3株金黄色葡萄球菌对消毒剂及紫外线抗性研究
作者：田凤喜，姜俊，陆桃红，孙雅馨，高灵宝
【摘要】 目的：了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对常用消毒剂及紫外线的抗性。方法：测定了醋酸氯已定、醋酸氯已定醇、碘伏、乙醇对MRSA、甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)和金黄色葡萄球菌ATCC 6538作用1 min、2 min后的最小杀菌浓度(MBC)及紫外线杀菌试验。结果：醋酸氯已定、碘伏对MRSA的MBC明显高于MSSA及ATCC 6538，而醋酸氯已定醇、乙醇对三株菌的最小杀菌浓度均相近，三株菌对紫外线抗性相近。结论：MRSA对乙醇、醋酸氯已定醇较为敏感，且乙醇作用时间延长，杀菌效果显著增强。
【关键词】 金黄色葡萄球菌；消毒剂；紫外线；最小杀菌浓度
金黄色葡萄球菌引起的医院感染在逐年上升，其中由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)引起的占50％以上，随着消毒剂的应用，金黄色葡萄球菌对消毒剂逐渐会产生耐药性是不可避免的，但对消毒剂与紫外线的抗性是否与耐抗生素有一致性，是否存在某种内在联系，这对控制医院感染关系很大。国内外学者研究较少且说法不一。本试验对临床分离的MRSA、甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)和标准菌株ATCC 6538作常用消毒剂和紫外线杀菌试验，旨在探索它们的抗性有无差别。
1 材料与方法
1．1 菌种 临床分离的1株MRSA，1株MSSA，金黄色葡萄球菌标准菌株(ATCC 6538)。
1．2 消毒剂 0．1％醋酸氯已定，0．5％醋酸氯已定醇，70％乙醇(以上为本院制剂室配制)，碘伏(有效碘含量0．5％，爱德福集团生产)。
1．3 中和剂的选择 碘伏为2％硫代硫酸钠；醋酸氯已定及醋酸氯已定醇为1％吐温?80，1％硫代硫酸钠，1％卵磷脂；乙醇为生理盐水稀释法。
1．4 最小杀菌浓度(MBC)测定 将不同消毒剂用无菌蒸馏水稀释成一系列试验浓度，分别取5.0 ml加入灭菌试剂中，于20 ℃±2 ℃水浴条件下5 min，向各个浓度管液中加入0．1 ml含菌为5×106 cfu/μl的菌悬液，混匀作用1 min、2 min后，分别取药菌混合液0．5 ml，加入装有4．5 ml含相应中和剂的营养肉汤管中，混匀，置37 ℃培养箱培养48 h，观察结果。以含消毒剂与中和剂反应形成的中和产物加0．1 ml菌悬液为阳性对照；以含中和剂产物的营养肉汤为阴性对照。
1．5 紫外线的杀菌试验 取 MRSA、 MSSA， ATCC 6538经18 h～24 h培养，取单个菌落均匀涂于普通型平板上，每组留一个平板直接置于37 ℃培养箱培养24 h为对照组，其他置于超净工作台的紫外线灯管下(距离60 cm，强度30 W／cm2)，分别照30 min、60 min、90 min后，放入37 ℃培养箱内培养24 h～48 h。
2 结果
见表1、表2、表3。
表1 4种消毒剂不同浓度下作用1 min后杀菌效果（略）
注：表内分母为试验次数，分子为长菌次数。
表2 4种消毒菌不同浓度下作用2 min后的杀菌效果（略）
注：表内分母为试验次数，分子为长菌次数。
表3 紫外线在不同作用下的杀菌效果（略）
注：“+”表示有菌生长，“-”表示无菌生长。
3 讨论
抗生素和消毒剂的大量使用导致某些耐药菌株的产生已越来越受到医学界的重视。金黄色葡萄球菌引起的院内感染亦受到普遍关注。我们选用临床上常用的醋酸氯已定、醋酸氯已定醇、碘伏、乙醇4种消毒剂，观察其对临床分离的 MRSA、 MSSA菌株及标准菌株ATCC 6538的消毒作用。结果显示，在正常使用浓度范围内对金黄色葡萄菌中无论是MRSA、MSSA都有很好的灭菌作用。醋酸氯已定醇对MRSA、 MSSA与标准菌的MBC基本一致，而MRSA对醋酸氯已定的抗性较MSSA、标准菌强，说明MRSA对醋酸氯已定醇更敏感，与Suzuki?J［1］报道相似。酒精在作用1 min时的MBC为70％，2 min时MBC为35％，是4种消毒剂随时间延长，杀菌效果增强最显著的。碘伏是4种消毒剂中绝对使用量最低的，对皮肤黏膜无刺激，可直接用于创面的消毒，但MRSA对碘伏的抗性强于MSSA，与张艳红［2］及Mycock［3］的研究结果相似。我们还观察了三种菌株对紫外线的抗性作用。结果显示，在作用30 min时，这3种菌株均可以生长，而作用60 min以上，则均无菌生长，这3种菌株对紫外线的抗性作用相似，临床上适当延长紫外线的作用时间对这几种细菌可起到较好的消毒效果。
【】
［1］ Suzuki J.In vitro susceptibility of staphy lococcus aureus inciuding MRSA to four disinfectants［J］. ASDC J Dent Clild,1997,64(4):260?263.
［2］ 张艳红，刘秀岩，朱莉莉，等.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对碘伏和氯已定抗性的研究［J］.流行病学杂志，2004，25(3):248?250.
［3］ Mycock G.Methicillin anticeptic?resistance S.anreus［J］.Lancet,1985：49?950.
