织过度增生有关［１，２］，其危险因素包括：呼吸道感染、糖尿病、术后放疗等［２］。针对该种情况，我们之前进行相关基础研究，证实喉狭窄喉组织中存在肉芽瘢痕过度增生的病理因素［３-５］。本研究通过对垂直喉部分切除术后喉腔创面愈合不同转归（非狭窄与狭窄）的喉腔瘢痕组织病理学的研究，从喉瘢痕组织形成的病理学角度去探索形成瘢痕的机理，初步了解细胞外基质在喉部分切除术后瘢痕性喉狭窄的发病过程中作用。
１ 材料与方法
１．１ 临床资料
１．１．１ 病例入选标准
①非狭窄组：声门型喉癌Ｔ２期患者行垂直喉部分切除术，单侧胸骨舌骨肌瓣重建喉腔； 术后均成功拔管；随访期间未出现喉狭窄。②喉狭窄组：声门型喉癌Ｔ２期患者行垂直喉部分切除术，单侧胸骨舌骨肌瓣重建喉腔； 术后１月成功拔管，术后２ ～ ３月时出现进行性呼吸困难，需重新行气管切开，喉狭窄组织病理活检排除癌复发。内镜和影像学发现喉腔瘢痕肉芽堵塞，喉腔狭窄。③对照组：１０例双声带麻痹行声带切除患者。
１．１．２ 临床及病理特征
①非狭窄组：中山大学附属第一耳鼻咽喉科医院２００３年４月－２００５年４月间收治的１６例符合入选标准的喉部分切除术患者，所有患者均为首次手术，术前术后未做过放疗和化疗，无远处转移，年龄４６ ～ ７１岁，平均年龄５９岁，病理类型：高分化鳞癌１１例，中分化鳞癌５例。按照ＵＩＣＣ１９９７年ＴＮＭ分类和分期法对本组病例进行分期，Ｔ２Ｎ０Ｍ０ １３例，Ｔ２Ｎ１Ｍ０ ３例。随访时间为６ ～ １２月，平均１０月。②狭窄组：中山大学附属第一医院耳鼻咽喉科医院１９９４年１月－２００５年６月期间收治的符合入选标准的喉狭窄患者１０例，入选病例术前术后均未做过放疗、化疗、无远处转移，年龄４２ ～ ６９岁，平均年龄５６岁。病理类型：高分化鳞癌７例，中分化鳞癌３例，按照ＵＩＣＣ１９９７年ＴＮＭ分类和分期对１０例进行分期，Ｔ２Ｎ０Ｍ０ ８例，Ｔ２Ｎ１Ｍ０ ２例。③对照组：２００３年４月－２００５年４月收治外院行甲状腺手术误伤双侧喉返神经麻痹致呼吸困难，须行声带切除术病例。
１．２ 标本提取及保存
①对照组：取自双声带麻痹患者行声带切除术的１０例组织蜡块；②非狭窄组：喉部分切除术后２ ～ ３月，喉镜下钳取喉腔创面瘢痕肉芽组织（创面边缘、中央２－３处钳取）， 经４０ ｇ／Ｌ甲醛常规固定，石蜡包埋，储存备用；③狭窄组：喉部分切除术后２ ～ ３月出现瘢痕性喉狭窄，支撑喉镜或电子喉镜送检的瘢痕肉芽组织，经４０ ｇ／Ｌ甲醛常规固定，石蜡包埋，储存备用。
１．３ 弹力纤维、胶原纤维及Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的检测
１．３．１ 弹力纤维及胶原纤维染色
石蜡组织切片厚５ μｍ，常规脱蜡至水，蒸馏水清洗。切片上滴染Ｇｏｍｏｒｉ?蒺ｓ醛品红染色液或切片上滴染Ｖａｎ Ｇｉｅｓｏｎ液，蒸馏水洗２次。无水乙醇脱水，二甲苯透明和中性树胶封固，光镜下观察。
１．３．２ Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维染色
石蜡切片厚５ μｍ， 常规脱蜡至水，３７ ℃下苦味酸天狼猩红溶液中浸染１ ｈ，流动的自来水冲洗５ ｍｉｎ，苏木精复染５ ～ １０ ｍｉｎ，透明，封片。在暗视野条件下用偏振光显微镜观察。
１．４ 免疫组化检测组织中纤维连接蛋白（Ｆｎ）的表达
①一抗试剂： 纤维连接蛋白（Ｆｎ）兔抗人多克隆抗体， ＲＡＢ-００７１，购自福建迈新生物公司。②ＳＰ法免疫组化检测试剂盒，产品编号ＫＩＴ-９７１０，购于福建迈新生物公司。③ＳＰ免疫组化方法：组织石腊切片，厚５ μｍ， ６０ ℃恒温箱内烤片１ｈ。脱蜡和水化，蒸馏水清洗。抗原修复： 高温高压修复法处理。置于３０ ｍＬ／Ｌ Ｈ２Ｏ２溶液中室温下孵育３０ ｍｉｎ，以去除内源性过氧化物酶活性。ＰＢＳ液洗。滴加正常山羊血清封闭，３７ ℃孵育１０ ｍｉｎ。滴加一抗，４ ℃过夜，ＰＢＳ清洗。滴加二抗（生物素化羊抗鼠抗体），３７ ℃孵育２０ ｍｉｎ，ＰＢＳ清洗。加三抗链霉菌抗生物蛋白——过氧化物酶溶液，３７ ℃孵育２０ ｍｉｎ，ＰＢＳ清洗。ＤＡＢ显色剂显色。苏木素复染，片烤干，中性树胶封片，光镜下观察。
１．５ 检测结果的观察及半定量分析
取上述染色的组织切片，每张切片随机于固有层取８幅视野，采用全自动图像分析仪对弹力纤维、胶原纤维、Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维及Ｆｎ进行半定量分析，于２００倍显微镜下分析其各自的阳性相对面积（阳性面积／ 统计场总面积），统计场总面积为４４ ７８３ μｍ２。
１．６ 统计学处理
计量数据用均数±标准差（ｘ±ｓ）表示；多个样本均数比较采用ＡＮＯＶＡ和ＳＮＫ-ｑ检验，Ｐ﹤０．０５表示差异具有统计学意义，统计在ＳＰＳＳ１１．０软件下完成。
２ 结 果
２．１ 弹力纤维、胶原纤维观察及半定量分析
对照组弹力纤维染色呈紫黑色，位于上皮下固有层，呈波浪状，排列整齐（图１Ａ）；胶原纤维染色浅红色，位于上皮下固有层，排列整齐。非狭窄组弹力纤维染色浅量少，排列紊乱，呈片状；胶原纤维红染，量多，排列乱，呈团块状或条索状（图２Ａ）。喉狭窄组弹力纤维染色呈紫黑色，量少，排列不规则，团状，旋涡状（图１Ｂ）；胶原纤维深染，量多，漩涡状或年轮状，排列致密（图２Ｂ）。半定量分析及比较见表１，可见喉狭窄瘢痕组织中，胶原纤维含量明显高于对照组和非狭窄组（Ｐ ＜ ０．０５），弹力纤维含量则明显低于对照组（Ｐ ＜ ０．０５）。
２．２ Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维观察及半定量分析
偏振光显微镜观察，波纹状长纤维，呈红色，具有很强的双折光性，为Ⅰ型胶原纤维； 在Ⅰ型胶原纤维束的周围区域，散在的、显示弱的双折光黄绿色细纤维，呈疏网状分布，为Ⅲ型胶原纤维。
对照组：固有层有波浪状排列的Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维，密度疏松。两种纤维相互交织一起。非狭窄组：Ⅰ型胶原纤维量多，Ⅲ型胶原纤维量少，排列不规则，疏松（图３Ａ）。喉狭窄组：Ⅰ型胶原纤维较Ⅲ型胶原纤维量明显多，排列不规则，团状，旋涡状，两者相互重叠，不能完全分开（图３Ｂ）。半定量分析及比较见表２。可见喉狭窄瘢痕组织中，Ⅰ型胶原纤维含量明显高于对照组和非狭窄组（Ｐ ＜ ０．０５）， Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的比值大于对照组和非狭窄组（Ｐ ＜ ０．０５）。
２．３ Ｆｎ的表达
Ｆｎ阳性染色表现为间质呈黄色纤维网状，细胞胞浆、胞膜棕黄色。对照组：间质、基底细胞和成纤维细胞有少量阳性信号。非狭窄组： Ｆｎ表达位于间质，小血管为中心周围分布，成纤维细胞、内皮细胞胞浆胞膜阳性染色（图４Ａ）。 喉狭窄组： 大量Ｆｎ表达位于间质，网格状分布。成纤维细胞胞浆胞膜可见阳性染色（图４Ｂ）。半定量分析及比较见表３ ，可见喉狭窄瘢痕组织中，纤维连接蛋白表达量明显高于对照组和非狭窄组（Ｐ ＜ ０．０５）。
３ 讨 论
３．１ 胶原纤维、弹力纤维与喉狭窄
弹力纤维和胶原纤维是喉腔主要功能成分，对固有层的生物机械性能起着举足轻重的作用［６］。正常喉腔黏膜的弹力纤维主要存在黏膜固有层中，由于弹力纤维富有弹性，被拉长５０％～１００％之后仍能恢复原状，因此，它能赋予喉腔良好的弹性。在喉黏膜固有层，弹力纤维的机械性能与胶原纤维互为补充，当喉腔扩大时，波浪形的胶原纤维伸直，弹力纤维则被牵引拉长，处于蓄能状态，胶原纤维的抗拉可以防止弹力纤维过分牵张，当除去外力时，弹力纤维便立即能被变形并恢复到原来状态。
本研究结果表明，喉狭窄瘢痕组织中胶原纤维无论含量还是形态、排列，都与正常喉腔组织胶原纤维有区别。喉狭窄瘢痕组织中，胶原纤维排列致密、杂乱。胶原纤维含量明显增多， 与非狭窄喉瘢痕组织、正常喉腔组织比较，差异均有统计学意义。既往研究已证明，胶原纤维的多少、粗细及排列直接地影响着器官的力学性质［７］。因此，我们认为，喉狭窄瘢痕组织中大量胶原纤维沉积和其形态、排列改变，致使喉腔韧性差，喉腔瘢痕僵硬度增加，可能是导致喉狭窄发生的重要因素。
本研究结果表明，喉狭窄组喉瘢痕组织中弹力纤维排列紊乱，卷曲，没有方向性，弹力纤维含量明显减少。喉狭窄组织中，无论含量还是形态、排列，都远未能恢复至正常喉腔弹力纤维特性。因此，我们认为，喉狭窄喉腔弹性功能较正常喉腔弹性差，弹力纤维含量、形态、排列改变是其中一个重要原因。
３．２ Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维与喉狭窄
不同的胶原分子类型及比例组成的胶原纤维具有不同的物理性质，Ⅰ型胶原纤维有很强的张力，Ⅰ型胶原纤维量决定组织的僵硬度。Ⅲ型胶原纤维富有伸展性，具有可曲性与柔韧性的一类胶原，Ⅰ／Ⅲ型胶原比值变化，可导致组织顺应性改变，Ⅰ／Ⅲ型胶原比值升高，将使组织僵硬并失去弹性［８-１０］。因此，Ⅰ、Ⅲ型胶原之间保持适当数量和比例对维持组织正常结构和功能具有重要意义。
本研究结果显示，喉狭窄瘢痕组织中，Ⅰ型胶原纤维含量、Ⅰ／Ⅲ型胶原纤维比值明显高于正常喉腔组织，与非狭窄喉瘢痕组织比较，差异亦有显著意义。因此，我们认为，Ⅰ、Ⅲ型胶原数量和比例变化导致喉狭窄瘢痕组织顺应性改变，可能是喉部分切除术后喉狭窄瘢痕质地僵硬、喉腔瘢痕弹性差的重要原因。有效减少Ⅰ型胶原纤维在喉瘢痕组织中含量和降低Ⅰ／Ⅲ型胶原的比值，将是或预防创伤后喉狭窄的重要研究内容。
３．３ Ｆｎ与喉狭窄
正常组织中，Ｆｎ主要由成纤维细胞、血管内皮细胞，巨噬细胞合成和分泌，也可由血浆转化而来。Ｆｎ是细胞外基质重要成分，是与创伤修复关系最密切的结构性糖蛋白。Ｆｎ在创伤修复过程中具有重要作用。既往研究表明， Ｆｎ为炎症细胞迁移提供基质和趋化信号，对成纤维细胞、上皮细胞和血管内皮细胞有趋化作用，促进其游走和铺展，调节其增殖、分化、细胞因子及整合素受体的表达，促进肉芽组织向创伤区生长，并为新基质的形成提供支架［１１］。Ｃｈａｒｌｅｓ等在动物实验中发现Ｆｎ的局部应用可加速大鼠背部切口愈合［１２］，俞琼等［１３］在实验中发现Ｆｎ能促进角膜创伤的愈合。Ｆｎ在创伤愈合早期出现，然后在４周至３月内消失，由胶原结缔组织代替［１４］。
本研究中，比较非狭窄喉瘢痕组织、正常喉腔组织，喉狭窄组织Ｆｎ表达明显增强。Ｆｎ是细胞赖以生存的因子，能使细胞内ｂｃｌ-２表达增加， 阻止成纤维细胞和内皮细胞的凋亡［１５］。本研究中，Ｆｎ高表达可能致使成纤维细胞和内皮细胞的凋亡速度减慢或凋亡不足或中断，成纤维细胞相对过剩，导致喉腔创面成为以过渡细胞（尤其是成纤维细胞）成分为特征的增生性瘢痕。同时，高表达Ｆｎ可能为过量肌成纤维细胞提供支架与系带作用，参与了喉腔创面收缩，引起整个增生性瘢痕组织收缩，喉腔变窄。因此，我们认为喉部分切除术后喉腔创面愈合过程中，喉瘢痕组织中Ｆｎ高表达，可能与喉腔瘢痕组织过度增生并造成喉腔狭窄有关。
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