使用自动血细胞分析仪须同时涂片镜检

【摘要】  血涂片镜检是血细胞分析检验准确可靠的必不可少的项目,使用自动分析仪技术需同时涂片镜检。检验人员要加强血涂片镜检技术的训练。

【关键词】  血细胞分析仪；血涂片；镜检

    目前由于三分类或五分类全自动分析仪的普遍使用,一些单位便不再进行涂片镜检,这样很容易造成漏检或误检。血涂片镜检一直是我科血细胞分析的必查项目。使用血细胞分析仪仅可作为全血细胞分析的一种过筛手段，而白细胞分类及血细胞形态都以血涂片镜检为准。笔者根据实践和体会，并结合国内外有关及各类教材,对其方法和程序等予以初步探讨。

　　1  资料与方法

　　1.1  资料 

　　2006年7月至2007年7月进行血细胞分析病例3 618例。

　　1.2  制作合格的血涂片的要求 

　　玻片要严格清洁处理，无油渍、接近中性；选择优质推片，两端边沿整齐、平滑；最好用静脉血，用EDTA? K2.2H2O抗凝（1.5±0.15 mg/ml全血）推制血片应在采血1 h~2 h内进行,且血液要充分混匀；末梢血要求用手指血，采血要迅速，并擦出第一滴血,量要适中，如绿豆粒大小，用优质推片从血滴前方接触血滴使血液沿推片散开，通常推片与载玻片保持25°~30°夹角,平稳地向前推进，血液即在载玻片上形成薄层血膜。血膜如蝉翼，有头、体、尾不同厚薄区域。

　　1.3  染色时注意事项 

　　将血片在空气中晃动，使其迅速扇干后,按要求进行染色(如瑞氏?姬姆萨染色)。注:必须完全干燥后才能染色。

　　1.4  血涂片镜检

　　1.4.1  先用低倍镜或高倍镜观察 

　　观察涂片全貌：染色，涂片是否合格；估计白细胞数，是否与机器结果相符［1］；观察外周血白细胞大致分布及其各类白细胞大致比例，特别要观察片尾端有无巨大及异常细胞；选择具有代表性油镜区；要求体尾交接处，有核细胞与红细胞不相重叠处。表1  计数结果血细胞分析仪（略）

　　1.4.2  油镜观察 

　　细胞形态、比例、分类计数。观察白细胞形态是否正常；有无毒性改变；有无异型淋巴细胞。观察红细胞有无大小不均、淡染区扩大等。是否发生红细胞形态改变；观察红细胞内有无异常结构：嗜碱性点彩红细胞、豪焦小体、卡波环、寄生虫等。白细胞分类计数（100个）：采用“城墙”式移动进行分类计数各类细胞的比例，观察有无核左、右移象，有无幼稚细胞、异常细胞［2］。血小板数、形态及聚集性：正常3个/视野~6个/视野；如果血细胞分析仪计数低于20×109/L，仪器计数可信度差，可通过血涂片血小板计数法报告：

    血涂片中血小板数（×109/L）=计数100个白细胞时血小板的数量/100个白细胞（×109/L）［3］。

    注：白细胞（×109/L）为血细胞分析仪计数结果。

　　2  结果

    血细胞分析病例3 618例，血涂片镜检率100%。发现轻度核左移50例，中度核左移24例，重度核左移2例，核右移10例，嗜酸细胞增高28例，单核细胞增高42例，异淋12例，红细胞大小不均，淡染区扩大病例70例，红细胞畸形2例，疟原虫1例，白细胞毒性改变5例，单核细胞空泡样改变3例。通过血涂片镜检是可以使血细胞分析的结果更加准确、可靠，更加有利于临床诊断。

　　3  典型病例

    例1：亢××，男，41岁，BC?2800血细胞分析仪结果：Hb 150 g/L,PLT 168×109/L,WBC 15.3×109/L,Lym 8%,Mid 14%,Gran 84%。涂片分类：中性粒细胞13%，淋巴细胞12%，嗜酸细胞75%，经上级诊断为嗜酸细胞增多症。例2：马××，男，36岁，BC?2800血细胞分析仪结果：Hb 160 g/L,PLT 180×109/L,WBC 13.8×109/L, Lym 40%,Mid 18%,Gran 42%。涂片分类：杆状4%，中性粒细胞38%，淋巴细胞 17%，单核细胞12%，嗜酸细胞2%，异淋27%。后诊断为传染性单核细胞增多症。例3:刘××,男,45岁,脾切除术后0.5 a，头晕、乏力。 BC?2800血细胞分析仪结果：Hb 85 g/L,PLT 1250×109/L,WBC 8.5×109/L, Lym 20%,Mid 18%,Gran 62%。血涂片分类:杆状:13%,中性粒细胞 16%,淋巴细胞17%,单核细胞12%,晚幼红8%,不明细胞34% ，镜下血小板成堆且形态异常。建议其去上级医院血液科检查，后确诊为粒?单型白血病。例4：李××，男，34岁，BC?2800血细胞分析仪结果：Hb 158 g/L,PLT 132×109/L,WBC 7.8×109/L, Lym 29%,Mid 8%,Gran 63%。血涂片镜检：分类基本符合，红细胞内发现疟原虫。

　　4  讨论

    目前，国内使用的三分类仪器都是根据白细胞的体积大小分类，它不能区分幼稚、嗜酸、嗜碱及单核，更不能识别异淋和有核红细胞及中性粒细胞毒性病变［4］。甚至一些小粒细胞也当作中间细胞，一些大淋巴细胞当作粒细胞计数，还有一些大片成簇的血小板也可当白细胞计数［5］。认真进行血片镜检，并进行综合分析，不仅可以复核计数的准确性，还可以使白细胞分类计数和血细胞形态检验更准确。这样可以使多种常见的贫血、白血病、感染等疾病得到及时、初步甚至是明确的诊断。血涂片镜检应该是血细胞分析的重要部分,是每一个检验工作者的基本功，目前好多医院不重视血涂片，甚至是零涂片，使好多年轻的检验者只认机器，不认识细胞，不能更准确地反映患者情况。检验界众多老前辈都讲到“准确的白细胞分类不能完全脱离显微镜检查”，由此可见，使用自动血细胞分析仪需同时涂片镜检。

【】
  　　［1］马斌国.临床检验质量保证［M］.太原：山西技术出版社，2001：6.

　　［2］临床医学检验技术(师).全国卫生专业技术资格专家委员会编写［M］.北京：人民卫生出版社，2007：1.

　　［3］顾晓菁，巩惠芸.血涂片血小板计数对血液分析仪的复核作用［J］.2004，22（6）：422.

　　［4］叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程［M］.第3版.南京：东南大学出版社.

　　［5］张遂一.血液分析仪测定的白细胞计数严重失误二例报告和分析［J］.上海医学检验杂志，1997，12（3）：187.