UF-100尿液分析仪检测红细胞影响因素的探讨
【关键词】 UF?100；尿液；红细胞；影响因素
UF-100全自动尿液分析仪是日本Sysmex公司20世纪90年代推出的结合流式细胞学技术(FCM)与电阻抗(electric impedance，IMP)及荧光染料染色(fluorescence staining)，对尿液成分进行鉴别及计数，可以快速筛选、及时报告，提供红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、管型(CAST)、上皮细胞(EC)、细菌(BACT)的定量检测数据，并对病理管型(Path.CAST)、小圆上皮细胞(SRC)、盐类结晶(X'TAL)、精子(SPERM)、类酵母菌(YLC)进行指示分析，提供尿液标准化检测的质控数据和文件，检测的精密度重复性好，而且速度快。尿液中RBC分为均一型(RBC形态正常)、非均一型(RBC形态异常、多样不规则)和混合型(部分RBC形态异常),对鉴别RBC来源(肾小球、肾小管或下泌尿道)有价值，更重要的是能提供血尿时来源的信息，从而鉴别肾源性血尿和非肾源性血尿，但任何高性能仪器都会有误差，为了给临床提供更准确的报告，我们对可能出现的影响因素进行分析：
1 标本收集及运送
收集和运送尿的容器应干净防漏，并由透明且不与尿液或成分发生反应的惰性材料放置，不可重复使用。收集容器体积>50 ml，具有直径>4.0 cm的圆形开口，具有较宽的底部便于运送。留取时最好洗清外阴，留取中断尿，标本收集2 h内检测完毕，否则时间延长有利于细菌生长，可造成RBC皱缩破坏。
2 人为因素
如化学试剂混入等意外情况，应用有荧光或激光激发下有类似荧光作用的药物，如橡胶手套中化石粉等混入。
3 机内因素
仪器的状态不好，如激光偏移、激光值过低、电源不稳定等。仪器正常状态时,报告出现review标记，表示需要复检，代表检测结果异常需镜检，有两类原因可产生review标记：一种是检测结果超出镜检的设定范围；另一种是由于样品异常或因仪器自身使检测结果可信度降低，议定以下几种错误需再检：总颗粒数>40 000；电导率(Conductivity)<5 ms/cm或>38 ms/cm；RBC的荧光强度分布宽度(RBc?FL?DVSD)>40 ch，或RBC数＞2.5/μl，其Fsc＞200 ch或RBC数＞15/μl，未溶解RBC＜20% 。
3.1 UF-100检测RBC的假阳性干扰 RBC的形态大小与草酸钙结晶非常相似,在散射图上两者交叉分布,因此对RBC计数结果影响较大。霉菌滴虫等在大部分情况下仪器可以把它们和RBC加以区分,但在某些病例中仍有和RBC发生重叠的情况,故RBC计数时大量的霉菌存在也干扰了RBC计数。当细菌、结晶和类酵母菌的数量超出仪器测量范围,会导致RBC计数可信度降低。RBC平均荧光强度(RBC?MFI值)较高时，提示RBC假阳性的可能性较大，如果同时RBC的荧光强度分布宽度(RBC?FL?DWSD值)也较大，则基本可以判断存在RBC假阳性。如果UF-100提示RBC较多，与普通镜检不符合时，在环境温度较低时，要注意结晶影响，酵母样细胞和细菌团块的干扰是常见的问题。
3.2 UF-100检测RBC的假阴性干扰 一般来说假阴性干扰很少出现，如果出现可以从以下几个方面来考虑。标本有无放置时间过长，引起RBC溶血。标本中RBC有无溶血可用试纸法辅助验证，也许是真正的潜血阳性标本，没有RBC；用UF-100 check、QC检查仪器的工作状况和敏感度,激光和电压有无偏移或波动，仪器有无线性漂移等情况，使很低的RBC浓度检测偏离；注意标本是否弄错；特殊病例和特殊情况下RBC不易被染液染色或被其他染液染色，影响正常结果，例如接受过眼底荧光血管造影的患者，由于尿中有荧光染料会明显影响UF-100的结果；服用过可以产生荧光染料类似作用的药物和抗生素，其他还有甲苯、汞类防腐剂、酒精、甲醛、戊二醛等影响尿标本中RBC的检测。UF-100检测出RBC的数量却没有提示出RBC来源的信息。UF-100检测尿中RBC是由RBC前向散射光分布宽度(RBC?Fsc?DW)和70％RBC前向散射光强度(RBC?P70Fsc)的检测结果得出RBC提示信息(RBC?info)的含义。肾小球血尿的RBC?P 70 Fsc的均值都<80 ch，实际测定均值为64.9 ch。非肾小球性血尿RBC?P 70 Fsc的均值都>100 ch，均值是114.0左右，同时RBC?Fsc?DW的均值也在15.7 ch左右。前提是未溶解RBC数量分布宽度、前向散射光、荧光等信息在仪器要求的范围界限内。如果上述信息出现异常，则拒绝报告RBC来源的信息，仪器的设定是未溶解RBC(non?lysed RBC)>10/μl，RBC?info才显示，才出现血尿来源的提示。如果未溶解RBC(non?lysed RBC)的比例太低，例如non?lysed RBC≤20％同时RBC≥15/μl，RBC信息RBC?info不显示，提示可能有RBC溶血、细胞碎片增加、结晶过多或细菌过多,镜检提示REVIEW,如RBC(Fsc＞200 ch)≥ 2.5/μl，即体积超过200 ch的RBC达一定数量，提示结晶增多影响RBC低可信度，显示REVIEW,再如RBC荧光脉冲宽度RBC?FL?DWSD≥40 ch，荧光强度分布过大，RBC≥20/μl，RBC数量多，则提示RBC可能受酵母样细胞如真菌、白色念珠菌等的干扰，误计RBC提示REVIEW。UF-100全自动尿液分析仪能准确快速测出尿中多项参数，但任何高档仪器都存在假阳性、假阴性，都不能完全代替尿沉渣镜检，但它的快速标准化及对血尿的来源分析优于镜检，所以只有正确了解UF-100性能原理，才能对可能引起的误差原因进行分析，尿干化学分析、UF-100尿沉渣、显微镜检查三者结合起来才能为临床提供可靠的诊断依据。
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［1］ 刘一君,沈大江.UF-100流式尿沉渣分析仪常见误差原因及分析［J］.检验医学杂志,2002，11(17):4.
［2］ 丛玉隆,王力.当代检验分析技术与临床［M］.北京:技术出版社，2002：4.
