早期糖尿病肾病三种尿微量蛋白及尿沉渣检测的意义探讨
作者：黄柳萍，梁燕，余洁玲，何振辉，马丽
【关键词】 糖尿病肾病
［关键词］ 糖尿病肾病；尿微量蛋白；尿沉渣
［摘 要］ 目的：探讨尿沉渣和尿微量蛋白(Microalbumin,mAlb)、转铁蛋白(Transferrin,TRF)。α微球蛋白(α1Mficroglobulin,α1MG)及肌酐(Cr)与早期诊断糖尿病肾病(Diabetic kidney disease,DN)的临床价值。方法:用Sysmex UF100型尿沉渣全自动分析仪检测尿白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、管型(CAST)；mAlb检测用免疫透析比浊法，TRF、α1MG 检测用速率散射比浊法：CCr检测Lx20全自动生化分析仪。结果：尿蛋白定性阴性的糖尿病(DM)组尿mAlb/Cr为(26.2±9.55)mg/mmolCr，TRF/Cr为(0.36±0.29)mg/mmolCr，α1MG/Cr(3.34±2.95)mg/mmolCr,较正常对照组差异有显著性(P<0.01)；尿沉渣中的WBC、RBC的水平高于正常对照组(P<0.01和P<0.05)，但WBC、RBC与mAlb/Cr水平无相关性(P＞0.05)，CAST与正常对照组无明显差异(P＞0.05)。结论：尿mAlb/Cr、TRF/Cr、α1MG/Cr可作为DM早期肾损害敏感而又可靠的临床指标，但WBC、RBC、CAST尚不能作为DN早期诊断的临床指标。
糖尿病肾病(DN)是DM的一种常见并发症，约占DM病人的1/3以上。DM是一个较长期的进程，从微量白蛋白开始，经过10 a~20 a可致终末期肾衰，成为DM病人的一个重要死因［1］。因此，他的早期诊断对防治DM并发症具有重要意义。我们测定了30例DM患者尿微量白蛋白(mAlb)：α1微球蛋白(α1MG)、转铁蛋白(TRF)、肌酐(Cr)及尿沉渣中白细胞(WBC)、红细胞(RBC)和管型(CAST)，旨在探讨各项指标与早期诊断DN的诊断价值。
1 材料和方法
1.1 研究对象
30例均为本院2003年至2004年内分泌科住院DN病人，诊断符合1985年WHO糖尿病诊断标准，且受检者尿蛋白定性均为阴性。其中男17例，女13例，平均年龄(50±11.4)岁，所有患者均无原发性肾病、尿路感染及近期使用肾毒性药物史等，正常对照组为本院健康体检者共30例，男14岁，女16例，平均年龄(49±12.1)岁。
1.2 仪器与试剂
尿沉渣(WBC、RBC、CAST)检测用日产Sysmex UF100 型尿沉渣全自动检测仪及配套试剂，原装质控品。mAlb检测用上海太阳生物技术公司提供的免疫浊度法试剂盒。α1MG、TRF检测用Beckman公司Array360分析系统及进口配套试剂，Cr检测用Lx20全自动生化分析仪及配套试剂。
1.3 方法
留取受试者尿液(早晨第一次尿液除外)20 ml，取10 ml尿液采用2试带法做尿蛋白定性检测，2 h内用UF100检测尿沉渣内WBC、RBC、CAST参数，另10 ml尿液离心取上清液置于清洁管中，保存于-20 ℃低温冰箱中待用。mAIb检测用免疫透射比浊法，TRF、α1MG检测用速率散射比浊法，Cr检测用电极法，结果分别以mAlb/Cr、TRF/Cr、α1MG/Cr表示。
1.4 统计学处理
采用成组设计两样本均数比较的t检验，相关性采用直线相关分析。
2 结果
正常对照组与尿蛋白定性阴性的DN组mAlb/Cr、TRF/Cr、α1MG/Cr、WBC、RBC、GAST的检测结果(见表1)，从表1可见DN组mAIb／Cr为(26.0±9.55)mg/mmolCr，TRF/Cr为(0.36±0.29)mg／mmolCr，α1MG/Cr为(3.34±2.95)mg／mmolCr，WBC为(62．3±23.1)个/μl,明显高于正常对照组mAlb／Cr为(1.04±0．29)mg／mmolCr,TRF/Cr为(0.17±0.08)mg/mmolCr,α1MG/Cr为(0.97±0.31)mg/mmolCr,WBC为(5.53±1.42)个/μl,且两组间差异有显著性(P<0.01)。
本组资料显示，随着尿蛋白定性阴性的糖尿病肾病组mAlb/Cr排泄量增加，尿沉渣分析中WBC、RBC、CAST与mAlb/Cr无明显的相关性(r分别为-0.14、-0.13、-0.11，P分别为0.51、0.51、0.55)。表1 尿蛋白定性阴性的DN组和对照组mAlb/Cr,TRF/Cr,α1MG/Cr及尿沉渣结果比较（略）注：**P<0.01，*P<0.05
DN是DM的微血管病变的重要并发症之一。由于其发病隐匿，且传统的尿蛋白检查及肾功能检查难以发现DN的早期肾损伤，一直以来使其成为DM致死、致残的重要原因，并且近年其发病呈现增高趋势。所以对DN的早期诊断具有重要的意义。
尿mAlb已被广泛接受为早期糖尿病肾病的诊断指标。本实验结果显示尿蛋白阴性的DM组尿中mAlb/Cr、TRF／Cr的水平均明显高于正常对照组(P<0.01)，说明mAlb/Cr,TRF/Cr在尿蛋白阴性的早期DN患者中排出量已有所增加。正常肾小球毛细血管基底膜具有孔径屏障(5.5 nm)和电荷屏障(负电荷)。微量白蛋白分子量为69 000，分子直径为3.6 nm；转铁蛋白分子量为7 700，分子直径为3.8 nm,两者均带负电荷，在正常情况下，这两种小分子蛋白不易透过带负电荷的肾小球基底膜，少量滤过后几乎被近曲小管重吸收［2］。DM病人由于长期的高血糖使肾小球外基质的合成增加，基底增厚，肾小球系膜扩张［3］，加之糖酰化速度增加，组织缺氧，血液黏滞度增加；同时由于内皮素和一氧化碳等血管活性物质使肾小管毛细血管张力变大，引起肾血液动力学改变，使肾小球处于高滤过状态，收起孔径屏障受损，此外，DN患者滤过膜上的所带负电荷的硫酸乙酰肝素、唾液酸合成减少使肾小球的电荷屏障受损，导致早期肾损伤［4，5］。Alb、TRF是反映早期肾小球受损的标志蛋白。
α1微球蛋白是由淋巴细胞和肝脏产生的糖蛋白，分子量为27 000~33 000，是反映肾小管功能的主要指标。正常人的α1微球蛋白几乎全部在近曲小管重吸收，尿中含量极微。DM患者由于长期糖代谢异常，糖原及铁在肾小球上皮细胞堆积可引起氧自由基增多，导致磷脂过氧化，破坏细胞膜结构，膜通透性增加，致使肾小管重吸收功能受损［6］，从而α1MG在尿中排出量增加。本文显示尿蛋白阴性的DN患者的α1MG水平明显高于对照组(P<0．05)，所以α1MG可作为早期DN肾小管受损的重要标志性蛋白。
鉴于尿量变异大，尿内溶质颗粒受尿量的影响，收集24 h尿繁琐，不为患者接受。血肌肝是唯一从肾全部滤过，且完全不受肾小管吸收和分泌的影响，所以肌肝浓度较为恒定，取随机尿测定尿微量蛋白用尿肌肝效正可大大提高mAlb、TRF、α1MG检测的准确性。
正常情况下，尿沉渣中不存在或只存在少量的WBC、RBC和CAST。但在DN时肾小球基底膜断裂，RBC排出量增加；糖尿病患者由于糖、脂肪、蛋白代谢紊乱、可导致免疫功能低下，容易发生感染，如泌尿系统感染［7］，从而引起WBC排出量增加；当肾脏病变严重时，中分子量及高分子量的蛋白排出增加，可使CAST形成及排出增多。
本实验尿蛋白阴性的DN组中WBC、RBC的水平高于正常对照组，(P<0.01和P<0.05)，而CAST的水平与正常对照组无明显差异。但WBC、RBC、CAST与mAlb/Cr水平无明显相关(P>0.05)，故蛋白阴性的DN 组中WBC、RBC增高值得关注，CADT对DN的早期诊断意义不大。
综上所述，DM患者应早期检测尿中mAlb/Cr、TRF/Cr、α1MG/Cr,其增高对DN的早期诊断意义显著，WBC、RBC对早期DN的诊断有一定临床意义，但CAST尚不能作为DN早期诊断的临床指标。
：
［1］Koulourids E.Diabetic nephropathy in children adolescents and its consequences in adults［J］.J Pediatr Endocrinol Metab,2001,(supp15):13671368.
［2］Makino H,Ikeda S,Haramoto t,et al.Heparan proteoglycans are lost patients with diabeic nephropathy［J］.Nepron,1992,61:415.
［3］王效光，王亚莉.糖尿病肾病研究的最新进展［J］.新医学，1999，30(12)：720.
［4］Monnier VM.Nonenzymatic glycosylation the maillard reaction and the aging process［J］.J Geron,1993,45:105109.
［5］Wu JT.Advanced glycosylation and products:a new disease marker for diabetes and aging［J］.J Clin Lab Anal,1993,7:252254.
［6］邹效慢，陆菊明.糖尿病肾小管功能的改变［J］.国外医学内分泌学分册，1997，17(3)：120121.
［7］巩正福，张敏，田江娟.糖尿病患者尿沉渣镜检研究分析［J］.中西医结合杂志，2001，10(12)：1177.
